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目录 1

第1章 生物化学实验基本知识 1

1.1 生物化学实验室规则 1

1.2 生物化学实验室安全与防护常识 1

1.3 化学药品的使用和储藏 3

1.4 实验误差与数据处理 5

1.5 实验记录与报告 8

1.6 实验室常用仪器的使用 10

2.1 生物化学实验技术发展简史 20

第2章 现代生化实验技术 20

2.2 离心技术 21

2.3 光谱技术 27

2.4 层析技术 33

2.5 电泳技术 42

2.6 免疫化学技术 56

2.7 基因工程技术 62

2.8 生物大分子的制备 66

第3章 基础实验 83

实验1 糖的呈色反应和定性鉴定 83

实验2 总糖和还原糖的测定（一）——Fehling试剂热滴定法 87

实验3 总糖和还原糖的测定（二）——3,5-二硝基水杨酸法 91

实验4 血糖含量的测定——邻甲苯胺法 94

实验5 粗脂肪的提取和测定 96

实验6 血清总胆固醇的测定 98

实验7 脂肪碘值的测定 100

实验8 氨基酸的分离与鉴定——双向层析法 102

实验9 蛋白质的两性性质及等电点的测定 105

实验10 蛋白质含量的测定（一）——微量凯氏定氮法 107

实验11 蛋白质含量的测定（二）——双缩脲法 111

实验12 蛋白质含量的测定（三）——Folin-酚法 114

实验13 蛋白质含量的测定（四）——紫外（UV）吸收测定法 117

实验14 蛋白质含量的测定（五）——考马斯亮蓝染色法 119

实验15 牛乳中酪蛋白的制备 121

实验16 紫外吸收法测定核酸的含量 123

实验17 酵母RNA的提取及组分鉴定 125

实验18 质粒DNA的微量制备 127

实验19 小牛胸腺DNA的制备——浓盐法 130

实验20 植物中DNA的提取 132

实验21 酶的特性——底物专一性 134

实验22 影响酶促反应的因素——温度、pH和抑制剂 136

实验23 底物浓度对酶促反应速度的影响——米氏常数的测定 139

实验24 胰蛋白酶的制备及活力的测定 141

实验25 乳酸脱氢酶活力测定 145

实验26 多酚氧化酶的纯化和活力测定 147

实验27 维生素A的测定——比色法 149

实验28 维生素B1的荧光测定法 151

实验29 维生素B2（核黄素）的荧光测定法 153

实验30 肾上腺素的提取和测定 156

实验31 叶绿素含量测定 158

实验32 总黄酮的提取和测定 159

实验33 肌糖原的酵解作用 161

实验34 发酵过程中无机磷的利用 163

实验35 氨基转换作用 165

实验36 脂肪酸β-氧化 167

第4章 技术实验 169

实验37 蛋白质相对分子质量的测定（一）——SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法 169

实验38 蛋白质相对分子质量的测定（二）——葡聚糖凝胶过滤法 172

实验39 血清蛋白的分离——聚丙烯酰胺凝胶电泳法 176

实验40 醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白 179

实验41 不同相对分子质量蛋白质的分离——凝胶柱层析法 182

实验42 血清白蛋白的分离纯化 185

实验43 离子交换层析法分离氨基酸 188

实验44 聚丙烯酰胺等电聚焦电泳 190

实验45 质粒DNA限制性酶切及琼脂糖凝胶电泳分离鉴定 194

实验46 Southern印迹技术 198

实验47 兔抗人血清抗体的制备和效价测定 200

实验48 单向定量免疫电泳 203

实验49 酶联免疫吸附测定 205

第5章 设计实验 209

实验50 果蔬维生素C含量测定及其分析 209

实验51 蛋白质的表达、分离、纯化和鉴定 212

第6章 综合实验 212

实验52 基因克隆技术pGEM-XY1重组质粒的构建和鉴定 216

实验53 天然产物中多糖的提取、纯化与鉴定 225

附录 229

一、常用缓冲液的配制 229

二、酸、碱、盐及有机溶剂的基本数据 234

三、硫酸铵饱和度的常用表 236

四、常见蛋白质相对分子质量参考表 238

五、凝胶染料的种类及特点 239

六、层析法常用数据表及性质 240

参考文献 244