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目录 1

实验须知 1

蛋白质和核酸化学 1

实验1蛋白质等电点的测定 3

实验2蛋白质的沉淀反应（盐析、有机溶剂、重金属、生物碱试剂） 4

实验3血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳 9

实验4聚丙烯酰胺等电聚焦电泳测定牛血清白蛋白等电点 16

实验5凝胶层析分离蛋白质 18

一、血红蛋白和鱼精蛋白的分离 18

二、脲酶的分离 19

实验6氨基酸的薄层层析 33

实验7DEAE纤维素离子交换层析法分离血清蛋白质 34

实验8血清γ-球蛋白提纯与纯度鉴定 37

实验9血红蛋白及其衍生物的吸收光谱测定 38

实验10蛋白质定量 46

一、微量凯氏（Kieldahl）定氮法 46

二、比色法 46

三、紫外分光光度法 46

实验11牛胰核糖核酸酶的变性及复性 51

四、核酸的测定酶 56

三、DNA、RNA的碱基分离 56

一、肝细胞浆、核的分离与鉴定 56

二、DNA、RNA的提取 56

实验12肝细胞核酸提取、鉴定和测定 56

实验13蔗糖酶的专一性 71

实验14影响酶活性的因素 72

一、温度对酶活性的影响附注：关于酶的最适温度的讨论 72

二、pH对酶活性的影响附注：酶的最适pH 72

三、激动剂和抑制剂对酶活性的影响 72

附注：米氏常数的意义及应用 80

二、过氧化氢酶的Km值测定 80

一、胰蛋白酶的Km值测定 80

实验15酶的米氏常数（Km）测定 80

实验16乳酸脱氢酶的组分及作用 87

实验17乳酸脱氢酶同工酶（聚丙烯酰胺凝胶）电泳 90

实验18胡萝卜素的色层分析 94

实验19维生素C的定量（2,4-二硝基苯肼法） 95

实验21肝糖元的提取、鉴定与定量 102

一、肝糖元的提取与鉴定 102

二、肝糖元定量测定 102

实验22饱食、饥饿和激素对肝糖元含量的影响 104

二、邻-甲苯胺法 105

实验23血糖测定 105

一、吴宪-Fo1in法 105

实验24胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响 110

实验25运动对血中乳酸含量的影响 111

实验26血清脂蛋白的电泳 112

一、血清脂蛋白的醋酸纤维薄膜电泳 112

二、血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 112

三、血清脂蛋白聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳 112

实验27转氨基作用（圆形纸层析法） 116

实验28精氨酸酶的作用 118

实验29细胞色素氧化酶的作用及其抑制与解毒 120

实验30Warburg氏呼吸计测压法 121

一、肝组织耗氧量的测定 121

二、谷氨酸含量的测定 121

实验31放射性同位素示踪 132

一、3H-胸苷掺入DNA的试验 132

二、32P掺入磷脂的试验附注放射性同位素技术临床生化 132

实验32血清总胆固醇的测定 140

实验33血清三酸甘油酯的测定（抽提法） 142

三、改良穆氏法 144

二、赖氏法 144

实验34血清谷丙转氨酶活性测定 144

一、金氏法 144

实验35全血非蛋白氮（NPN）测定 149

一、消化法 149

二、改良帕波特Rappoport氏滴定法 149

实验36血清钾钠测定（火焰光度法） 154

实验37血清钾的测定（四苯硼钠比浊法） 159

实验38血清钙的测定 161

一、草酸盐-高锰酸钾滴定法 161

二、乙二胺四乙酸二钠滴定法 161

二、滴定法 164

实验39血浆二氧化碳结合力的测定 164

一、量积法 164

实验40尿淀粉酶活性的测定（Winslow氏法） 170

实验设计 172

生化实验中的对照设置 172

附录Ⅰ常用缓冲液及酸碱指示剂的配制方法 174

附录Ⅱ电动离心机的使用 178

附录Ⅲ常用容量仪器的规格、使用、清洗及洗液的配制 181

附录Ⅳ几种动物生化常数表 189

主要参考书目 190