PCR基因扩增实验操作手册PDF电子书下载

目录 1

第一部分 基本方法 1

1．PCR基因扩增的原理 1

2．PCR基因扩增的反应成分和作用 7

3．染色体基因组扩增 15

4．PCR扩增模板的制备（体液） 25

5．用石蜡包埋组织制备样本 31

6．远古DNA的扩增 34

7．RNA的多聚酶链反应 41

8．cDNA末端快速扩增（RACE） 47

9．PCR引物设计原则 57

10．DNA扩增的简并引物 62

11．耐热DNA多聚酶 69

12．DNA多聚酶在PCR中的应用条件 75

13．用简并引物进行cDNA克隆 85

14．用dGTP类似物进行PCR扩增 92

15．竞争性PCR做mRNA定量 97

16．定量PCR（内参标法） 106

17．不对称PCR产生单链DNA 112

18．用PCR克隆基因片段 117

19．双标记寡核苷酸结合实验 123

20．彩色PCR技术 129

21．探针和引物的非同位素标记 133

22．生物素标记dUTP掺入 143

第二部分 PCR在分子生物学研究中的应用 147

23．点杂交法检测PCR产物 147

24．PCR扩增显微切割染色体所得DNA 153

25．PCR模板体外转译实验 156

26．重组PCR 162

27．锚定多聚酶链反应 168

28．DNaseI足迹法 171

29．用TaqDNA多聚酶测序 175

30．用噬菌体启动子直接测序 180

31．变性梯度凝胶电泳鉴定DGGEDNA多态性 186

32．反向PCR（染色体步移） 194

33．同源性重组的检测 200

34．RNA转录扩增和小珠夹心杂交检测法 205

35．应用单个精子或双倍体细胞进行单倍型分析 212

36．扩增核蛋白体RNA基因进行分子进化研究 218

37．PCR研究真菌种系发育 224

第三部分 PCR分析遗传类型和疾病 231

38．甲型血友病的基因诊断和产前诊断 231

39．苯丙酮尿症的诊断 236

40．巴氏水肿胎儿的产前基因诊断 239

41．β-地中海贫血的基因诊断 242

42．HLA基因的多态性分析 252

43．应用多重PCR诊断中国人DMD基因缺失 301

44．检测线粒体DNA突变引起的Leber s遗传性视神经病 306

45．胎儿性别鉴定 310

46．性联锁鱼鳞病基因突变的检测 315

47．以可变的简单序列丛诊断强直性肌营养不良 318

第四部分 肿瘤 323

48．PCR扩增免疫球蛋白重链基因CDR-序列检测B-淋巴系统白血病和淋巴瘤 323

49．应用PCR技术扩增T细胞受体基因重排 332

50．PCR检测慢性粒细胞白血病abl/bcr嵌合基因的mRNA序列 339

51．分析ras基因点突变 345

52．B细胞淋巴瘤t（14;18）染色体重排 360

53．PCR技术诊断视网膜母胞细胞瘤 365

第五部分 法医学 371

54．微量法医检材DNA制备 371

55．应用PCR和序列分析技术确定血缘关系 376

56．扩增片段长度多态性分析在法医学中的应用 385

第六部分 病毒和支原体 393

57．检测人类T-细胞淋巴瘤／白血病病毒 393

58．人类免疫缺陷病毒的检测 400

59．乙型肝炎病毒RNA的测检 406

60（A）．检测丙型肝炎病毒 414

60（B）．RNAPCR检测丙型肝炎病毒RNA及其临床应用 418

61（A）．生殖系统的人类乳头瘤病毒的检测和分型 426

61（B）．PCR检测第16、18型人类乳头瘤病毒 435

62．检测人巨细胞病毒感染 439

63．检测肠道病毒 445

64．检测新病毒 450

65．应用PCR技术扩增和定型粪便标本中的轮状病毒 458

66．人类细小DNA病毒B19的检测 465

67．检测腺病毒 470

68．肺炎支原体检测 475

第七部分 细菌和真菌 479

69．从真菌菌丝或单个孢子中分离DNA 479

70．PCR和基因探针方法检测环境水样的致病菌 484

71．检测莫氏立克次体 491

72．检测博氏疏螺旋体 495

73．检测痢疾性腹泻病源菌 502

74．快速检测产VT毒素大肠杆菌 511

75．肠毒素型（LT）大肠杆菌的检测 516

76．PCR检测结核和其他分支枝菌病方面的应用 521

77．应用PCR法于大麦黄矮病毒（BYDV）核苷酸序列分析和病毒外壳蛋白基因全长cDNA的合成 533

第八部分 农业 533

78．PCR分析水稻核糖体基因的第一转录间隔区 539

79．PCR检测携带大麦黄矮病毒（BVDV）的单头蚜虫介体 543

第九部分 装备和应用 547

80．PCR实验室组建 547

81．PCR基因扩增仪 550

82．计算机辅助PCR引物设计 562

83．PCR引物的合成 568

84．PCR引物的分离和纯化 574

85．设备和PCR常用试验技术 580

86．常用试剂配制 593

附录：名词解释 608