生物化学实验原理与技术PDF电子书下载

第一章 生物物质的定性鉴定 1

第一节 蛋白质和氨基酸的结构特点及反应基础 1

一、氨基酸的结构特点 1

二、氨基酸的化学反应 2

第二节 核酸的结构组成特点 3

一、核酸的结构 3

二、核酸的水解 5

第三节 糖的基本性质 5

一、糖的概念 5

二、单糖的性质 6

第四节 实验部分 6

实验一 蛋白质的双缩脲反应 6

实验二 蛋白质和氨基酸的茚三酮反应 7

实验三 蛋白质的黄色反应 8

实验四 蛋白质的沉淀反应 9

实验五 酵母RNA的提取与鉴定 11

实验六 糖的呈色反应及还原糖的检验 12

第二章 纸层析技术 17

第一节 纸层析的基本原理 17

第二节 影响Rf值的主要因素 17

一、物质结构与极性对Rf值的影响 17

二、层析溶剂对Rf值的影响 18

三、pH对Rf值的影响 18

四、展层温度对Rf值的影响 19

五、滤纸的性质对Rf值的影响 19

第三节 实验部分 19

实验氨基酸的纸层析分离 19

第三章 薄层层析技术 22

第一节 薄层层析原理 22

一、原理 22

二、有限斑容量问题 22

三、几种常用支持介质 23

二、支持介质的选择原则 23

第二节 固定相支持介质的选择 23

一、支持介质的性能 23

第三节 薄层层析的显色 25

第四节 实验部分 26

实验一 DEAE-纤维素薄层层析分离鉴定核苷酸 26

实验二 细菌细胞壁糖的薄层层析 28

第四章 离子交换层析技术 32

第一节 离子交换层析原理 32

一、基本原理 32

二、离子交换剂的结构与分类 32

三、离子交换技术的操作 34

第二节 实验部分 35

实验一 离子交换树脂交换容量的测定 35

实验二 无离子水的制备及检测 36

实验三 DEAE-Cellulose柱层析分离纯化超氧化物歧化酶 37

实验四 酯酶的分离纯化及活性测定 39

第五章 分子筛层析技术 43

第一节 分子筛层析原理 43

一、基本原理 43

二、分子筛层析实验技术 44

第二节 实验部分 46

实验一 分子筛层析脱盐 46

实验二 分子筛层析法测定蛋白质的分子量 47

第六章 亲和层析技术 51

第一节 亲和层析原理 51

一、基本原理 51

二、亲和层析的操作技术 51

第二节 实验部分 53

实验 亲和层析纯化蚯蚓纤溶酶 53

二、离心机的用途 55

一、离心设备 55

第一节 离心技术的基本原理 55

第七章 离心技术 55

第八章 分光光度技术 60

第一节 分光光度技术的原理 60

一、郎伯—比尔（Lambert-Beer）定律 60

二、实际测定时吸光度与物质浓度之间偏离Lambert-Beer定律的原因 61

三、测定条件的选择 63

四、分光光度计的构造 63

第二节 实验部分 65

实验一 双缩脲法测定蛋白质浓度 65

实验二 Folin-酚法测定蛋白质浓度 66

实验三 紫外吸收法测定蛋白质浓度 68

实验四 考马斯亮蓝染色法测定蛋白质浓度 70

实验五 定磷法测定酵母核糖核酸浓度 71

实验六 二苯胺法测定DNA的浓度 73

第九章 电泳技术 75

第一节 电泳的基本原理 75

一、电荷的来源 75

二、泳动度 75

三、影响泳动速度的外界因素 76

第二节 电泳的分类 77

一、按分离原理分类 77

二、按有无固体支持物分类 77

第三节 实验部分 78

实验一 醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白 78

实验二 聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离血清蛋白 83

实验三 SDS-PAGE测定蛋白质的分子量 92

实验四 等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点 96

第二节 实验部分 100

实验 蛋白质转移（Western Blotting） 100

第一节 蛋白质转移原理 100

第十章 蛋白质转移技术 100

第十一章 其他技术 104

第一节 基本原理 104

第二节 实验部分 104

实验一 微量凯氏定氮法测定蛋白质浓度 104

实验二 维生素C的定量测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法） 108

实验三 甲醛滴定法测定氨基氮 110

实验四 α-淀粉酶的激活剂、抑制剂及其特异性 112

实验五 温度、pH对酶活性的影响 114

附录 117

第一节 实验室安全及防护知识 117

一、实验室安全知识 117

二、实验室灭火法 118

三、实验室急救 118

四、生物化学实验要求 119

一、烘箱和恒温箱 120

第二节 生化实验常用仪器的使用说明 120

二、电热恒温水浴 121

三、离心机 122

四、电子天平 124

五、紫外检测仪 124

六、冷冻干燥机 126

七、724-微机型可见分光光度计 127

八、721型分光光度计 130

九、紫外-可见分光光度计 131

十、酸度计 133

十一、电泳仪 135

第三节 常用缓冲液的配制方法 138

第四节 硫酸铵饱和度的调整用表 144

第五节 柱层析材料 146

第六节 其他常用数据表 157

参考文献 167