生物化学技术的理论和实验PDF电子书下载

目录 1

第一章 实验数据的分析和报告 1

1.1 实验数据的记录和处理 1

1.1.1 有效数字 1

1.1.2 科学记数法 2

1.1.3 单位 2

1.2 实验数据的分析 4

1.2.1 误差分析和精密度的判断 4

1.2.2 误差和数据的取舍 5

1.2.3 数学运算结果的不确定性的计算 5

1.2.4 精密度和测定次数之间的关系 6

1.3 表和图 6

1.3.1 表 6

1.3.2 图表中10的乘方的使用 7

1.3.3 制图规则 8

1.3.4 线性化 9

1.3.5 数值曲线拟合 最小二乘法 10

1.3.6 线性最小二乘法中的权重因子 11

1.3.7 曲线下面积的计算 11

1.4 对照和空白 11

1.5 命名的一般规则 12

1.6 实验室和研究报告 12

1.7 引用的文献 13

1.8 深人研究用的参考文献 13

第二章 溶液的制备和性质 14

2.1 测量方法 14

2.2　容量玻璃仪器 14

2.3　容量玻璃仪器的使用 17

2.3.1　清洗 17

2.3.2　弯月面的读法 17

2.3.3　校准 17

2.4　分析天平 18

2.5　浓度和稀释度的表达法 19

2.6　溶液的稀释 20

2.7　标准溶液 20

2.8　 pH和缓冲溶液 21

2.8.1　pH 21

2.8.2　缓冲溶液 22

2.8.3　缓冲液容量和离子强度 23

2.9　pH测量 24

2.9.1　PH计 24

2.9.2　测定pH 25

2.10 引用的文献 25

2.11 深入研究用的参考文献 25

第三章　光谱学方法 26

3.1　电磁辐射和光谱 26

3.2　光吸收的定量 28

3.2.1　Lambert-Beer定律 28

3.2.4 消光系数和浓度的测定 29

3.2.3 物质的紫外或可见光谱和最大吸收波长的测定 29

3.2.2 消光系数的定义 29

3.2.5 混合物中两种物质浓度的测定 31

3.2.6 差示光谱法 32

3.3 紫外和可见光谱测定法 32

3.3.1 仪器 32

3.3.2 紫外和可见光谱的应用 33

3.4 荧光光度法 33

3.4.1 荧光 33

3.4.2 仪器 33

3.5 红外光谱学 36

3.5.1 红外分光光度法 36

3.5.2 红外分光光度计 37

3.5.3 样品处理（用于红外光谱测定） 38

3.5.4 红外光谱的应用 38

3.6 核磁共振光谱测定法 39

3.6.1 质子NMR光谱测定法 41

3.6.2 13C NMR光谱测定法 43

3.6.3 其它核的NMR光谱 44

3.6.4 NMR光谱在生物化学中的应用 45

3.7 引用的文献 46

3.8 深入研究用的参考文献 47

第四章 层析技术 48

第一部分 层析类型和层析技术 48

4.1 吸附层析 49

4.2 离子交换层析 51

4.3 液-液分配层析 53

4.4 纸层析 53

4.5 薄层层析 56

4.6 凝胶渗透层析 57

4.6.1 凝胶和柱的制备 61

4.6.2 凝胶渗透层析中的概念 62

4.7 亲和层析 62

4.7.2 配体与固性载体的连接 63

4.7.1 惰性载体和配体 63

4.7.3 疏水层析 64

4.8 气-液层析 64

4.9 高效液相层析 66

第二部 分层析的特殊应用 69

4.10 糖类 69

4.10.1 糖类的吸附层析 69

4.10.2 糖类的离子交换层析 69

4.10.3 糖类的纸层析 70

4.10.4 糖类的薄层层析 71

4.10.5 糖类的凝胶渗透层析 72

4.10.6 糖类的亲和层析 73

4.10.7 糖类的气-液层析 73

4.10.8 糖类的高效液相层析 73

4.11 氨基酸 73

4.11.1 氨基酸的离子交换层析 74

4.11.2 氨基酸的薄层层析 75

4.12.1 蛋白质的吸附层析 76

4.11.3 氨基酸的高效液相层析 76

4.12 蛋白质 76

4.12.2 蛋白质的离子交换层析 77

4.12.3 蛋白质的凝胶渗透层析 78

4.12.4 蛋白质的高效液相层析 78

4.13 核苷酸和核酸 78

4.13.1 核酸的离子交换层析 78

4.13.2 核酸的凝胶渗透层析 79

4.13.3 核酸的亲和层析 79

4.13.4 核酸的高效液相层析 80

4.14　脂类 80

4.14.1 脂类的吸附层析 80

4.14.2 脂类的离子交换层析 80

4.14.3 脂类的纸层析 80

4.14.4 脂类的薄层层析 80

4.14.6 脂类的高效液相层析 81

4.14.5 脂类的气-液层析 81

4.15 引用的文献 82

4.16 深入研究用的参考文献 85

第五章 电泳技术 86

5.1 理论 86

5.2 电泳类型 86

5.2.1 纸电泳和醋酸纤维素电泳 87

5.2.3 凝胶电泳 88

5.2.2 薄层电泳 88

5.2.4 免疫电泳 97

5.2.5 等电聚焦 99

5.3 特殊应用 99

5.3.1 蛋白质和肽 99

5.3.2 核酸和寡核苷酸 100

5.3.3 脂蛋白分离 102

5.4 引用的文献 102

5.5 深入研究用的参考文献 103

6.1 原子 同位素和放射性同位素的本质 104

第六章 放射性同位素的理论、测量和使用 104

6.2 放射性衰变的类型 105

6.2.1 负-β（电子）发射引起的衰变 105

6.2.2 正-β（电子）发射引起的衰变 105

6.2.3 捕获电子引起的衰变 105

6.2.4 γ-辐射引起的衰变 105

6.2.5 α-粒子发射引起的衰变 106

6.3 天然放射性同位素和人工生产的放射性同位素 106

6.4 放射性发射的性质 107

6.4.1 β-粒子发射的能量 107

6.4.2 β-粒子与其环境的相互作用 108

6.4.3 γ辐射及其与物质的相互作用 108

6.4.4 放射性衰变的动力学 109

6.6 处理放射性同位素的特殊技术和安全措施 112

6.5.2 居里：放射性蜕变的单位 112

6.5.1 电子伏特 112

6.5 放射性测量中使用的单位 112

6.7 放射性同位素计数的统计学 113

6.8 气体电离法测定放射性 115

6.9 闪烁计数法测定放射性强度 117

6.9.1 液体闪烁计数法的原理 117

6.9.2 脉冲高分析和β能谱 118

6.9.3 在双标记混合物中每种同位素活力的测定 119

6.9.4 合剂组成和样品制备 120

6.9.5 淬灭和淬灭校正 121

6.10 γ-辐射的固体闪烁计数 122

6.11 用放射自显影术检测 123

6.12 标记生化物化学化合物的方法 125

6.13 放射性化学标记的类型 128

6.14 放射性同位素的应用 129

6.14.1 用放射性同位素定量测定化合物的含量 129

6.14.2 用同位素稀释分析法定量测定化合物 130

614.4 应用放射性同位素的脉冲技术和追逐技术 132

6.14.3 测定由一种标记前体形成的几种化合物的摩尔分数 132

6.14.5 放射性示踪剂在酶反应机制和代谢途径研究中的应用 133

6.14.6 放射免疫分析 134

6.15 放射性同位素实验的设计 135

6.16 引用的文献 137

6.17 深入研究用的参考文献 137

7.1 糖类 138

7.1.1 各类型糖的定性检验 138

第七章 定性定量测定生物分子的方法 138

7.1.2 糖类的定量测定 140

7.2 氨基酸肽和蛋白质 145

7.2.1 氨基酸和蛋白质的定性试验 145

7.2.2 氨基酸的定量测定 146

7.2.3 蛋白质的定量测定 148

7.3 核苷酸和核酸 153

7.3.1 RNA和DNA的定性测定 153

7.3.2 核苷酸和核酸的定量测定 154

7.4.1 脂类在薄层层析图谱上的定性试验 155

7.4 脂类和类固醇 155

7.4.2 类固醇的定性试验 157

7.4.3 脂类的定量测定 157

7.5 其它测定方法 158

7.5.1 无机磷的测定：修改的Fiskc-Subbarow法 158

7.5.2 特殊键合分析 158

7.6 引用的文献 160

7.7 深入研究用的参考文献 162

第八章 生物制备 163

8.1 起始材料 163

8.2 细胞溶解和抽提 163

8.3 制备生物材料的特殊技术 164

8.3.1 离心 164

8.3.2 密度梯度离心 166

8.3.3 过滤 166

8.3.4 溶液的浓缩 167

8.3.5　透析 167

8.3.6　用于生产生化物质的细菌培养 168

8.4　细胞成分和细胞器的亚细胞分级 169

8.4.1　肝线粒体的制备 169

8.4.2　叶绿体的制备 169

8.4.3　肝核的分离 169

8.4.4　大肠杆菌核糖体的制备 170

8.5　蛋白质的纯化 170

8.5.1　根据溶解度的分离 170

8.5.3　蛋白质的结晶 171

8.5.2　层析分离和电泳分离 171

8.5.4　个别蛋白质的分离和纯化 172

8.6　糖类的制备 175

8.6.1　一般分离纯化方法 175

8.6.2　制备不同糖类的特殊方法 175

8.7　核酸的制备 177

8.7.1　一般分离纯化方法 177

8.7.2　制备各种核酸的特殊方法 178

8.8.1　一般分离纯化方法 180

8.8　脂类的制备 180

8.8.2　一般抽提纯化步骤 181

8.8.3　制备脂类的特殊方法 181

8.9　引用的文献 184

8.10　深入研究用的参考文献 185

第九章 酶学 186

9.1　酶作用的动力学和理论 187

9.2　反应初速度v1的测定 188

9.3 酶反应与pH的关系 189

9.4 酶反应与温度的关系 189

9.5 酶活力的测定 190

9.6 酶的米氏常数Km最大反应速度Vm和转换数k2的测定 192

9.7 酶的抑制作用 195

9.7.1 竞争性抑制作用 195

9.7.2 非竞争性抑制作用 196

9.7.3 混合抑制作用 197

9.7.4 反竞争性抑制作用 198

9.8 不遵循米氏动力学的别构酶 200

9.9 酶的专一性 201

9.10 引用的文献 201

9.11 深入研究用的参考文献 202

第十章 生物分子的结构分析 203

10.1 寡糖和多糖的结构测定 203

10.1.1 单糖组成的测定 204

10.1.2 寡糖结构的测定 204

10.1.3 多糖结构的测定 210

10.2 肽和蛋白质的一级结构测定 213

10.2.1 多肽链的形成和分离 213

10.2.2 蛋白质纯度的测定 213

10.2.3 氨基酸组成测定 214

10.2.4 末端分析 214

10.2.5 肽键裂解的特殊方法 216

10.2.7 肽的顺序分析 218

10.2.6 肽的分离 218

10.2.8 由重叠肽导出蛋白质的完整顺序 221

10.3 核酸结构的测定 221

10.3.1 DNA的分离纯化和克隆 222

10.3.2 DNA的酶法裂解和限制性内切酶裂解图谱 223

10.3.3 DNA的电泳分离及纯度鉴定 225

10.3.4 顺序分析的战略 225

10.4 脂类结构的测定 234

10.3.5 大核酸完整顺序的导出 234

10.4.1 脂类专一裂解成它的组成部分 236

10.4.2 脂成分的测定 236

10.4.3 蛋黄磷脂酰胆碱的鉴定——一个分析脂的例子 238

10.5 引用的文献 240

附录A：生化分析、生化方法和生化制备的文献资料来源 242

附录B：氨基酸、缩写和DNA三联码 244

附录C：某些市售限制性核酸内切酶及其DNA顺序专一性 245

附录D：制备不同浓度硫铵溶液用表 246

常用生物化学物质俗名缩写 247