生物化学与分子生物学实验教程PDF电子书下载

第一篇　基础理论 3

第1章　基本操作与缓冲液的配制 3

第一节　洗涤液的配制及实验用器皿的清洗 3

第二节　常用仪器的使用 4

第三节　溶液的混匀与过滤 12

第四节　试剂及试剂保存与配制 13

第五节　实验误差与提高实验准确度的方法 24

第2章　常用的简单分离技术 29

第一节　离心 29

第二节　过滤 32

第三节　浓缩 32

第四节　沉淀 33

第五节　透析 35

第3章　层析技术 36

第一节　层析的原理 36

第二节　吸附层析 37

第三节　排阻层析 38

第四节　分配层析 39

第五节　离子交换层析 40

第六节　亲和层析 41

第七节　气相层析 42

第八节　高效液相层析 42

第4章　电泳技术 45

第5章　光谱分析技术 48

第6章 常用的分子生物学技术 51

第一节　核酸的分离纯化技术 51

第二节　重组DNA技术 52

第三节　核酸分子杂交技术 54

第四节　PCR技术 55

第五节　蛋白质相互作用技术原理 59

第六节　蛋白质与DNA相互作用技术原理 61

第二篇　实验操作 67

第7章　物质的分离与鉴定实验 67

实验一　氨基酸的分离鉴定（纸层析法） 67

实验二　血红蛋白与鱼精蛋白的层析分离 68

实验三　离子交换层析法分离超氧化物歧化酶 69

实验四　亲和层析纯化胰蛋白酶 71

实验五　气相层析 73

实验六　高效液相层析 75

实验七　血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳 76

实验八　DNA的琼脂糖凝胶电泳 79

实验九　平板聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质 80

实验十　梯度PAGE分离血清蛋白质 81

实验十一 SDS-PAGE测定蛋白质相对分子质量 83

实验十二　血红蛋白吸收曲线的绘制 86

实验十三　茯苓多糖和猪苓多糖水解与鉴定 87

实验十四　肝组织中核酸的分离与鉴定 88

实验十五　酪蛋白的制备 90

第8章　物质定量测定实验 92

实验一　核黄素荧光定量测定 92

实验二　邻甲苯胺法测定血糖浓度 93

实验三　维生素C的测定（2,4-二硝基苯肼法） 94

实验四　用正交法测定几种因素对酶活力的影响 96

实验五　血清总胆固醇的测定 99

实验六　血清胆固醇测定（邻苯二甲醛法） 100

实验七　血清三酰甘油测定 101

实验八　血清胆红素的定量测定 103

实验九　血清肌酐定量（苦味酸法） 104

实验十　血清钙定量（邻甲酚酞络合剂法） 105

实验十一　血清钾定量（四苯硼钠法） 106

实验十二　血清尿素氮定量（二乙酰一肟法） 108

实验十三　血浆二氧化碳结合力测定（滴定法） 109

实验十四　蛋白质含量测定（紫外吸收法） 110

实验十五　蛋白质含量测定（考马斯亮蓝法） 111

实验十六　蛋白质含量测定（双缩脲法） 112

实验十七　蛋白质含量测定（Folin-酚法） 113

实验十八　RNA的定量测定（苔黑酚法） 115

实验十九　还原糖和总糖含量的测定（3,5-二硝基水杨酸比色法） 116

实验二十　糖的定量测定（蒽酮比色法） 118

实验二十一　果胶质含量测定（重量法） 119

实验二十二　脂肪碘值的测定 120

实验二十三 中药杏仁脂质成分的定量测定（索氏提取法） 122

第9章　蛋白质性质实验 124

实验一　酶的特性 124

实验二　茚三酮反应 127

实验三　蛋白质等电点的测定 127

实验四　蛋白质的沉淀反应 128

实验五　丙二酸对琥珀酸脱氢酶活性的影响 130

实验六　乳酸脱氢酶及其辅酶的作用 131

实验七　碱性磷酸酶米氏常数测定（双倒数作图法） 133

实验八　血清丙氨酸转氨酶的活性测定 135

第10章　分子生物学实验 137

实验一　从植物组织提取基因组DNA 137

实验二　从动物组织中提取基因组DNA 138

实验三　细菌基因组DNA的制备 139

实验四　从琼脂糖凝胶中回收3-磷酸甘油醛脱氢酶基因片段 139

实验五 LB、2YT液体和固体培养基的配制 141

实验六　质粒DNA少量快速提取 142

实验七 质粒DNA的大量提取和纯化 144

实验八 人ATP7B基因第十三外显子的PCR 145

实验九　肝组织总RNA的提取 147

实验十 GAPDH mRNA的反转录PCR（RT-PCR） 148

实验十一 利用实时定量PCR分析TNFAIP1在不同细胞系中的表达 149

实验十二　重组质粒的连接 152

实验十三　大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 153

实验十四 重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞及筛选、鉴定 154

实验十五　重组质粒DNA的酶切 155

实验十六 DNA印迹杂交（一） 156

实验十七 DNA印迹杂交（二） 157

实验十八　肝癌细胞总RNA的RNA印迹实验 159

实验十九　蛋白质印迹实验 161

实验二十　酵母双杂交系统确定蛋白质相互作用实验 162

实验二十一　GST融合蛋白质沉降技术检测蛋白质相互作用实验 165

实验二十二　免疫共沉淀实验 166

实验二十三 电泳迁移率实验 167

实验二十四　染色质免疫沉淀实验 169