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基础篇 3

实验1　碱法提取质粒 3

实验2　煮沸法提取质粒 12

实验3　质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳 16

实验4　质粒的限制性内切酶反应分析 22

实验5　用玻璃奶回收琼脂糖凝胶中的DNA 28

实验6　DNA的连接 31

实验7　E.coli DH5α感受态细胞的制备及转化 36

实验8　植物总RNA的提取 41

实验9　聚合酶链反应——PCR 45

实验10　cDNA末端快速扩增——RACE 51

实验11 高通量基因克隆技术 63

实验12　银染法DNA序列测定 86

应用篇 95

实验13　原核细胞中外源基因的表达和初步纯化 95

实验14　蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 101

实验15 昆虫细胞中外源基因的表达 107

实验16　蛋白质的Western印迹分析 112

实验17　土壤农杆菌介导的烟草基因转化 119

实验18　应用微弹轰击法进行兰花基因转化 127

实验19　植物总DNA的提取 135

实验20　DNA探针的制备 138

实验21　DNA的Southern印迹分析（用同位素标记探针） 146

实验22　DNA的Southern印迹分析（用Dig标记探针） 152

实验23　mRNA的Northern印迹分析（用Dig标记探针） 156

实验24　酵母双杂系统研究蛋白质的相互作用 163

实验25 CytoTrap酵母双杂系统研究蛋白质的相互作用 169

实验26　DNA-蛋白质的相互作用 183

实验27　蛋白质核酸结合活性的分析 190

实验28 以烟草脆裂病毒为载体通过基因沉默分析植物基因功能 194

实验29　水稻突变体库的创建 200

实验30　转基因水稻突变体T-DNA侧翼序列的扩增与分析 206

实验31 亚克隆及检测的独立设计与操作 217

探索篇 217

实验32　土壤农杆菌感受态细胞的制备和转化 219

实验33　不同植物材料组织的再生培养 221

实验34　在酵母细胞中表达外源基因 223

实验35　应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在昆虫细胞中表达蛋白 225

实验36　检测蛋白质的相互作用——Protein Overlay 228

实验37　沉默转GUS基因烟草中的GUS基因 230

实验38　拟南芥T-DNA突变库的构建 232

实验39　用RNAi的方法研究拟南芥基因功能 234

主要参考资料 236