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绪论 3

第一章　制片用的器材与工作守则一、基本仪器 3

（一）切片机 3

目录 3

（二）切片刀与磨刀技术 4

（三）显微镜 8

（四）恒温箱 9

（五）冰箱 9

（六）天平 9

（七）载玻片染色机 10

（八）电热恒温水浴锅 10

（九）酸度计 10

（十）微型真空泵 10

（一）剪刀 11

（三）解剖刀 11

（二）镊子 11

（十一）电动离心机（或手摇离心机） 11

二、常用工具 11

（十二）转台 11

（四）解剖针 12

（五）取片匙 13

（六）毛笔 13

（七）放大镜 13

（八）刀片 13

（九）切片盒与烘片架 13

（十）笔式金钢钻（玻璃刀） 13

（二）盖玻片 14

（一）载玻片 14

三、玻璃器材 14

（三）染色缸 15

（四）树胶瓶 15

（五）培养皿 16

（六）量筒 16

（七）烧杯 16

（八）染色碟 16

（九）微型凹面皿或凹面载玻片 16

（十三）称量瓶 17

（十六）双重蒸馏器 17

（十四）玻璃漏斗 17

（十五）酒精灯 17

（十二）玻璃滴瓶 17

（十一）双层滴瓶 17

（十）试剂瓶 17

四、普通试剂 18

（一）脱水剂 18

（二）透明剂 19

（三）粘贴剂 20

（四）包埋剂 21

（五）封固剂 21

五、工作守则 22

第二章　标本的选择与固定 24

一、标本的选择原则 24

（一）取材准确 24

（二）取材典型 24

（一）要求麻醉标本 25

（五）取材清洁 25

二、固定的注意事项 25

（三）取材完整 25

（四）取材适时 25

（二）要求尽早固定 26

（三）要求小而薄的组织块 26

（四）要求小心切割标本 28

（五）要求保持组织原形 28

（六）要求预先确定切削面 28

（七）要求抽除组织块内空气 30

（八）要求固定后洗涤 31

三、固定形象与固定液的选择 31

（一）两种固定形象 31

（二）选择固定液的原则 32

四、二氯化汞类固定液 32

（二）赫利（Helly）氏固 定液（简称Z.F）配法 33

（一）曾克（Zenker）氏固定液（简称Z.A）配法 33

（三）马克西莫（Maxi-mow）氏固定液配 法 34

（四）杰尔森（Gilson）氏固定液配法 34

（五）肖丁（Schaudinn）氏固定液配法 34

（六）苏萨（Susa）固定液配法 34

（七）丹思契可夫（Dan-chakaff）氏固定液配法 35

（八）武斯特（Worcester）氏固定液配法 35

（九）本斯利（Bensley）氏固定液配法 35

五、重铬酸钾类固定液 36

（一）苗勒（Müller）氏固定液配法 36

（二）奥塞（Orth）氏固定液配法 36

（三）特利逊士克（Tell-yesnicky）氏固定液配法 36

六、苦味酸类固定液 37

（六）查西奥（Ciaccio）氏固定液配法 37

（四）史密斯（Smith）氏固定液配法 37

（五）厄利（Erlicki）氏固定液配法 37

（一）波因（Bouin）氏固定液配法 38

（二）木耶（moyer）氏固定液配法 39

（三）细中胞心体固定液配法 39

（四）盖奇（Gage）氏固定液配法 39

（五）苦味酸-硫酸混合固定液配法 39

（六）拉伯尔（Rabl）氏固定液配法 39

（七）弗恩拉思（Vonath）氏固定液配法 39

（八）苏萨（Susa）改良波因氏固定液配法 40

七、酒精类固定液 40

（一）卡诺（Carnoy）氏Ⅰ固定液配法 40

（二）卡诺（Carnoy）氏Ⅱ固定液配法 40

（三）卡诺-莱勃苯（Car-noy-Lebrun）氏固定液配法 40

（一）药液配制 41

八、锇酸类固定液 41

（二）漂白方法 42

九、铬酸类固定液 43

（一）弗莱明（Flemming）氏改良固定液配法 43

（二）德斯梯（De stim）氏固定液配法 43

（三）戈尔德斯米斯（Go-ldsmith）氏固定液配法 43

（四）弱铬酸-醋酸固定液配法 44

（五）适度铬酸-醋酸固定液配法 44

（六）强铬酸-醋酸固定液配法 44

（七）铬酸-醋酸-甲醛混合固定液配法 44

（八）佩伦夷（Perenyi）氏固定液配法 44

（九）那瓦新（NaWashin）氏固定液配法 45

十、甲醛类固定液 45

（四）莫斯曼（Mossrnan）氏固定液配法 46

（三）洛夫特斯克（Lov-dowsky）氏固定液配法 46

（二）甲醛-丙酸-酒精固定液（简称FPA）配法 46

（一）植物通用固定液（简称FAA）配法 46

（五）卡尔（Kahle）氏固定液配法 47

第三章　染料与染色液的应用一、染色原理 48

（一）物理作用 48

（二）化学作用 48

二、各种常用染料 49

（一）天然染料 49

（二）煤焦染料 50

三、各种苏木精染色液 52

（一）汉登海（Heiden-hain）氏苏木精染色液（又称铁矾苏木精染色液）配法 52

（二）德拉菲尔德（Dela-field）氏苏木精染色液配法 53

（六）粘液苏木精染色液配法 54

（五）迈耶（Mayer）氏苏木精染色液配法 54

（四）埃利希（Ehrlich）氏苏木精染色液配法 54

（三）哈里斯（Harris）氏苏木精染色液配法 54

（七）美尔蓝（Mallory）氏苏木精染色液配法 55

（八）鲍牟尔（B？nmer）氏苏木精染色液配法 55

（九）汉森（Hansen）氏苏木精染色液配法 55

四、各种洋红染色液 56

（一）酒精洋红染色液配法 56

（二）醋酸洋红染色液配法 56

（三）硼砂洋红染色液配法 57

（四）钾矾胭脂红染色液配法 57

（五）格林拉（Grenaeher）氏染色液配法 57

（六）迈耶（Mayer）氏洋红染色液配法 57

（七）比尔（Beal）氏洋红染色液配法 57

（一）曙红染色液 58

五、其它染色液 58

（八）粘液洋红染色液配法 58

（二）藻红染色液配法 59

（三）番红染色液 59

（四）固绿染色液 59

（五）酸性复红染色液配法 60

（六）波尔多红染色液配法 60

（七）中性红染色液配法 60

（八）雷琐辛复红染色液别名维格雷特氏弹性纤维染色液配法 60

（九）刚果红染色液配法 61

（十）龙胆紫染色液 61

（十一）甲烷紫染色液配法 61

（十二）青苷别名喹啉蓝染色液配法 61

（十六）甲基绿染色液配法 62

（十七）桔黄G染色液 62

（十四）丹纳绿染色液配法 62

（十五）亮绿染色液配法 62

（十三）里昂蓝别名酒精溶性苯胺蓝染色液配法 62

（十八）俾士麦棕染色液配法 63

（十九）地衣红染色液配法 63

（二十）硫堇别名劳氏青莲染色液配法 63

第四章　石蜡切片制作方法 64

一、脱水 64

二、透明 66

三、兼脱水作用的透明剂 67

（一）正丁醇使用法 68

（二）萜品醇使用法 68

四、浸蜡 69

（一）浸蜡药品与用具 69

（二）浸蜡方法 70

（一）石蜡包埋药品和用具 71

五、石蜡包埋 71

（二）两种石蜡包埋方法 72

（三）石蜡包埋后出现混浊结晶的原因分析 73

（四）快速石蜡包埋法 74

六、石蜡包埋块的修整 75

（一）石蜡包埋块的分割 75

（二）蜡块在台木上的装置 76

（三）蜡块细修整 77

七、石蜡包埋块的切削 78

（一）用具 78

（二）切削方法 78

（三）切削质量低劣的分析与改正措施 79

（二）氢氧化钠或三氯醋酸软化法 82

八、脆硬组织难以切削时的补救办法 82

（一）水软化法 82

（三）氢氟酸-甘油软化法 83

（四）冰冻法 83

九、蜡片的贴附 83

（一）温水展平粘贴法 83

（二）玻璃条展平粘贴法 85

（三）切片脱落原因的分析 85

十、石蜡切片苏木精-曙红染色法 86

（一）用具与药品 86

（二）染色程序与方法 86

（三）注意事项 88

第五章　火棉胶切片制作方法一、脱水 89

（二）浸火棉胶方法 90

二、浸火棉胶 90

（一）主要用具与药品 90

三、火棉胶包埋 91

（一）用具与药品 91

（二）火棉胶包埋方法 91

四、火棉胶包埋块的修整 92

（一）包埋块的分割 92

（二）火棉胶包埋块在台木上的装置 92

五、火棉胶包埋块的切削 94

（一）用具与药品 94

（二）切削方法 94

（三）切削质量低劣的原因分析 95

（一）用具与药品 96

（二）染色程序与方法 96

六、火棉胶切片苏木精-曙红染色法 96

第六章　冰冻切片制作方法 99

一、取材与固定 99

二、冰冻与切削方法 99

（一）二氧化碳冰冻切片 99

（二）半导体致冷器冰冻切片 100

三、冰冻切片贴附与苏木精-曙红染色法 102

（一）用具与药品 102

（二）贴附与染色方法 102

第七章　其它切片法 103

一、聚苯乙烯包埋切片 103

（一）主要用具与药品 103

（二）包埋技术 104

（四）染色 105

（三）切片与粘附 105

二、碳蜡包埋切片 106

（一）主要用具与药品 106

（二）制备方法 106

三、徒手切片 108

（一）标本的选择 108

（二）用具与药品 108

（三）切削方法 109

（四）染色方法 110

四、假包埋切片与无包埋切片 110

第八章　非切片法 111

一、整体装片 111

（一）甘油与甘油胶封固法 111

（三）甘油、二甲苯、树胶封固法 112

（二）正丁醇树胶封固法　 112

（四）二甲苯树胶封固法　 113

二、涂布法 114

三、压碎法 115

四、离析法 115

（一）铬酸-硝酸分离法　 115

（二）硝酸-氯酸钾离析法 116

（三）盐酸-氢氧化钾法 116

第九章　细胞学制片 117

一、线粒体 117

（一）里戈特（Regaud）氏染色法 117

（二）哈木德（Harmond） 118

氏染色法（1950） 118

（三）汉登海（Heiden-hain）氏苏木精-苦味酸-复红染色法（Mallorog氏改良，1968） 119

（五）白细胞活体染色法 120

（四）本塞利-考德里（Bensley-Cowdry）氏染色法 120

二、高尔基体 121

（一）阿耶马（Aoyama）氏法 121

（二）雷蒙·爱·凯杰尔（Ramon y cajal）氏法 122

（三）达·范诺（Da Fano）氏法 123

三、染色体 123

（一）洋葱、蚕豆根尖细胞示染色体 123

（二）大麦、蚕豆、洋葱染色体C式分带显示法 124

（三）果蝇唾腺示染色体 126

（四）人外周血淋巴细胞示染色体 127

（五）G式分带显示法（Gallmon Richa-rdson 1973） 131

（六）C式分带显示法（Sumner 1972） 132

（八）姐妹染色单体差别染色法（改良） 133

（七）R式分带显示法（Dulrillaux等1971） 133

四、细胞分裂 134

（一）洋葱根切片示植物细胞有丝分裂 134

（二）马蛔虫卵切片示动物细胞有丝分裂、纺锤丝、中心体 135

（三）蚕豆、玉米、水稻花粉母细胞示减数分裂 137

（四）雄蝗虫精巢切片示减数分裂（成熟分裂） 139

第十章　微生物学制片 140

一、多角体病毒 140

（一）棉铃虫幼虫示核型多角体，松毛虫示质型多角体涂片 140

（二）棉铃虫幼虫示核型多角体，松毛虫示质型多角体切片 140

二、细菌 143

（一）革兰（Gram）氏染色法 143

（二）罗弗（Leffer）氏染色法 144

（三）浦飞弗尔（Pfei-ffer）氏染色法 144

（五）青虫菌、松毛虫杆菌芽孢染色法 145

（四）细菌三型简易制片 145

（六）钾细菌（硅酸盐细菌）荚膜染色法 146

（七）细菌鞭毛染色法（B1endon 1965） 146

三、放线菌 148

（一）石炭酸-复红染色法 148

（二）结晶紫-苦味酸-洋红染色法 148

四、真菌 149

（一）酵母菌示出芽生殖涂片 149

（二）根霉装片 150

（三）青霉装片 150

（四）青霉切片 151

（五）曲霉装片 152

（六）地衣切片 152

（七）麦锈菌春孢子、夏孢子、冬孢子切片 153

（八）伞蕈示担子及担孢子切片 154

第十一章　植物学制片 155

一、藻类 155

（一）团藻、空球藻、实球藻、衣藻装片 155

（二）衣藻示鞭毛装片 156

（三）硅藻多种装片 157

（四）水绵、双星藻、刚毛藻、间生藻、颤藻装片 158

（五）轮藻示精子囊、卵囊装片 159

（六）昆布示孢子囊切片 160

二、苔藓类 161

（一）钱苔精子器、颈卵器、孢子体纵切片 161

（二）地钱精子器、颈卵器、孢芽杯纵切片、藓精子器、颈卵器、孢蒴纵切片 162

三、蕨类 163

（一）水韭示雄孢子囊、雌孢子囊纵切片 163

（二）石松球果、卷柏球果纵切片 164

（三）蕨叶示孢子囊群切片 165

（四）蕨原叶体示精子器、颈卵器、孢子叶装片 166

（五）槐叶孢子囊果纵切片 167

四、被子植物 167

（一）根 167

（二）茎 172

（三）叶 180

（四）花 183

（五）种子与果实 187

第十二章　无脊椎动物学制片一、原生动物 192

（一）变形虫装片 192

（二）草履虫接合生殖装片 193

（三）草履虫分裂生殖装片 194

（四）眼虫装片 195

（五）放射虫装片、有孔虫装片 196

二、海绵动物 197

（一）海绵骨针装片 197

（二）毛壶横、纵切片 198

（三）海绵芽孢装片 199

三、腔肠动物 199

（一）水螅整体装片、水螅附精巢、卵巢、芽体装片 199

（二）水螅示神经细胞装片 200

（三）水螅过精巢、卵巢横、纵切片 201

（四）薮枝虫、筒螅装片 201

四、扁形动物与线形动物 202

（一）涡虫示消化系统装片 202

（二）华枝睾吸虫、羊肝蛭、姜片虫装片 203

（三）猪带绦虫囊尾蚴装片 204

（五）日本血吸虫雌、雄成虫或交接装片、十二指肠钩虫、蛲虫装片 205

（四）日本血吸虫尾蚴装片 205

（六）蛔虫雄成虫、雌成虫横切片 207

（七）寄生虫卵装片 208

（八）旋毛虫装片 209

五、轮虫动物与苔藓动物 210

轮虫装片、淡水苔藓虫装片 210

六、环形动物 210

（一）沙蚕徒手切片 210

（二）蚯蚓横切片 211

七、节肢动物 212

（一）蜜蜂口器、蜜蜂足装片 212

（二）雌蚊口器拆解装片 213

（四）昆虫复眼切片 214

（三）昆虫复眼装片 214

（五）人虱、跳蚤、臭虫装片 215

第十三章　组织与胚胎学制片一、上皮组织 216

（一）单层扁平上皮装片（硝酸银法） 216

（二）单层立方上皮、单 217

层柱状上皮、假复层上皮、复层扁平上皮、变移上皮切片 217

二、结缔组织 218

（一）疏松结缔组织平铺装片 218

（二）疏松结缔组织台盼蓝染色法示吞噬细胞 219

（三）胶原纤维、网状纤维 220

（四）弹性纤维 226

（五）发育骨、齿切片 228

（六）骨、齿磨薄装片 230

三、肌肉组织 232

（一）平滑肌拆解分离装片 232

（七）弹性软骨、纤维软骨、透明软骨切片 232

（二）横纹肌横、纵切片 233

（三）心脏肌切片 234

四、神经组织 235

（一）运动神经细胞 235

（二）小脑示蒲金野氏细胞切片 236

（三）神经原纤维 237

（四）有髓神经 239

（五）无髓神经 240

（六）感觉神经末鞘示环层小体装片 241

（七）运动神经终板装片 241

（八）神经胶质 242

五、神经系统与感觉器官 246

（一）大脑与小脑皮质切片 246

（二）脊神经节与交感神经节切片 247

（三）眼球切片 248

（四）耳蜗切片 249

六、循环系统与淋巴器官 250

（一）动静脉、淋巴结切片 250

（二）脾、骨髓涂片Giem-sa氏染色法 251

（三）血液涂片wright氏染色法 251

（四）脾脏切片VanGiesom氏染色法 252

七、消化系统与呼吸系统 253

（一）胃、肠切片 253

（二）肝切片 255

（三）胰腺切片 257

（四）气管分离装片示假分层柱状纤毛上皮 258

（五）肺切片 259

（一）肾脏血管注射切片 260

八、泌尿系统与生殖系统 260

（二）威斯尔（wicsel）氏肾上腺嗜铬细胞染色法 261

（三）奥加塔-奥加塔（Ogata-Ogata）氏硝酸银法示嗜铬细胞 261

（四）卵巢、输卵管、子宫、阴道切片；睾丸、输精管切片 262

（五）精子涂片 262

九、内分泌系统 263

（一）甲状腺与甲状旁腺切片（Besley法） 263

（二）脑下垂体切片（Se-vevringhaus法） 264

十、人皮肤切片示毛囊 265

十一、胚胎 266

（一）蛙卵切片 266

（二）鸡胚装片 268

（三）鸡胚切片 271

（四）鱼卵切片示早期胚胎发育 271

（五）猪胚切片 273

第十四章　组织化学制片 277

一、无机物质 277

（一）钙 277

（二）钾 278

（三）铁 279

（四）钠 281

（五）磷酸盐 281

二、碳水化合物 282

（一）淀粉 282

（二）葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖盐酸苯肼法 283

（三）菊糖水合氯醛法 283

（四）糖元 284

（五）纤维素 288

（六）木质 289

（七）果胶质 290

三、蛋白质 291

（一）曙红-苦味酸法 291

（二）耶苏莫-奥托卡瓦（Yasuma-Otchi-kawa）氏法（1953） 291

（三）偶联反应法（Dani-ell 1950） 292

（四）坂口（Sakaguchi）反应法（Deitch1961） 293

四、脂类 294

（一）脂肪 294

（二）脂肪酸 295

（三）胆固醇 296

（四）其它脂类 297

（一）脱氧核糖核酸（简 299

称DNA） 299

五、核酸 299

（二）核糖核酸（简称RNA） 301

六、酶类 303

（一）碱性磷酸酶（简称AKP） 303

（二）三磷酸腺苷酶（简称ATPase） 307

（三）酸性磷酸酶（简称ACP） 309

（四）脂酶 311

（五）过氧化酶 313

（六）琥珀酸脱氢酶（简称SDH） 315

主要参考文献 317

附录1．常用缓冲液 318

附录2．各种生理盐水 323

附录3．长度、重量、容量 325

附录4．药品英汉对照 326