生物化学实验PDF电子书下载

第一章 生物化学实验的基本要求 1

第一节 实验的准确性 1

一、有效数字 1

二、误差 2

三、误差的表示方法和计算 3

四、与质量控制有关的几个基本概念 4

五、统计学的一些基本概念和计算公式 4

二、实验报告 10

一、实验记录 10

第二节 实验记录及报告 10

第三节 实验样品的制备 11

一、动物的脏器 11

二、微生物 11

三、细胞 12

第四节 玻璃仪器的洗涤及各种洗液的配制法 12

一、初用玻璃仪器的清洗 12

二、使用过的玻璃仪器的清洗 12

三、洗涤液的种类和配制方法 13

第五节 试剂的配制及一些常用数据表 14

第二章 常见的实验方法及基本原理 16

第一节 离心技术 16

一、离心沉降速率影响因素 16

二、沉降系数 17

三、离心设备 19

四、制备超离心法 19

一、薄层层析 22

第二节 层析技术 22

二、聚酰胺薄膜层析 23

三、凝胶层析 23

四、离子交换层析 23

五、亲和层析 25

六、气相色谱 26

七、高效液相色谱 27

第三节 电泳技术 28

一、影响电泳的主要因素 28

二、常用电泳支持介质 29

三、聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳 30

四、连续密度梯度电泳 32

五、SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳 32

六、等电聚焦电泳 32

七、双向电泳 33

八、毛细管电泳 34

九、电泳新技术 35

一、基本原理 36

第四节 分光光度法 36

二、比色法 37

三、分光光度法 38

四、浊度法 39

第五节 基因多态性及其检测方法 39

一、基因多态性 39

二、基因多态性的检测方法 40

第三章 普通实验 42

实验一 Folin－酚法测定蛋白质含量 42

实验二 肌糖原的酵解作用 43

实验三 影响酶活性的因素 46

实验四 碱性磷酸酶Km值测定 49

实验五 乳酸脱氢酶及辅酶Ⅰ琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制 52

实验六 酮体的生成与利用 55

实验七 血清丙氨酸氨基转移酶测定 56

实验八 分光光度法测定血红蛋白含量及血糖 59

实验九 蛋白质的变性与沉淀 67

实验十 血清蛋白质的醋酸纤维薄膜电泳 69

实验一 质粒DNA的提取及电泳鉴定 72

第四章 综合实验 72

实验二 鸡卵类粘蛋白的制备及活力的测定 75

实验三 动物肝脏DNA的提取与二苯胺测定 82

实验四 酵母RNA的提取及醋酸纤维薄膜电泳分离核苷酸 85

第五章 设计实验 90

第六章 选择实验 91

实验一 蛋白质的两性性质及等电点的测定 91

实验二 枯草杆菌碱性磷酸酶的制备及酶活性的测定 93

实验三 单核苷酸的离子交换柱层析分离 96

实验四 SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白印迹 99

第七章 开拓性实验 106

实验一 从动物毛发中提取DNA进行RAPD扩增 106

实验二 DNA指纹图谱分析 108

实验三 小鼠肾脏组织的双向电泳 112

实验四 随机扩增多态DNA 118

第八章 方法学评价实验 122

实验一 线性范围试验 122

实验二 批内重复性试验 124

实验三 回收试验 127

实验四 干扰试验 129

实验五 方法比较试验 130

实验六 检测能力测定 133

第九章 实验室安全知识及防护知识 136

第十章 常用生化仪器的使用方法 139

第一节 称量仪器 139

第二节 分光光度计 142

第三节 离心机 145

第四节 干燥箱和恒温箱 146

第五节 电热恒温水浴 147

第六节 自动部分收集器 148

第七节 核酸蛋白检测仪 149

第八节 酸度计 149

第九节 移液器 151

第十一章 缓冲溶液 152

第一节 缓冲理论 152

第二节 常用缓冲液配制方法 152

第一节 核酸染色 156

第十二章 电泳染色方法 156

第二节 蛋白质染色 157

第三节 糖蛋白染色 158

第四节 脂蛋白染色 158

第五节 同工酶染色 159

第十三章 核酸实验方法及相关数据 164

第一节 核酸含量的测定 164

第二节 常用的核酸换算公式及某些核酸的性质 165

第三节 核酸的纯化与浓缩 167

一、离子交换层析数据及参数 170

第十四章 常用数据 170

第一节 常用层析介质数据 170

二、聚丙烯酰胺凝胶的技术数据 172

三、琼脂糖凝胶的技术参数 172

四、凝胶过滤层析介质的技术参数 172

五、Sephadex G型交联葡聚糖凝胶的数据 177

六、Sephadex G型交联葡聚糖凝胶溶胀所需时间 178

七、琼脂糖凝胶的数据 178

八、Superose的数据 179

九、琼脂糖凝胶Bio-Gel A型的数据 179

十、Bio-Gel P型凝胶的数据 180

十一、交联聚苯乙烯凝胶Bio-Beads S-X型的数据 181

十二、制备级Superdex凝胶过滤介质的数据 181

十三、聚乙烯醇型凝胶Toyopearl的数据 182

十四、各种凝胶所允许的最大操作压 182

第二节 凝胶过滤用标准蛋白 183

一、凝胶过滤用低相对分子质量标准的组成 183

三、凝胶过滤用相对分子质量标准品 184

二、凝胶过滤用高相对分子质量标准的组成 184

第三节 干燥剂、致冷剂、浓缩剂及硅化剂 185

一、干燥剂 185

二、致冷剂 186

三、浓缩剂 189

四、硅烷化剂 190

第四节 生物化学中某些重要化合物的Mr及pK值 192

一、长度单位 194

第五节 一些常用单位 194

二、体积单位 195

三、质量单位 195

四、摩尔与摩尔浓度表示法 195

五、十进位数量词头及符号 196

附录 实验课教学大纲 197

一、本课程的目的意义 197

二、本课程的基本要求 197

三、实验教学大纲 199

主要参考书目 204