医学分子生物学原理与方法PDF电子书下载

上篇 医学分子生物学原理 1

第一章 绪论 3

一、医学分子生物学的定义和性质 3

二、医学分子生物学的内容和体系 3

三、医学分子生物学简史 4

四、医学分子生物学的发展趋势 8

一、原核生物 12

二、真核生物 12

第一节 有机体 12

第二章 有机体、染色体、基因组与基因 12

三、病毒 13

四、系统进化树 14

第二节 染色质与染色体 14

一、染色质 16

二、染色体 17

三、端粒与端粒酶 19

第三节 基因组与基因 19

一、原核生物基因组 20

二、细菌基因组研究及意义 22

三、真核生物基因组 24

四、人类基因组的特点与人类基因组计划 25

五、DNA芯片及DNA微阵列 31

第三章 生物大分子（Ⅰ）——核酸 35

第一节 核酸的分子结构 35

一、核酸的组成 35

二、DNA的结构与性质 36

三、RNA的结构及其特点 41

第二节 核酸的生物合成 48

一、DNA的生物合成 48

二、RNA的生物合成 51

第三节 RNA的酶活性和反义RNA 54

一、核酶——具有催化活性的RNA 54

二、反义RNA 57

第四章 生物大分子（Ⅱ）——蛋白质 62

第一节 蛋白质的基本组成与生物合成 62

一、蛋白质的元素组成 62

二、蛋白质的基本组成单位…一氨基酸 62

三、肽键与肽单元 65

四、蛋白质的生物合成 65

一、一级结构 67

第二节 蛋白质的结构层次 67

二、二级结构 68

三、超二级结构和结构域 71

四、三级结构 71

五、四级结构 71

六、球状蛋白质构象的运动 72

第三节 蛋白质的功能体系 73

第四节 蛋白质工程 74

第一节 原核生物基因表达的调控 76

一、转录水平的调控 76

第五章 基因表达的调控 76

二、翻译水平的调控 78

第二节 真核生物基因表达的调控 81

一、基因表达调控的信号 81

二、基因表达调控的水平 82

三、转录水平的调控 83

四、转录后水平的调控 90

五、翻译水平的调控 92

六、蛋白质加工对翻译的调控 94

第六章 分子克隆 97

一、限制性核酸内切酶 98

第一节 分子克隆中常用工具酶 98

二、DNA聚合酶 100

三、DNA连接酶 101

四、反转录酶 101

五、末端脱氧核苷酸转移酶（末端转移酶） 102

六、碱性磷酸酶 102

七、依赖于DNA的RNA聚合酶 102

第二节 基因克隆常用载体 102

第三节 目的基因的分离与制备 109

二、通过cDNA文库分离、筛选基因 110

一、通过基因组文库分离、筛选基因 110

三、人工合成基因 112

四、应用聚合酶链反应获取目的基因 112

第四节 目的基因的体外重组 112

一、几种常用的DNA分子连接方法 113

二、定向克隆 114

第五节 重组子导入宿主细胞 114

一、大肠杆菌的转化 115

二、λ噬菌体转染受体细胞 116

第六节 阳性重组子的筛选和鉴定 116

一、根据遗传表型筛选 116

二、应用限制性内切酶酶切分析筛选 117

三、核酸探针筛选 118

四、PCR筛选 118

五、原位杂交技术 118

第七章 克隆基因的表达 119

第一节 外源基因在原核细胞中的表达 119

一、原核细胞中的表达调控元件 119

二、外源基因在原核细胞中的表达形成 123

三、包含体 125

五、外源基因在原核细胞中的表达调控 126

四、真核基因在原核细胞中的表达 126

第二节 外源基因在真核细胞中的表达 127

一、哺乳动物细胞表达载体 127

二、外源基因导入哺乳动物细胞 129

三、外源基因在真核细胞中的表达方式 130

第三节 基因表达产物的检测 131

第八章 核酸分子杂交 132

第一节 核酸分子杂交的基本原理 132

一、DNA变性 132

二、DNA复性 133

二、探针的种类及其选择 134

一、探针的概念 134

第二节 核酸探针 134

三、各种标记物及其选择 135

四、杂交信号检测 137

第三节 核酸探针的标记 139

一、放射性标记 139

二、非同位素标记 142

第四节 基因组DNA的Southern杂交分析 143

一、Southern转印 143

二、电转移 144

一、Northern印迹杂交 145

第五节 Northern杂交和RNA斑点杂交 145

三、真空转移 145

二、RNA的斑点和狭线杂交 146

第六节 寡核苷酸探针的杂交方法 146

第七节 杂交反应体系中的主要成分及其影响因素 147

一、核酸分子杂交反应的因素 147

二、常用实验条件的选择 147

第八节 核酸原位杂交及其应用 148

一、核酸原位杂交的基本原理 148

二、核酸原位杂交的基本要点 149

一、PCR基本原理 153

第九章 PCR技术及其在医学上的应用 153

第一节 PCR原理与特点 153

二、PCR技术的特点 154

第二节 PCR系统的组成及PCR最适条件 155

一、耐热DNA聚合酶 155

二、寡核苷酸引物 156

三、三磷酸脱氧核苷酸（dNTP） 157

四、PCR反应缓冲液 157

六、PCR循环数 158

七、易发生的问题及解决方法 158

五、模板DNA 158

第三节 PCR技术的发展 159

一、PCR克隆技术 159

二、PCR直接测序技术 159

三、定量PCR 160

四、PCR体外定点突变 160

五、PCR与突变的分子水平分析 160

六、修饰PCR 161

七、不对称PCR 161

十二、随机引物PCR 162

十一、单一特导性引物PCR 162

九、通用引物PCR 162

八、反转录PCR 162

十、套式PCR 162

十三、倒向PCR 163

十四、免疫PCR 163

十五、碱基替代PCR 164

十六、锚式PCR 164

十九、膜结合PCR 165

二十、简并引物PCR 165

十八、原位PCR 165

十七、mRNA差别显示 165

第四节 PCR技术在医学上的应用 166

一、感染性疾病病原体的诊断和研究 166

二、遗传病相关基因的检测 168

三、恶性肿瘤的诊断和研究 170

四、法医学研究 170

五、在骨髓移植配型中的作用 171

第十章 基因诊断与基因治疗 172

第一节 基因诊断 172

一、单基因遗传病的基因诊断 172

二、多基因疾病的基因定位 174

三、恶性肿瘤的基因分析 176

四、病原体的基因检测 178

五、疾病相关基因的研究策略和方法 179

第二节 基因治疗 181

一、基因治疗的定义与类型 181

二、基因治疗的程序 182

三、基因治疗的目标 186

四、基因治疗的回顾与展望 188

第一节 病毒基因组的结构特点 191

第十一章 病毒分子生物学 191

第二节 乙型肝炎病毒及其基因组结构 192

一、HBV基因编码区 193

二、HBVDNA病毒的复制和繁殖 195

第三节 丙型肝炎病毒 195

第四节 反转录病毒及其基因组结构 196

一、反转录病毒的生物学性质 196

二、反转录病毒（科）基因组的结构 196

三、反转录病毒的基因转录与复制 197

第五节 人类免疫缺陷病毒基因组及其结构 199

二、HIV的基因结构 200

一、HIV的生物学性质 200

三、HIV结构蛋白 201

第六节 疱疹病毒基因组及其结构 202

一、异构体结构 202

二、基因组内部串联重复序列 203

三、基因组末端结构 203

四、不同疱疹病毒基因组的比较 204

第七节 人乳头瘤病毒及基因组结构 204

一、乳头瘤病毒的主要生物学性质 204

二、乳头瘤病毒基因组的特点 205

三、乳头瘤病毒的基因转录 206

第八节 朊病毒 208

一、朊病毒的结构 208

二、PrP基因 209

三、朊病毒的复制 210

四、朊病毒病 211

五、结语 212

第十二章 肿瘤分子生物学 213

第一节 癌基因 213

一、病毒癌基因 213

三、原癌基因的分类 215

二、细胞癌基因 215

四、原癌基因的功能 217

五、原癌基因的激活机理 220

第二节 抑癌基因 222

一、抑癌基因的基本概念 222

二、抑癌基因举例 222

三、抑癌基因失活与肿瘤发生的关系 224

第三节 周期蛋白与肿瘤的关系 225

一、周期蛋白 225

四、周期蛋白－CDK-CDKI系统与肿瘤的关系 226

二、周期蛋白依赖性激酶 226

三、周期蛋白依赖性激酶抑制物 226

第四节 肿瘤转移的分子基础 227

一、肿瘤转移相关基因 227

二、肿瘤转移抑制相关基因 229

第五节 肿瘤的基因治疗 230

一、基因转移 230

二、基因治疗策略 231

第一节 免疫球蛋白 234

一、免疫球蛋白分子的基本结构 234

第十三章 免疫分子生物学 234

二、免疫球蛋白基因的结构和重排 236

三、免疫球蛋白基因的重排 237

四、Ig基因的表达调控 240

第二节 T细胞抗原受体 242

一、T细胞抗原受体的基本结构 244

二、TCR基因的基本结构 244

第三节 主要组织相容性抗原复合体 245

一、MHC的分子结构 246

二、抗原的加工与呈递 248

一、原发性高血压 251

第十四章 分子心血管病学 251

第一节 心血管疾病发生的分子生物学基础 251

二、高脂血症 254

三、动脉粥样硬化 258

四、心肌疾患 260

五、心律失常 262

第二节 心血管病的分子生物学治疗 262

一、治疗基础 263

二、临床应用 263

一、信息分子的种类 267

第一节 信息分子 267

第十五章 信息传导与受体分子生物学 267

二、信息分子的特性 268

第二节 受体 269

一、受体的概念 269

二、受体的分类 269

三、受体的分子组成 270

四、受体的功能及特性 272

五、受体的调节 274

一、膜受体介导的信息转导和传导 276

第三节 信息的传导途径 276

二、胞内受体介导的信息传递 281

第四节 信息传导障碍及受体病 282

一、信息传导障碍与疾病发生 282

二、受体病 283

第十六章 分子神经生物学 285

第一节 神经元膜和突触的分子结构特点 285

一、神经元膜分子结构特点 285

二、突触的分子结构特点 287

第二节 神经传导的分子基础 288

一、跨膜电位 288

二、突触传递 289

第三节 中枢神经递质 290

一、乙酰胆碱 290

二、单胺类 291

三、氨基酸类 293

第四节 神经肽 294

一、神经肽的分类 294

二、神经肽的生物合成 296

三、神经肽的释放和降解 298

一、自由基的产生 299

第一节 自由基与衰老 299

第十七章 衰老的分子生物学 299

二、自由基对生物大分子的损伤致衰作用 300

三、自由基损伤的防御 301

第二节 基因与衰老 302

一、端粒DNA丢失与衰老 303

二、DNA损伤与衰老 304

三、衰老基因与长寿基因 304

第三节 线粒体DNA与衰老 307

一、mtDNA的结构及遗传特点 307

二、mtDNA损伤与衰老 307

三、mtDNA的突变与衰老 308

第四节 NO与衰老 309

一、NO与中枢神经系统衰老 310

二、NO与循环系统衰老（31o） 310

三、NO与免疫系统衰老 311

四、NO与生殖系统衰老 311

下篇 医学分子生物学实验技术 315

实验一 真核基因组高分子量DNA的制备 315

实验二 人外周血白细胞DNA的制备 317

实验三 质粒DNA的提取与纯化 318

实验四 DNA限制性内切酶消化 321

实验五 琼脂糖凝胶电泳 323

实验六 DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳 325

实验七 DNA体外连接 327

实验八 DNA与RNA含量测定 329

实验九 重组DNA的转化 331

实验十 从琼脂糖凝胶中回收DNA 333

实验十一 重组质粒的筛选 335

实验十二 真核总RNA的制备 337

实验十三 DNA探针的标记 339

实验十四 寡核苷酸探针的制备和标记 343

实验十五 Southern印迹 344

实验十六 DNA斑点杂交 346

实验十七 Northern杂交 348

实验十八 非放射性标记的显示反应 350

实验十九 地高辛标记DNA探针及杂交检测 353

实验二十 蛋白质的SDS-PAGE技术 354

实验二十一 Western印迹法检测表达蛋白 357

实验二十二 包含体的分离溶解与复性 358

实验二十三 PCR临床标本的制备 360

实验二十四 逆转录PCR（RT-PCR） 363

实验二十五 DNA病毒与RNA病毒同步检测 364

实验二十六 单链构型多态性分析（SSCP） 366

实验二十七 PCR－微孔板杂交－ELISA 368

实验二十八 细胞培养基本技术 369

实验二十九 DNA－磷酸钙转染技术 371

实验三十 表达蛋白免疫荧光检测 372

实验三十一 基因免疫 373

实验三十二 荧光原位杂交（FISH） 374

附录一 Internet上常用生物信息资源 375

附录二 分子生物学实验常用数据 376

医学分子生物学常用名词 387