细胞实验指南 （下册）PDF电子书下载

第1章 细胞的培养及分析 1

第1节 哺乳动物细胞培养 1

第2节 培养中细胞的生长及调控 8

第3节 作为细胞和组织培养中底物的细胞外基质成分 19

第4节 成纤维细胞的分离和培养 27

第5节 上皮细胞的培养 32

第6节 人毛细血管内皮细胞的分离 36

第7节 淋巴细胞的分离与转化 44

第8节 鼠胚干细胞的培养和体外分化 47

第9节 原代神经细胞的分离和培养 62

第10节 鸡胚胎成肌细胞的分离和培养 71

第11节 新生大鼠心脏细胞的分离和培养 79

第12节 成年大鼠心室肌肉细胞的分离和培养 83

第13节 体细胞融合 90

第14节 细胞同步化 93

第15节 凋亡分析 102

第16节 流式细胞计量术 118

第17节 纤毛类原生动物腹纤毛类的培养和使用 126

第18节 四膜虫的培养和操作 132

第19节 衣藻的培养和遗传分析 148

第20节 盘基网柄菌的培养和分析 156

第21节 酿酒酵母的培养和转化 165

第22节 非洲粟酒裂殖酵母的培养和转化 182

第23节 海洋无脊椎动物胚胎的培养 188

第2章 代谢标记和蛋白质修饰 201

第24节 用32P-磷酸稳态标记HeLa细胞 201

第25节 mRNA体外细胞核连缀转录分析 207

第26节 蛋白质的代谢放射标记 218

第27节 32P代谢标记细胞研究蛋白质的磷酸化 223

第28节 利用透化细胞与细胞器研究蛋白质的磷酸化 231

第29节 用外源底物进行蛋白质激酶分析 246

第30节 激酶的动力学：应用于双相底物酶的简单酶动力学 259

第31节 磷酸酶的简单制备 266

第32节 蛋白质的甲基化和异戊烯化作用 273

第33节 蛋白质的糖基化 278

第3章 亚细胞的分离 289

第34节 亚细胞的分离 289

第35节 用阳离子硅胶分离技术分离细胞膜 296

第36节 桥粒的分离 307

第37节 粗微体的亚细胞分离 310

第38节 核糖体、核糖体亚基和多核糖体的纯化 326

第39节 高尔基体的分离和分析 335

第40节 从哺乳动物组织中分离过氧化物酶体（微体） 347

第41节 从细胞、组织中分离线粒体 356

第42节 完整叶绿体的分离 362

第43节 从组织或悬浮培养物中制备细胞核 368

第44节 细胞核基质：用于显微和生化分析的制备 377

第45节 用于细胞核蛋白输入的细胞渗透方法 383

第46节 利用瞬时种间异核体分析核质穿梭 389

第47节 核纤层以及富含核纤层组分的制备和鉴定 393

第48节 分离核仁 404

第49节 用于生化和形态分析的染色体制备 410

第50节 DNA的纯化和Southern印迹分析 418

第51节 细胞和组织总RNA的纯化和Northern印迹分析 432

第52节 非洲爪蟾生发泡内含物的涂布制备 439

第53节 从肌肉和非肌肉细胞中纯化肌球蛋白和肌动蛋白 442

第54节 微管、微管相关蛋白和微管依赖的运动蛋白的分离 460

第55节 中间丝的分离和纯化 476

第4章 蛋白质鉴定与分析 485

第56节 蛋白质浓度的测定 485

第57节 蛋白质单-双向凝胶电泳 490

第58节 蛋白质双向凝胶电泳 501

第59节 蛋白质染色检测 508

第60节 蛋白质的放射自显影、荧光显影和磷光成像检测 512

第61节 一维和二维肽图 515

第62节 肽的RP-HPLC图谱和纯化 523

第63节 蛋白质和肽的序列分析 528

第5章 蛋白质表达和相互间作用 531

第64节 T7表达系统的蛋白产生 531

第65节 用GST基因融合载体表达和纯化蛋白质 549

第66节 杆状病毒表达：利用杆状病毒穿梭载体在大肠杆菌中产生重组杆状病毒DNA 556

第67节 哺乳动物表达载体 576

第68节 哺乳动物细胞中进行基因的诱导表达 585

第69节 双杂交系统／相互作用陷阱 598

第6章 在细胞生物学中作为工具的抗体 627

第70节 抗体纯化和标记概述 627

第71节 表位标记 631

第72节 免疫沉淀 636

第73节 免疫印迹法和免疫印迹亲和纯化 639

第74节 人类自身抗体及其靶抗原的特性 648

第7章 活细胞和细胞周期的观察 661

第75节 用光学显微镜观察活细胞 661

第76节 用荧光技术监测体内分子动力学 672

第77节 噬动轨迹法分析组织培养中细胞的运动 677

第78节 绿色荧光蛋白的异源表达 685

第79节 荧光漂白技术 700

第80节 活细胞中胞内自由钙的成像和检测 717

第81节 光学镊子的构造 723

第8章 大分子的制备和导入细胞 733

第82节 抗体和DNA探针的荧光标记 733

第83节 活体细胞的定量微注射 744

第84节 爪蟾卵细胞和胚胎的注射 761

第85节 啮齿类动物肌肉直接注射DNA 773

第86节 哺乳动物细胞转染DNA 781

第87节 利用阳离子型脂质体将DNA导入哺乳动物细胞 786

第88节 电穿孔和电融合 793

第89节 反义寡核苷酸的传递 801

第90节 腺病毒表达载体的用途和使用方法 814

第91节 复制缺陷型疱疹病毒扩增子载体及其在基因转移中的应用 834

第92节 反转录病毒介导的基因转导 841

第93节 使用反转录病毒载体进行谱系分析 857

第9章 光学显微镜和表面荧光显微镜 873

第94节 光学显微镜 873

第95节 视频显微镜和图像增强 912

第10章 共焦显微技术、多光子显微技术及去旋方法 925

第96节 共焦显微技术及去旋技术 925

第97节 多光子激发荧光显微技术 941

第三卷：基因及其产物的亚细胞定位 951

第11章 细胞器、蛋白质和基因表达的显像 951

第98节 进行荧光显微镜观察的细胞和组织标本的制备 951

第99节 组织中的β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶活性检测 965

第100节 用酶检测法进行蛋白质的免疫定位 976

第101节 细胞结构的非免疫荧光标记 980

第102节 免疫荧光显微术简介 995

第103节 微管、微管相关蛋白和中间纤维的免疫染色 1004

第104节 肌动蛋白的免疫荧光定位 1011

第105节 核蛋白的免疫荧光定位 1015

第106节 酿酒酵母的免疫荧光方法 1018

第107节 果蝇组织的免疫荧光方法 1023

第108节 线虫的免疫荧光方法 1031

第109节 DNA复制的分析：非同位素标记方法 1037

第110节 RNA合成的分析：非同位素标记方法 1046

第12章 原位杂交 1055

第111节 DNA荧光原位杂交 1055

第112节 染色体比较杂交 1085

第113节 光谱核型分析法分析染色体 1093

第114节 用3H标记探针对组织碎片标本DNA和核RNA进行原位杂交 1099

第115节 果蝇染色体DNA的整体荧光原位杂交 1106

第116节 RNA原位杂交 1118

第117节 脊椎动物胚胎和分离器官的RNA整体原位检测 1129

第118节 爪蛙胚胎RNA的整体原位检测 1138

第119节 原位PCR 1143

第13章 电子显微术 1161

第120节 利用透射电子显微术成像 1161

第121节 透射电子显微镜的样品制备方法 1165

第122节 用扫描电子显微术成像 1195

第123节 扫描电子显微镱的样品制备方法 1206

第124节 扫描式透射电子显微术 1226

第125节 DNA及DNA结合蛋白的电子显微术 1235

第126节 核酸和核蛋白复合物的快速印迹法 1250

第127节 电镜的细胞化学染色及酶检测 1260

第128节 免疫电镜技术 1278

第129节 细胞和分子的快速冷冻 1291

第130节 冷冻置换 1309

第131节 超薄低温切片的免疫细胞化学 1315

第132节 冷冻断裂和冷冻断裂细胞化学 1334

附录1 细胞生物学常用储存液、缓冲液及培养基 1376

附录2 细胞生物学基本数据与资料 1397

附录3 显微镜技术：镜头、滤光片及发射／激发谱 1408

附录4 亚细胞组分的定位标志 1419

附录5 化学试剂安全注意事项 1422

附录6 供应厂商 1428