生物化学实验PDF电子书下载

第一部分 生物化学实验的基础知识一、生物化学实验的特点、目的及重要性 1

二、生物化学实验室规则 1

三、实验误差与数据处理 2

四、实验记录及实验报告的书写 7

第二部分 常用生物化学实验基本理论第一章 比色分析法及分光光度法 9

第一节 比色分析法和分光光度法的原理 10

第二节 荧光光谱分析法 15

第二章 几种常用的生物大分子实验技术 18

第一节 沉淀法 18

第二节 透析和超滤 21

第三节 浓缩和干燥 22

第四节 离心技术 25

第三章 电泳技术 27

第一节 电泳的基本原理 27

第二节 影响电泳迁移率的因素 28

第三节 电泳时电流维持机理 30

第四节 常用电泳简介 31

第四章 层析技术 39

第一节 基础知识 39

第二节 分配层析 40

第三节 离子交换层析 42

第四节 凝胶层析 44

第五节 亲和层析 47

第六节 吸附层析 47

第五章 酶联免疫吸附测定技术 49

第一节 基本原理及方法类型 49

第二节 操作条件 51

第三节 制备酶标记物的方法 52

第六章 PCR技术 54

第一节 PCR技术简介 54

第二节 PCR基本原理 56

第三节 PCR技术特点及问题解决 57

第四节 PCR技术在医学上的应用 58

第五节 PCR技术的发展 60

第三部分 生物化学基础实验 65

实验一 血红蛋白的吸收光谱及其含量测定 65

实验二 蛋白质的比色分析法（双缩脲法、酚试剂法） 67

实验三 紫外分光光度法测定蛋白质 70

实验四 单底物酶促反应Km测定 71

实验五 血清谷丙转氨酶活性测定（赖氏比色法） 73

实验六 血糖的含量测定 75

实验七 紫外分光光度法对核酸定量和质量检测 80

实验八 RNase抑制法抽提分离总RNA 81

实验九 DNA含量测定（改良二苯胺法） 82

实验十 RNA的测定（苔黑酚法） 84

实验十一 醋酸纤维素薄膜电泳 85

实验十二 聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳分离血清蛋白质 87

实验十三 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 89

实验十四 乳酸脱氢酶同工酶的分离 90

实验十五 亲和层析法纯化尿激酶 93

实验十六 PCR法检测淋球菌 95

实验十七 组织过氧化脂质定量测定 96

实验十八 超氧化物歧化酶蛋白含量和活性测定 98

实验十九 影响酶活性的因素（温度、pH、抑制剂和激动剂） 99

实验二十 SOD活力测定（试剂盒） 101

实验二十一 MDA的测定（试剂盒） 103

第四部分 生物化学综合性实验 105

实验一 酵母RNA的提取 105

实验二 核酸的定量测定（定磷法） 106

实验三 肝中DNA的提取 107

实验四 质粒DNA的提取 109

实验五 质粒的酶切与鉴定 113

实验六 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的相对分子量 115

实验七 IEF/SDS-PAGE双向电泳分离血清蛋白质 118

实验八 胡萝卜素的吸附层析 122

实验九 DEAE-纤维素离子交换层析法分离血清蛋白质 123

实验十 细胞色素C的制备与纯化 124

实验十一 酶联免疫吸附测定法测定血清γ-球蛋白 127

实验十二 牛血铜锌超氧化物歧化酶分离提纯与活性测定 129

实验十三 血红蛋白与核黄素的凝胶层析分离 131

第五部分 生物化学设计性实验 133

实验一 肝中RNA的提取及测定 133

实验二 双相纸层析（分配层析）分离混合氨基酸 133

实验三 碱性磷酸酶的制备及活力测定 134

实验四 琼脂糖凝胶电泳鉴定肝癌细胞总RNA的提取 134

实验五 血清γ-球蛋白分离和纯化 135

实验六 大鼠心肌DNA的提取及测定 135

第六部分 生物化学实验（英文版） 135

1 PROTEIN DETERMINATION BY THE BIURET REACTION 137

2 ISOLATION OF NUCLEIC ACID FROM LIVER 138

3 DETERMINETION FOR AMPLIFIED DNA 140

4 ADSORPTION CHROMATOGRAPHY OF CAROTENE 142

5 POLYACRYLAMIDE GEL ELECTROPHORESIS FOR SERUM PROTEINS 143

6 THE MEASUREMENT OF THE CONTENT OF HEMOGLOBIN 145

7 CELLULOSE ACETATE MEMBRANE ELECTROPHORESIS FOR SERUM PROTEINS 147

8 DETERMINATION OF Km OF ALKALINE PHOSFHATASE 148

9 EXTRACTION OF RNA OF YEAST 150

10 COMPETITIVE INHIBITION OF MALONATE TO SUCCINATE DEHYDROGENASE(SDH) 151

11 CELLULOSE ACETATE MEMBRANE ELECTROPHORESIS FOR ISOENZYME OF LACTIC DEHYDROGENASE 152

12 THE USE OF THE SPECTROPHOTOMETER 155

13 THE MEASUREMENT OF THE BLOOD SUGAR 156

14 THE EFFECT OF TEMPERATURE,pH,ACTIVATORS AND INHIBITORS ON THE ENZYME ACTIVITY 156

第七部分 附录 161

附录一 实验室安全及防护知识 161

附录二 玻璃仪器的洗涤及洗涤液的配制 162

附录三 生化实验样品的制备 163

附录四 生化实验中常用仪器的使用 165

附录五 化学试剂的规格与保管 173

附录六 常用缓冲溶液的配制 175

附录七 标准缓冲液的配制 178

附录八 离心机转数与相对离心力的换算 179