免疫毒理学实验技术PDF电子书下载

第一章 细胞悬液的制备与细胞分离技术 1

第一节 鼠细胞悬液的制备 1

一、脾细胞 1

二、胸腺细胞 2

三、淋巴结细胞 3

四、腹腔细胞(巨噬细胞) 5

附 用细胞计数板做细胞计数 5

第二节 外周血中淋巴细胞的分离纯化 7

一、沉降法 7

二、密度梯度离心分离法 8

第三节 T、B淋巴细胞的分离 10

一、尼龙毛(纤维)分离法 10

二、E花环密度梯度离心分离法 12

第二章 T淋巴细胞功能的检测 14

第一节 外周血T淋巴细胞酸性α-醋酸萘酯酶(ANAE)的测定 14

第二节 T淋巴细胞E花环形成试验 16

一、总T玫瑰花试验 17

二、活性T玫瑰花试验 18

第三节 T淋巴细胞增殖功能测定 19

一、ConA刺激淋转试验 颜色反应法(MTT法) 19

二、ConA刺激淋转试验 同位素参入法 22

三、ConA刺激淋转试验 形态学方法 23

第四节 混合淋巴细胞反应 25

第五节 迟反型变态反应 27

一、足跖厚度增加法 27

二、放射性测定法 28

三、伊文思蓝比色法 29

第三章 B淋巴细胞功能的检测 32

第一节 抗体生成细胞检测法(溶血空斑实验) 32

一、Jerne改良玻片法 32

二、Cuningham小室法(小室液相法) 36

三、定量溶血分光光度测定法(QHS法) 38

第二节 用半抗原偶联抗原检测抗体形成细胞 39

第三节 血清溶血素测定 40

一、半数溶血值(HC50)的测定 40

二、用血凝法测溶血素滴度 42

第四节 人血清中免疫球蛋白含量测定 43

第四章 K和NK细胞活性的测定 46

第一节 K细胞活性的测定 46

一、空斑形成法 46

二、同位素51Cr测定法 48

第二节 NK细胞活性的测定 49

一、乳酸脱氢酶(LDH)测定法 49

二、同位素51Cr测定法 51

第五章 巨噬细胞和中性粒细胞功能检测 53

第一节 巨噬细胞吞噬功能测定 53

一、巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验 53

二、孔雀绿比色法测定巨噬细胞吞噬功能 55

三、中性红比色法测定巨噬细胞吞噬功能 57

第二节 碳粒廓清试验 58

第三节 巨噬细胞功能-Fc受体检测(EA花环法) 60

第四节 溶菌酶的测定 61

第五节 中性粒细胞吞噬功能的测定 63

第六章 红细胞免疫功能的检测 66

第一节 红细胞膜C3b受体及免疫复合物含量测定 66

一、红细胞C？b受体花环及免疫复合物花环法 66

二、酵母多糖血凝法 68

三、补体致敏酵母菌血凝法 69

第二节 血清中红细胞免疫调节因子活性的测定 70

第三节 红细胞免疫粘附肿瘤细胞能力的测定 72

第七章 细胞因子的检测 75

第一节 白细胞介素1(IL-1)的检测 75

第二节 白细胞介素2(IL-2)的检测 77

一、小鼠脾脏细胞增殖法 77

二、CTLL细胞株法 78

第八章 宿主抵抗力检测 80

第一节 肿瘤细胞攻击实验 80

一、PYB6肿瘤细胞攻击实验 80

二、肺部转移瘤B16F10攻击实验 81

第二节 对细菌和寄生虫的抵抗实验 82

一、对李斯特菌的抵抗实验 82

二、对链球菌的抵抗实验 83

三、对毛线虫的抵抗实验 84

第九章 外来化合物致敏作用的检测 86

第一节 速发型过敏反应的检测方法 86

第二节 皮肤致敏实验 88

一、局部封闭涂皮法(BT) 88

二、皮内注射法(DT) 89

三、皮内和涂皮相结合的方法(GPMT) 90

第三节 小鼠耳肿胀实验 91

第十章 腘窝淋巴结实验 93

一、直接法 93

二、间接法 94

三、过继转移法 95

第十一章 常用免疫标记技术 98

第一节 免疫荧光技术 98

一、直接免疫荧光法 98

二、间接免疫荧光法 100

第二节 放射免疫分析技术 101

一、放射过敏原吸附试验(RAST) 102

二、放射单向免疫扩散法 103

第三节 免疫酶技术 104

第四节 生物素--？和素技术 107

一、BAS-酶免疫检测方法(BAS-ELISA) 108

二、其他不同标记材料BAS检测法 110

第十二章 细胞内游离钙浓度和钙调素活性的测定 112

第一节 细胞内游离钙浓度的测定 112

第二节 钙调素活性的测定 114

第十三章 国外推荐的免疫毒性检测方案 119

第一节 外来化合物对小鼠的免疫毒性检测方案 119

一、美国NIEHS提出的方案 119

二、美国NTP提出的方案 121

三、日本推荐的免疫毒性检测方案 122

第二节 外来化合物对大鼠免疫毒性的检测方案 123

第三节 外来化合物对人群免疫毒性的检测方案 124

第四节 免疫毒性检测指标的敏感性与预测性分析 126

第十四章 免疫毒性检测程序及安全性评价 131

第一节 免疫毒性检测程序 131

第二节 免疫毒性检测在安全性评价中应注意的几个问题 132

第十五章 免疫毒理学实验设计 136

第一节 免疫毒理学研究中应考虑的问题 136

第二节 检测免疫功能的实验模型 138

第三节 实验中的质量控制 139

附录一 各种溶液及常用细胞染液的配制 142

附录二 人与动物常用有关免疫检测新旧单位参考值 155