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目录 1

第一章　细菌人工染色体技术及其在动物病毒研究中的应用 1

第一节　概述 1

一、细菌人工染色体的构建及其发展 2

二、Cre/LoxP位点特异性重组系统 2

三、细菌人工染色体的应用 4

第二节　伪狂犬病病毒细菌人工染色体及其应用 5

一、伪狂犬病毒 5

二、伪狂犬病病毒细菌人工染色体的构建 8

三、伪狂犬病病毒细菌人工染色体的应用 12

第三节　马立克病毒细菌人工染色体 13

一、基本原理 13

二、应用 14

三、展望 15

参考文献 15

第二章　假病毒技术及其应用 17

第一节　概述 17

第二节　假病毒技术的相关知识 18

一、表型及表型混合 18

二、反转录病毒的结构及特性 21

一、假病毒构建的原理 27

第三节　假病毒技术的原理及其应用 27

二、假病毒构建的方法 29

三、假病毒技术的优缺点 31

四、假病毒技术构建的一般程序 31

五、假病毒构建的注意事项 32

第四节　几种常用的假病毒构建体系 33

一、鼠类白血病病毒假病毒构建体系 33

二、人类免疫缺陷病毒假病毒构建体系 34

二、血凝素 36

第五节　假病毒技术在禽流感病毒研究中的应用 36

一、禽流感概述 36

三、禽流感病毒假病毒体系的构建 39

第三章　反向遗传技术与动物传染病的防制 44

第一节　概述 44

第二节　反向遗传技术的基本原理和发展概况 45

一、反向遗传技术的基本原理 45

二、反向遗传技术的发展 45

一、反向遗传技术的技术路线 47

第三节　反向遗传技术的技术路线和要点 47

二、反向遗传技术的要点 50

第四节　反向遗传技术在几个重要动物疫病防制中的应用前景 51

一、病毒基因结构与功能的研究 52

二、新型疫苗的研究 55

三、开发新型病毒载体 57

参考文献 59

一、禽痘病毒 66

第二节 禽痘病毒的分子生物学特性及其作为痘苗载体的优势 66

第一节　概述 66

第四章　禽痘病毒载体疫苗及其在动物生产中的应用 66

二、禽痘病毒表达载体的优点 67

第三节　重组禽痘病毒的构建 68

一、重组禽痘病毒的构建步骤 68

二、外源基因的表达调控结构 69

三、重组病毒的筛选 71

四、构建重组病毒时应注意的事项 72

一、传染性法氏囊病重组疫苗 73

二、鸡新城疫重组疫苗 73

第四节　重组禽痘疫苗在几种常见禽病防制中的应用 73

三、传染性支气管炎重组疫苗 74

四、传染性喉气管炎病重组疫苗 74

五、禽流感重组疫苗 75

六、马立克病重组疫苗 75

第五节　重组禽痘病毒疫苗的安全性及前景展望 78

一、安全性 78

二、应用前景 78

三、存在问题 78

参考文献 79

第五章　腺病毒和腺病毒载体的研究及应用 82

第一节　腺病毒及其特征 82

一、概述 82

二、腺病毒的基本特征 82

第二节　腺病毒载体及其应用 84

一、腺病毒载体的优点及改造策略 84

二、腺病毒载体的应用 85

参考文献 86

第一节　马立克病毒载体 87

一、概述 87

第六章　重组马立克病疫苗 87

二、马立克病毒生长的非必需区 88

第二节　预防禽病的重组马立克病毒疫苗 94

一、新城疫 94

二、传染性法氏囊病 97

三、结语 97

参考文献 97

第七章　重组伪狂犬病疫苗研究 102

第一节　伪狂犬病概述 102

第二节　伪狂犬病基因工程亚单位疫苗 103

第三节　伪狂犬病核酸疫苗 104

第四节　重组伪狂犬病毒疫苗 105

一、以腺病毒为载体的重组伪狂犬病毒疫苗 105

二、以痘苗病毒为载体的重组伪狂犬病毒疫苗 105

三、以猪痘病毒为载体的重组伪狂犬病毒疫苗 105

四、以其他疱疹病毒为载体的重组伪狂犬病毒疫苗 106

五、以伪狂犬病毒为载体的重组伪狂犬病毒疫苗 106

第五节　基因工程缺失疫苗 107

一、自然弱毒疫苗 107

二、缺失疫苗 108

三、插入报告基因的基因缺失疫苗 110

四、伪狂犬病毒基因缺失疫苗的优势 112

第六节　基因工程活载体疫苗 112

第七节　小结与展望 114

第八章　动物干扰素的研究及应用 115

第一节　干扰素概述 115

一、干扰素基因及其蛋白质 115

二、干扰素诱生剂 117

三、干扰素的生物学功能 118

四、干扰素生物工程 122

五、干扰素的应用 123

参考文献 124

第二节　基因工程猪干扰素的研究 126

一、猪干扰素的分类及其产生细胞 126

二、猪干扰素的基因工程研究 127

三、猪干扰素的抗病毒作用研究 129

四、重组猪干扰素免疫调节活性的研究 131

五、猪体内病原特异的γ干扰素水平与机体抗病毒免疫保护的相关性研究 132

六、结语 132

参考文献 133

第三节　鸡干扰素的研究与生产应用 135

一、鸡干扰素研究概况 135

二、国内重组鸡干扰素的最新研究进展 136

三、鸡的基因工程干扰素在临床使用时需了解的事项 139

四、重组鸡干扰素的应用前景 139

第四节　基因工程犬α干扰素 140

一、犬α干扰素研究现状 140

二、笔者实验室的工作 140

第一节　抗生素问题及抗菌肽概况 142

第九章　抗菌肽及其应用 142

第二节　抗菌肽的特性 143

一、抗菌肽与传统抗生素的差异 143

二、抗菌肽的结构特点 144

三、抗菌肽的作用机制 144

四、抗菌肽结构与功能的关系 147

五、胞膜结构对抗菌肽活性的影响 148

第三节　抗菌肽的来源与分布 148

一、哺乳动物抗菌肽 149

二、两栖类动物抗菌肽 152

三、昆虫抗菌肽 154

四、海洋生物抗菌肽 160

五、植物抗菌肽 161

第四节　抗菌肽的基因工程研究现状 163

第五节　抗菌肽目的基因的获得及相关技术 165

一、重叠区扩增基因拼接法 165

二、降落PCR 168

三、正义链和反义链的磷酸化、退火 169

第六节　抗菌肽表达策略 170

一、抗菌肽原核表达策略 171

二、抗菌肽真核表达策略 176

三、抗菌肽基因工程表达产物的检测 177

第七节　抗菌肽的应用及其前景 177

一、抗菌肽在转基因工程中的应用 177

二、抗菌肽在医药生产中的应用 178

三、抗菌肽在食品防腐剂中的应用 178

四、抗菌肽在饲料添加剂中的应用 179

第十章　动物疫病诊断新技术 181

一、基因工程表达产物在动物疫病诊断中的应用 181

二、实时荧光定量PCR技术 192

三、实时PCR检测技术 196