组织细胞化学理论与技术PDF电子书下载

上篇　组织细胞化学理论 3

第一章　免疫组织细胞化学基础 3

第一节　细胞 3

一、细胞的发现及细胞学说的建立 3

二、细胞的形态 3

目录 3

三、细胞的结构和功能 4

第二节　组织概述 7

一、组织的基本概念 7

二、组织的分类及结构特点 7

第三节　显示细胞和组织成分、结构的方法 14

一、光学显微镜技术 14

三、组织化学技术 15

二、电子显微镜技术 15

四、放射自显影技术 16

五、细胞培养技术与组织工程 16

六、形态计量分析技术 16

第二章　组织细胞化学的免疫学与酶学基础 17

第一节　抗体的发现及其特性 17

一、抗体的发现 17

二、抗体的理化性质 17

三、抗体的生物学活性 18

四、抗体的分类 18

五、抗体的特性 19

第二节　免疫球蛋白分子 21

一、免疫球蛋白分子的基本结构 21

二、免疫球蛋白分子的功能 26

三、免疫球蛋白分子的抗原性 29

四、免疫球蛋白分子的超家族特点 31

第三节　组织细胞化学的酶学基础 33

一、酶的概念及本质 33

二、酶的分类及特性 33

三、酶促反应的影响因素 34

第三章　免疫组织化学基本理论 38

第一节　免疫组织化学的基本原理、发展及展望 38

一、免疫组织化学的基本原理 38

二、免疫组织化学技术的发展与应用 39

第二节　免疫组织化学技术的分类 41

一、根据标记物是否与特异性第一抗体结合分类 41

二、根据标记物或呈色物的不同分类 42

三、标记抗原法 48

第三节 免疫组织化学技术常用仪器设备、器皿准备及试剂配制 48

一、实验仪器 48

二、器皿准备 48

三、器皿的清洗 49

四、玻片的处理 49

五、主要试剂及配制 50

第四节　免疫组织化学标本的获取及处理 52

一、冰冻切片标本的获取与处理 52

二、石蜡切片标本的获取与处理 52

三、细胞标本的获取与处理 59

一、常规注意事项 60

第六节　常用免疫组织化学技术的注意事项 60

二、检测方法 60

一、观察仪器设备 60

第五节　免疫组织化学染色后的观测 60

二、免疫荧光化学技术的注意事项 61

三、免疫酶化学技术的注意事项 61

第四章　酶组织化学 62

第一节　福尔根显示DNA的方法 62

第二节　高碘酸-雪夫反应显示糖原和其他多糖 64

第三节　异丙醇油红O法 65

第四节　碱性磷酸酶显示法 66

第五节　碱性磷酸酶与PAS反应合并染色法 68

第六节　酸性磷酸酶显示法 69

第七节　腺苷三磷酸酶显示法 71

第八节　葡萄糖-6-磷酸酶铅法显示 73

第九节　偶氮耦联法显示非特异性酯酶 74

第十节 乙酰胆碱酯酶和胆碱酯酶显示法 75

第十一节　同时耦联法显示氨基肽酶 76

第十二节　细胞色素氧化酶显示法 78

第十三节　琥珀酸脱氢酶显示法（四唑盐法） 78

第十四节　乳酸脱氢酶显示法 79

第十五节　3β-羟甾体脱氢酶显示法 80

第五章　原位杂交组织化学 82

第一节　探针制备 82

一、探针的来源 82

第二节　原位杂交的组织标本制作 83

第四节　实验对照 83

二、探针标记 83

第三节　杂交组织化学反应 84

第五节　生物素标记探针杂交方法 85

第六章　神经形态示踪方法学 88

第一节　辣根过氧化物酶示踪技术 88

一、动物麻醉及HRP的注入 89

二、动物存活期的确定 91

三、动物的灌注、取材 91

四、呈色反应 92

五、结果判定 92

第二节　荧光染料追踪技术 93

四、动物的灌注固定及取材 94

三、动物存活期的确定 94

二、荧光染料的注射 94

一、荧光染料溶液的配制 94

五、切片、贴片、封片 95

六、荧光显微镜观察 95

第三节　放射自显影神经示踪 95

第四节　顺行示踪技术 97

一、病毒示踪法 97

二、葡聚糖追踪法 97

三、凝集素追踪法 98

第七章　形态定量技术及其应用 100

第一节　概述 100

第二节 目前形态定量研究方法简介 100

一、显微分光光度计的应用 100

二、流式细胞计的应用 100

一、体视学的发展历史 101

二、体视学的概念 101

第三节　体视学概述 101

三、图像分析技术——体视学技术 101

三、体视学的基础理论 102

四、体视学技术的常用参数 105

第四节　体视学技术的基本方法 106

一、设计 107

二、抽样 107

三、测试 111

四、注意事项 124

第五节　体视学技术中各参数的计算 126

一、体积、体积分数与平均体积 126

二、表面积密度、表面积与表面积体积比 129

三、长度密度、总长度与厚度 130

四、粒子的大小、数密度与数目 131

第六节 图像分析仪在医学实验研究中的应用 132

一、图像分析仪 132

二、图像分析在医学实验研究结果分析中的应用 133

第八章　细胞凋亡 139

第一节　概述 139

一、细胞凋亡的概念 139

二、细胞凋亡与细胞坏死的区别 139

三、细胞凋亡与程序性细胞死亡 142

四、细胞凋亡的生物学意义 142

第二节　与细胞凋亡相关的酶类 143

一、Caspase蛋白酶家族 143

二、介导细胞凋亡的其他酶类 146

第三节　细胞凋亡的信号转导途径 146

二、细胞内部信号触发的凋亡——线粒体路径 148

一、细胞外部信号触发的凋亡——死亡受体路径 148

三、粒酶B诱导细胞凋亡的途径 150

四、细胞凋亡的其他途径 150

第四节　细胞凋亡的调控 151

一、Bcl-2家族蛋白的调控作用 151

二、p53的调控作用 152

三、IAP家族蛋白的调控作用 153

四、病毒蛋白的调控作用 154

第五节　细胞凋亡与疾病 154

一、细胞凋亡与自身免疫性疾病 155

二、细胞凋亡与肿瘤 156

三、细胞凋亡与病毒感染 156

四、细胞凋亡与神经系统疾病 156

六、细胞凋亡与心血管疾病 157

五、细胞凋亡与缺血性损伤 157

第六节　细胞凋亡的研究方法 158

一、细胞凋亡的形态学观察 158

二、流式细胞仪检测细胞凋亡 160

三、细胞凋亡的生物化学研究方法 164

四、细胞凋亡的免疫化学分析方法 165

五、细胞凋亡的分子生物学研究方法 166

六、凋亡蛋白质酶及其底物的检测 173

七、其他检测方法 174

下篇　组织细胞化学技术 179

第九章　组织化学技术的应用 179

第一节　免疫组织化学ABC法检测猫背根节c-jun、c-fos的表达 179

一、材料和方法 180

三、结果分析 182

二、结果 182

一、材料和方法 184

第二节 免疫组织化学SP法在检测成年猴脑BDNF、NT4和NGF中的应用 184

二、结果 185

三、结果分析与体会 192

第十章　用酶组化技术显示猫脊髓Ⅱ板层一氧化氮合酶的表达 194

一、材料和方法 194

二、结果 194

三、结果分析与注意事项 195

第十一章　原位杂交组织化学技术检测猫背根节BDNF和NT3的mRNA的表达 197

第一节　材料和方法 197

一、实验仪器、试剂及其配制 197

二、实验方法 200

一、BDNF mRNA杂交信号在DRG的分布 206

第二节　结果 206

二、NT3 mRNA杂交信号在DRG的分布 207

三、对照实验 207

第三节　结果分析与经验体会 207

一、结果分析 207

二、经验体会与注意事项 207

第十二章　组织化学双标技术 209

第一节　脊髓Ⅱ板层NOS、BDNF样神经膨体的免疫组化与酶组化双标技术 209

一、材料和方法 209

二、结果 210

三、结果分析与讨论 210

第二节 免疫组织化学和原位杂交双标技术检测猫背根节BDNF、NT3及其mRNA的表达 210

二、实验方法 211

一、仪器与试剂 211

三、实验结果 212

四、结果分析 213

五、经验体会与注意事项 214

第十三章　组织化学技术的关键与要点 215

第一节　高压控制免疫组化非特异性反应 215

一、材料和方法 215

二、结果 215

三、结果分析 215

第二节　组织化学标本处理要点 216

第三节　组织化学实验步骤操作中注意事项 216

第四节　组织化学结果显色要点 216

一、溶液的浓度 217

二、缓冲液表 217

附录一　组织化学的常用试剂及处理 217

附录 217

三、常用封固剂 222

四、灌注固定 222

附录二　原位杂交组织化学常用试剂及处理 223

一、杂交前准备 223

二、关于探针的标记 227

三、固定剂 230

四、LB培养 232

五、小量质粒提取的主要试剂 232

六、杂交前处理 233

七、杂交用液 234

八、杂交后漂洗溶液 236

九、原位杂交信号显示 237