生物化学与分子生物学实验技术 实验指导分册PDF电子书下载

第一章 概论 1

第一节 实验室基本常识 1

第二节 实验报告书写要求 2

第三节 生化实验基本操作 2

第二章 生物化学实验常用技术 7

第一节 分光光度技术（比色法） 7

第二节 层析技术 13

第三节 电泳技术 23

第四节 离心技术 30

第三章 分子生物学实验常用技术 36

第一节 核酸的分离提取和纯化 36

第二节 聚合酶链反应 40

第三节 核酸分子杂交技术 47

第四章 生物化学实验部分 53

实验一 血清γ-球蛋白的分离纯化与鉴定 53

实验二 蛋白质含量测定 56

Ⅰ.双缩脲法 56

Ⅱ.Folin-酚试剂法（Lowry法） 57

Ⅲ.考马斯亮蓝G-250法 59

Ⅳ.BCA法 60

Ⅴ.紫外分光光度法 62

实验三 血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳 64

实验四 血清蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳 66

实验五 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质相对分子质量 69

实验六 等电聚焦电泳测定蛋白质等电点 72

实验七 氨基酸的薄层层析 74

实验八 蛋白质的脱盐（凝胶层析法） 76

实验九 氨基酸的双向纸层析 78

实验十 血清总胆固醇的测定（硫磷铁法） 80

实验十一 血清尿素的测定（二乙酰一肟法） 82

实验十二 血清高密度脂蛋白-胆固醇含量的测定（酶法） 84

实验十三 血清甘油三酯的测定（乙酰丙酮显色法） 86

实验十四 酮体的生成与作用的定性测定 88

实验十五 维生素C的提取及定量测定（磷钼酸法） 90

实验十六 血清乳酸脱氢酶总活性的测定（比色法） 93

实验十七 血清葡萄糖含量测定 96

Ⅰ.葡萄糖氧化酶法 96

Ⅱ.邻甲苯胺法 98

实验十八 丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制 100

实验十九 碱性磷酸酶的Km测定及抑制剂类型的判定（双倒数作图法） 102

Ⅰ.碱性磷酸酶的Km测定 102

Ⅱ.抑制剂类型的判定 104

实验二十 酶浓度、pH、温度及抑制剂对酶促反应的影响 106

Ⅰ.酶浓度对酶促反应的影响 106

Ⅱ.pH对酶促反应的影响 108

Ⅲ.温度对酶促反应的影响 110

第五章 分子生物学实验部分 112

实验一 组织细胞中基因组DNA的提取 112

实验二 琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段（水平潜水式） 114

实验三 质粒DNA的提取（碱裂解法） 117

实验四 动物组织细胞总RNA的提取和变性凝胶电泳鉴定 120

实验五 紫外分光光度法测定核酸的浓度及纯度 123

实验六 聚合酶链反应（PCR) 125

实验七 逆转录聚合酶链反应（RT-PCR) 127

实验八 Southern印迹杂交 130

实验九 Western印迹杂交 133

附录 136

参考文献 148