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Ⅰ 细胞膜的基本构造 1

1.细胞膜的研究历史 1

2.液态镶嵌模型 2

3.细胞膜的分子构造 3

a.脂质 3

b.蛋白质 3

c.碳水化合物 5

Ⅱ 基本技术 6

1.透射电镜的基本技术-超薄切片法 6

a.取材和细切 7

b.前固定 8

c.脱水 8

d.包埋 9

e.厚切片和修块 11

f.超薄切片 11

g.捞片 11

h.电子染色 11

2.冷冻复型法 13

3.冷冻反转法 16

4.负染色法 19

5.扫描电子显微镜观察法 20

a.酶细胞化学方法 23

6.超高压电子显微镜观察法 23

b.镧法 24

c.铁氰化钾锇固定法 24

7.细胞膜分离法 24

a.大鼠肝细胞膜制备法 24

b.各种组织细胞膜制备法 25

c.细胞膜标本的纯度鉴定 26

1-1 光学显微镜法 29

a.PAS反应 29

1.一般糖类的显示法 29

Ⅲ 细胞膜复合糖类组织细胞化学 29

b.胶体(透析)铁染色法 30

c.爱尔新蓝(pH2.5)染色法 30

d.爱尔新蓝(pH1.0)染色法 31

e.醛复红染色法 31

f.高铁二胺染色法 32

g.唾液酸的直接证明法 33

h.唾液酸与凝集素特异性结合的证明法 33

i.O-乙酰化唾液酸的证明法 34

j.通过甲基化-碱性水解的方法显示羟基和硫酸基 35

k.利用酶法证明半乳糖和氨基半乳糖 36

1-2 电子显微镜 37

a.高碘酸盐--硫卡巴肼-蛋白银(PA-TCH-SP)染色法 37

b.透析铁染色法 38

c.钌红染色法 38

d.阳离子化铁蛋白染色法 39

e.高铁二胺染色法 40

f.利用卵白素-生物素法证明唾液酸 40

g.利用卵白素-生物素法证明半乳糖残基 41

2-1 荧光法 42

2.免疫组织细胞化学显示法 42

2-2 酶标记法 44

2-3 铁蛋白标记法 50

2-4 胶体金法 53

2-5 复合糖类抗体法 55

2-6 放射自显影法 59

3.糖脂的显示法 62

a.一般组化染色 64

b.抗体的染色法 65

c.利用生物毒素的染色法 67

1.膜组分的脂类检出法 69

Ⅳ 细胞膜脂类的组织细胞化学法 69

2.冷冻复型法显示膜脂质 72

Ⅴ 细胞膜和骨架蛋白质的显示法 75

Ⅵ 细胞膜表面抗原显示法 79

1.荧光抗体法 79

a.染色标本的制备 79

b.膜荧光法的实际操作 81

2.酶抗体法 84

2-1 免疫细胞 84

a.悬浮细胞表面抗原显示法 85

b.冷冻切片的表面抗原显示法 87

2-2 肿瘤标记 88

3.铁蛋白抗体法 92

a.铁蛋白抗体结合物的制备 93

b.铁蛋白抗体结合物的精制法 94

c.铁蛋白抗体纯度和活性测定法 95

d.铁蛋白抗体和标本反应的方法 95

4.免疫扫描电镜法 96

4-1 病毒标记法 96

4-2 胶乳标记法 98

4-3 放射自显影 100

b.SEM-ARG的操作技术 101

a.SEM-ARG的样品制作法 101

c.观察和几点问题 102

5.纤维连接蛋白的显示法 103

a.纤维连接蛋白的特性 103

b.纤维连接蛋白的机能显示法 103

c.纤维连接蛋白的蛋白质化学显示法 104

d.纤维连接蛋白的免疫细胞化学显示法 105

Ⅶ 细胞表面受体的显示方法 107

1.激素受体 107

a.眼镜蛇毒b显示法 111

2.神经递质受体 111

2-1 乙酰胆碱受体 111

2-2 α-金环蛇毒素(α-BGT)结合部位 114

2-3 γ-氨基丁酸(GABA)受体 116

2-4 甲硫氨酸-脑啡肽受体 121

2-5 多巴胺受体 122

Ⅷ 细胞膜酶的显示法 125

1.NADPH氧化酶 125

2.胆碱乙酰转移酶 126

3-1 乙酰胆碱酯酶活性显示法 128

a.Karnovsky法 128

3.乙酰胆碱酯酶 128

b.Lewis和Shute法 130

3-2 冷冻复型法 132

3-3 扫描电镜法 133

4.碱性磷酸酶 133

4-1 活性显示法 133

a.金属盐法 134

b.偶氮色素法 135

c.碱性磷酸酶活性的局部定位 136

4-2 免疫学显示法 136

4-3 扫描电镜法 139

5.对硝基苯磷酸酶 140

a.哇巴因敏感，钾依赖性对硝基苯磷酸酶 140

b.哇巴因非敏感，钾非依赖性对硝基苯磷酸酶 141

c.H+-K+-三磷酸腺苷酶 143

d.酸性对硝基苯磷酸酶 144

6.5′-核苷酸酶 144

a.酶组织化学的显示 144

b.免疫组织化学的显示 146

7.Mg2+-三磷酸腺苷酶 147

8.Na+-K+-三磷酸腺苷酶 150

9.Ca2+-三磷酸腺苷酶 154

10.腺苷酸环化酶与鸟苷酸环化酶 156

11.碳酸酐酶 158

Ⅸ 示踪法观察细胞连接 161

1.镧标记法 161

2.过氧化物酶法 162

3.酶抗原法和酶抗体法 164

Ⅹ 细胞膜机能基的显示法 167

1.氨基显示法 167

1-1 氢醌-TNBT法 167

1-2 二硫化氨甲酰化法 168

2.巯基(SH)显示法 169

1-3 其他方法 169

2-1 巯基显示法 170

a.DDD-FBBBN法 170

b.FBBBN法 171

c.MO法 172

d.MC法 173

e.特异性的鉴定 174

2-2 冷冻复型法 175

Ⅺ 各种细胞膜的组织细胞化学特征 177

1.消化道上皮细胞膜 177

a.消化道上皮样品制作时的注意事项 177

b.消化道上皮细胞膜的细胞化学 178

2.肝细胞膜 179

a.碱性磷酸酶 180

b.5′-核苷酸酶 180

c.Mg2+-三磷酸腺苷酶 180

d.钾依赖性-P-对硝基苯磷酸酶 180

e.Ca2+-三磷酸腺苷酶 181

f.腺苷酸环化酶 181

3.肾、肾小管上皮细胞膜 181

4.肺泡的上皮细胞膜 183

a.腺苷酸环化酶(AC)和鸟苷酸环化酶(GC) 186

5.血管内皮细胞膜 186

b.ATP酶，ADP酶，AMP酶 188

6.神经细胞膜 190

7.膀胱上皮细胞膜 192

a.移行上皮 192

b.腔侧细胞膜 193

c.运用光衍射法及光滤过法进行腔侧细胞膜分析 194

d.移行上皮细胞膜的组织化学 196

8.培养的癌细胞膜 198

主要参考文献 203

后记 205