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目录 1

第一章　切片的制备 1

一、固定 1

（一）固定剂溶液的配制 2

（二）固定方法 4

二、包埋 6

（一）石蜡包埋法 6

（二）火棉胶及低粘稠度硝化纤维包埋法 8

（四）白蛋白-明胶包埋法 12

（三）明胶包埋法 12

三、切片 14

（一）切片刀的选择 14

（二）刀的安置 15

（三）冰冻切片方法 16

（四）振动切片机 21

四、贴片 21

（一）粘附剂及其使用 21

（二）火棉胶及LVN？切片的贴片法 23

主要参考文献 24

一、尼氏染色法 25

第二章　一般染色方法 25

（一）焦油紫染色法 26

（二）硫堇染色法 29

（三）棓花青染色法 30

（四）中性红染色法 31

二、髓鞘染色法 32

（一）Weigert氏法 33

（二）Weil氏法 34

（三）Kultschitsky氏法 35

（四）Haggqvist氏法 37

（五）Luxol固蓝法（Klüver-Barrera氏法Salthouse改变法） 40

（六）Marchi氏法（Swank-Davenport氏改变法） 42

（七）油红染色法 44

主要参考文献 45

第三章　高尔基技术 46

一、快高尔基（Golgi）方法 47

二、成年动物Golgi方法 50

1．用福尔马林的改变法 50

2．长期福尔马林固定的脑组织镀银法 51

3．Davenport法 51

三、Golgi-Cox方法 52

主要参考文献 54

第四章　还原银染技术 55

一、Cajal整块还原银染及其改变法 56

（一）Cajal法 56

1．Cajal Ⅲ氨酒精法 56

2．Cajal Ⅲ吡啶法 57

3．CajalⅥ水化氯醛法 57

（二）Holmes还原银染法 57

（三）Ranson吡啶银染法 58

（四）de Castr0脱钙银染法 59

（五）Bodian（蛋白银镀染神经纤维）法 60

（六）Rasmussen突触前终末银染法 60

二、Bie lschowsky还原银方法 62

（一）Bielschowsky原法 63

（二）Gros-Lawrentjew改变法 63

（三）Marsland-Glees方法 64

三、选择性溃变纤维银染法 66

（一）选择性溃变银染法中的一般过程及试剂的配制 66

3．Fink-HeimerⅠ法 70

2．Nauta法 70

1．Nauta-Gygax法 70

（二）七种选择性溃变纤维或终末银染法的步骤 70

4．Wiitanen法 71

5．Eager法 71

6．Kalaha-Brunst等法 72

7．Ebbesson-Sebinson双重镀银法 72

（三）观察、解释Nauta等法渍变纤维染色的若干问题 73

主要参考文献 74

第五章　辣根过氧化物酶法 76

（一）HRP的选择 77

一、HRP的引入 77

（二）酶标配体技术（受体介导吞饮“结合HRP”的标记技术） 79

（三）HRP引入中枢神经系的方法 86

（四）HRP引入周围神经系的方法 93

（五）麻醉剂的应用 96

二、存活期 96

三、固定 97

（一）固定剂的选择 97

（二）灌注固定的方法 98

四、切片 99

五、组织化学反应 99

（一）二氨基联苯胺（DAB）法 102

1．Malmgren及Olsson法 103

2．Streit及Ruebi法 104

3．钴-葡萄糖氧化酶法 104

（二）联苯胺（BDHC）法 106

1．Mesulam法 106

2．Mesulam及Carson法 107

3．舒斯云的Riley-Marchand改变法 107

（三）邻-联茴香胺（OD）法 108

（四）四甲基联苯胺（TMB）法 109

（五）Hanker-Yates氏法 112

六、结果的评定 113

（一）有效注射范围的确定 114

（二）过路纤维问题 115

（三）顺行标记终枝的辨认 116

（四）假象问题 117

（五）阳性及阴性结果的分析 119

主要参考文献 121

第六章　逆行荧光物标记法 124

一、逆行荧光物的种类 124

二、各种荧光物标记神经细胞的特征 125

三、逆行荧光物标记神经元的实验步骤 129

四、逆行荧光标记和递质组织化学方法的结合 131

（一）逆行荧光标记与冰冻干燥-甲醛诱发荧光组织化学结合法 131

（二）逆行荧光标记与Faglu-sucrose单胺荧光法的结合 132

（三）逆行荧光标记和乙酰胆碱酯酶结合法 133

（四）逆行荧光标记和AChE药理学结合法 134

（五）逆行荧光标记和免疫组织化学结合法 135

主要参考文献 136

第七章　放射自显影术 137

（一）放射性示踪剂的选择 138

一、放射性示踪剂的引入 138

（二）放射性示踪剂溶液的配制 143

（三）放射性示踪剂的引入方法 144

二、存活期、固定、切片、贴片 145

（一）存活期 145

（二）固定 146

（三）切片 146

（四）贴片 147

三、涂布原子核乳胶 148

（一）乳胶的选择 148

（二）影响乳胶潜影形成的因素 149

（三）涂敷液体原子核乳胶的方法 150

四、曝光 154

（一）干燥 154

（二）温度 155

（三）曝光期 155

（四）高速（闪烁）自显影 156

五、显影、定影、染色 157

（一）显影、定影 157

（二）染色 159

六、双标记法 160

（一）3H-apo-HRP与HRP双标记法 160

（二）3H及33S双标记法 161

七、结果的分析 163

（一）有效注射范围 163

（二）逆行标记及过路纤维问题 165

（三）本底 165

（四）化学显影 166

八、脱氧葡萄糖法 167

（一）14C-2DG法 168

（二）3H-2DG法 169

主要参考文献 173

一、Falck-Hillarp法（甲醛诱发荧光法，简称FA法） 175

第八章　荧光组织化学方法 175

（一）荧光反应的化学原理 176

（二）冰冻干燥-石蜡切片法 179

（三）震动切片-甲醛法 182

（四）铺片法 184

（五）涂片法 184

二、乙醛酸法（GA法） 184

（一）乙醛酸法的荧光反应原理 185

（二）震动切片-乙醛酸法 185

（三）冰冻切片-乙醛酸法 189

（四）冰冻切片-甲醛-乙醛酸法 190

（五）冰冻干燥甲醛-乙醛酸法 191

主要参考文献 192

第九章　免疫细胞化学法简介 194

主要参考文献 201

附录　缓冲液的配制 202

一、磷酸缓冲液 202

二、醋酸缓冲液 203

三、Tris缓冲液 204

四、二甲胂酸盐缓冲液 205