大豆在暗诱导下光周期及衰老相关基因的差异表达研究PDF电子书下载
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- 作 者:赵琳著
- 出 版 社:北京:中国农业科学技术出版社
- 出版年份:2009
- ISBN:9787802338692
- 页数:182 页
1 引言 1
1.1 植物开花机理的研究进展 3
1.1.1 植物花芽分化过程的调节机制 4
1.1.2 环境条件对植物成花的调控 6
1.2 大豆光周期现象的研究进展 19
1.2.1 大豆生育期性状的光周期反应特性 19
1.2.2 光周期对大豆农艺性状和籽粒品质的影响 22
1.2.3 大豆中光敏感性E等位基因的研究进展 23
1.2.4 大豆开花时间基因图谱的绘制 24
1.3 拟南芥开花诱导的分子生物学研究进展 27
1.3.1 周期途径 28
1.3.2 春化促进途径 33
1.3.3 自主途径 34
1.3.4 赤霉素途径 35
1.3.5 染色质结构和开花抑制 36
1.3.6 拟南芥开花途径的整合 37
1.3.7 植物中的拟南芥开花途径的基因保守性 39
1.4 植物衰老的研究 44
1.4.1 衰老的生理生化反应特性 44
1.4.2 衰老学说 46
1.4.3 衰老的调控 49
1.5 RAV转录因子的研究进展 52
1.6 基因差异表达的研究方法 53
1.6.1 基于cDNA的PCR扩增方法 54
1.6.2 基于差减杂交的克隆方法 56
1.6.3 表达序列标签 61
1.6.4 基因表达系列分析 61
1.6.5 微阵列杂交 62
1.6.6 实时荧光定量PCR技术 64
1.7 植物遗传转化 65
1.7.1 植物遗传转化方法 65
1.8 研究目的和意义 69
2 材料和方法 73
2.1 实验材料和试剂 75
2.1.1 植物材料 75
2.1.2 菌种及载体 75
2.1.3 主要试剂 75
2.2 实验方法 76
2.2.1 抑制性消减杂交(SSH) 76
2.2.2 抑制消减文库的构建 84
2.2.3 反向Northern blot斑点杂交筛选消减文库 87
2.2.4 测序及序列同源性检索 89
2.2.5 实时荧光定量PCR进一步验证差异表达的片段 90
2.2.6 RACE方法克隆大豆GmRAV基因 92
2.2.7 Real-time RT-PCR分析GmRAV的表达 96
2.2.8 植物表达载体pBl121-GmRAV的构建 97
2.2.9 农杆菌介导法转化烟草叶盘 101
2.2.10 转基因烟草的分子生物学检测 103
2.2.11 转GmRAV基因烟草T2代功能分析 106
3 结果与分析 109
3.1 抑制性消减杂交(SSH) 111
3.1.1 大豆总RNA的提取 111
3.1.2 SMART技术合成cDNA 111
3.1.3 双链cDNA的Rsal酶切结果 112
3.1.4 正向差减产物的PCR扩增结果 113
3.1.5 反向Northern斑点杂交筛选结果 114
3.1.6 测序与同源性检索结果 116
3.1.7 候选cDNA片段差异表达检测分析结果 116
3.1.8 基因功能相关分析 117
3.2 大豆GmRAV基因克隆 122
3.2.1 大豆GmRAV基因5'RACE和3'RACE克隆 122
3.2.2 大豆GmRAV基因全长序列的生物信息学及系统进化分析 123
3.2.3 GmRAV全长基因组DNA序列的获得 127
3.3 大豆GmRAV基因表达研究 128
3.3.1 大豆叶片中GmRAV基因在LD和SD条件下基因表达 128
3.3.2 大豆GmRAV基因在LD和SD条件下组织特异性表达分析 128
3.3.3 激素对大豆叶片中GmRAV基因的表达影响 130
3.4 植物表达载体pBI121-GmRAV的构建 130
3.5 烟草的遗传转化 133
3.5.1 丛生芽和根的诱导 133
3.5.2 转基因烟草的PCR检测 133
3.5.3 转基因烟草的PCR-Southern检测 134
3.5.4 转基因烟草的Northern blot检测 136
3.5.5 长日照和短日照下转基因烟草的T2代表型观察 136
3.5.6 转GmRAV基因烟草植株矮化与BR和GA激素有关 137
3.5.7 过量表达GmRAV增强了ABA促进叶片衰老的效应 139
3.5.8 暗处理下GmRAV过量表达加速植株的衰老 140
4 讨论 141
4.1 光周期和衰老相关基因表达谱分析 143
4.2 光周期和衰老相关基因的克隆 146
4.3 植物表达载体的构建及烟草的遗传转化 148
4.3.1 采用农杆菌转化植物的优势 149
4.3.2 转化农杆菌及其鉴定 149
4.3.3 用于转化的农杆菌的培养 149
4.3.4 叶盘法转化烟草 150
5 结论 153
参考文献 158
附录 176
攻读学位期间发表的学术论文 180
图版 181
- 《美国的伤痕 独立战争与美国政治的暴力基因》(德)霍尔格·霍克(Holger Hoock)著 2019
- 《差异与认同》(中国)吴新兰,张鸿雁 2019
- 《华为基因 任正非的商业哲学与华为精神》冷湖编著 2019
- 《解析理查德·道金斯自私的基因》Nicola Davis著 2019
- 《基因 英文 12》(美)克莱伯斯,(美)高登斯坦,(美)基尔帕特里克著 2018
- 《人类六万年 基因中的人类历史》张振,李辉 2019
- 《基于超支化聚合物制备纳米晶体与诱导纳米晶体组装》石云峰著 2019
- 《基督教文化学刊 第38辑 2017秋 “差异”与“间距”》杨慧林主编 2017
- 《利用多倍体诱导及转基因技术提高植物抗逆性研究》 2016
- 《转基因的前世今生》方玄昌主编 2019
- 《大脑修复术》姚乃琳著 2019
- 《声声入心 重塑你的声音魅力》(中国)赵琳 2019
- 《跨文化教育视阈下的大学英语教学研究与实践》林琳著 2019
- 《中国学术思想研究辑刊 二一编 第1册 战国时期道家之宇宙生成论》郑倩琳著 2015
- 《茉茉书房》茉琳著 2019
- 《时间力》(日)知琳著 2019
- 《人民币国际化战略研究》唐文琳著 2019
- 《中国现代人物油画造型语言研究》徐琳琳著 2019
- 《高校图书馆管理与阅读服务模式创新》杨琳著 2019
- 《张贤亮文学和电影作品比较研究》王琳琳著 2019
- 《钒产业技术及应用》高峰,彭清静,华骏主编 2019
- 《现代水泥技术发展与应用论文集》天津水泥工业设计研究院有限公司编 2019
- 《中国当代乡土小说文库 本乡本土》(中国)刘玉堂 2019
- 《异质性条件下技术创新最优市场结构研究 以中国高技术产业为例》千慧雄 2019
- 《Prometheus技术秘笈》百里燊 2019
- 《中国铁路人 第三届现实主义网络文学征文大赛一等奖》恒传录著 2019
- 《莼江曲谱 2 中国昆曲博物馆藏稀见昆剧手抄曲谱汇编之一》郭腊梅主编;孙伊婷副主编;孙文明,孙伊婷编委;中国昆曲博物馆编 2018
- 《中国制造业绿色供应链发展研究报告》中国电子信息产业发展研究院 2019
- 《中央财政支持提升专业服务产业发展能力项目水利工程专业课程建设成果 设施农业工程技术》赵英编 2018
- 《中国陈设艺术史》赵囡囡著 2019