细胞工程 第2版PDF电子书下载

绪论 1

0.1　细胞工程简介 1

0.2　细胞工程的发展史 3

思考题 4

第一篇 细胞工程的技术基础第1章　细胞培养的设施与基本条件 7

1.1　细胞工程实验室的设置 7

1.1.1　动物细胞工程实验室的设置 7

1.1.2　植物细胞工程实验室的设置 8

1.2　常用仪器与设备 9

1.2.1　动物与植物细胞工程实验室通用的仪器设备 9

1.2.2　动物细胞工程实验室的常用仪器设备 13

1.2.3　植物细胞工程实验室的常用仪器设备 14

1.3　实验室的生物安全 15

思考题 16

第2章　清洗与消毒 17

2.1　清洗 17

2.1.1　玻璃器皿的清洗 17

2.1.2　胶塞的清洗 18

2.1.3　塑料制品的清洗 18

2.1.4　G6除菌滤器的清洗 19

2.1.5　不锈钢除菌滤器的清洗 19

2.1.6　包装 19

2.2　消毒 19

2.2.1　物理灭菌法 19

2.2.2　化学消毒法 20

思考题 21

附　实验1　器械的清洗与消毒 21

第3章　细胞培养的基本方法 24

3.1　无菌操作技术 24

3.1.1　实验器具和材料的准备 25

3.1.2　培养室和超净台的消毒 25

3.1.3　洗手和着装 25

3.1.4　无菌培养操作 25

3.2　培养细胞的观察 26

3.2.1　相差显微镜观察 26

3.2.2　培养细胞的观察 27

3.3　细胞培养中常用的染色方法 28

3.3.1　活体染色 28

3.3.2　染料排除检测法 29

3.4　细胞培养的污染和检测 29

3.4.1　污染途径 30

3.4.2　污染对培养细胞的影响及检测 30

3.4.3　污染的预防 32

3.4.4　污染的排除 32

思考题 33

第二篇 动物细胞工程 37

第4章　细胞培养 37

4.1　培养细胞的生物学特征 38

4.1.1　体外培养细胞的分型 38

4.1.2　培养细胞的生长特点 39

4.1.3　培养细胞的生长与增殖过程 40

4.1.4　培养细胞的遗传学特征 42

4.1.5　体内外细胞的差异及培养细胞的分化 42

4.2　细胞培养液 42

4.2.1　细胞培养的常用液体 43

4.2.2　培养基 44

4.3　细胞的基本培养技术 51

4.3.1　原代培养 51

4.3.2　传代培养 55

4.3.3　常用培养技术 56

4.4　细胞系和细胞株的建立 65

4.4.1　细胞系和细胞株的种类 65

4.4.2　建立细胞系（或株）的要求 66

4.4.3　细胞系和细胞株的鉴定 67

4.5　细胞的冻存、复苏和运输 68

4.5.1　细胞的冻存 68

4.5.2　细胞的复苏 68

4.5.3　细胞的运输 68

思考题 69

附　实验2　细胞培养液的配制 69

实验3　原代细胞培养 70

实验4　培养细胞的增殖及活力测定 71

实验5　细胞的传代培养 73

实验6　细胞的冻存和复苏 74

第5章　细胞融合与单克隆抗体 76

5.1　单克隆抗体技术 77

5.1.1　单克隆抗体技术的原理 77

5.1.2　杂交瘤制备 78

5.1.3　单克隆抗体的大量制备 85

5.2　人源性单克隆抗体制备 86

5.2.1 EB病毒转化技术 86

5.2.2　细胞工程单克隆抗体技术 87

5.2.3　人单抗制备技术的发展 90

5.3　单克隆抗体在医学上的应用 92

5.3.1　单克隆抗体靶向制剂 92

5.3.2　单克隆抗体在肿瘤诊断与治疗中的应用 93

思考题 94

附　实验7　动物细胞融合 95

第6章　胚胎工程 96

6.1　胚胎发育的基本过程和机制 96

6.1.1　胚胎发育的基本过程 97

6.1.2　胚胎发育的基本机制 101

6.2　体外受精 104

6.2.1　体外受精的研究历史 105

6.2.2　体外受精技术 105

6.3　胚胎移植技术 107

6.3.1　胚胎移植的研究历史 108

6.3.2　胚胎移植技术 108

6.4　胚胎分割技术 110

6.4.1　胚胎分割的方法 110

6.4.2　分割胚的培养 111

6.4.3　胚胎分割目前存在的问题和发展前景 111

6.5　早期胚胎的体外培养 112

6.5.1　胚胎的发育阻滞 112

6.5.2　克服胚胎发育阻滞的方法 112

6.6　胚胎冷冻保存技术 114

6.6.1　抗冻保护剂和冷冻溶液 114

6.6.2　胚胎的冷冻方法 114

6.7　动物的性别控制 115

6.7.1　动物的性别决定 115

6.7.2　性别控制的方法与技术 116

6.7.3　性别控制的意义 120

思考题 120

附　实验8　哺乳动物体外受精和早期胚胎的体外培养 121

第7章　干细胞与组织工程 124

7.1　胚胎干细胞 125

7.1.1　胚胎干细胞的研究概况 125

7.1.2　胚胎干细胞的生物学特性 125

7.1.3　胚胎干细胞的建系 127

7.1.4　ES细胞的鉴定 128

7.1.5　ES细胞的应用前景及面临的难题 128

7.2　成体干细胞 130

7.2.1　造血干细胞 130

7.2.2　神经干细胞 130

7.2.3　胰岛干细胞 131

7.2.4　皮肤干细胞 131

7.3　组织工程 131

7.3.1　组织工程化皮肤 131

7.3.2　组织工程化骨骼 132

7.3.3　组织工程化血管 132

7.3.4　组织工程化管状器官 132

7.3.5　组织工程化腺体器官 132

思考题 133

第8章　核移植技术与动物克隆 134

8.1　核移植技术 135

8.1.1　核移植技术的类型 135

8.1.2　核移植技术的一般操作程序 135

8.2　核移植技术的应用 137

8.2.1　核移植技术的应用 137

8.2.2　核移植技术存在的问题 138

思考题 138

附　实验9　鱼类核移植实验 138

实验10　哺乳类细胞核移植实验 139

第9章　转基因动物与动物生物反应器 141

9.1　转基因动物的培育技术 142

9.1.1　基因显微注射法 142

9.1.2　逆转录病毒感染法 143

9.1.3　胚胎干细胞介导法 143

9.1.4　精子载体导入法 144

9.1.5 YAC介导的基因转移 144

9.1.6　细胞核移植技术 144

9.2　转基因动物的应用 144

9.2.1　改良动物品种 144

9.2.2　生物制药 145

9.2.3　建立诊断和治疗人类疾病的动物模型 145

9.2.4　生产可用于人体器官移植的动物器官 145

9.2.5　基因治疗 145

9.2.6　基因打靶 146

9.2.7　转基因动物应用面临的问题 147

9.3　动物乳腺生物反应器 148

9.3.1　动物乳腺生物反应器的制备 148

9.3.2　动物乳腺生物反应器的优点 149

9.3.3　动物乳腺生物反应器的应用 149

9.3.4　动物乳腺生物反应器存在的问题 150

思考题 151

附　实验11　磷酸钙沉淀法转染细胞 151

实验12　电穿孔和电融合技术 152

第10章　动物染色体工程 155

10.1　动物染色体倍性改造 155

10.1.1　动物的多倍体育种 155

10.1.2　动物的单倍体育种 158

10.2　动物染色体结构的改造 160

10.2.1　染色体片段的删除和重排 160

10.2.2　染色体的易位工程 160

10.3　人工染色体 161

10.3.1　酵母人工染色体 161

10.3.2　细菌人工染色体 162

10.3.3　哺乳类人工染色体 162

10.3.4　人工染色体的应用 163

思考题 163

推荐网址 164

第三篇 植物细胞工程 167

第11章　植物组织培养 167

11.1　植物组织培养的理论基础 168

11.1.1　植物的无性繁殖 168

11.1.2　植物细胞全能性理论 169

11.1.3　植物细胞的脱分化和再分化 169

11.2　植物组织培养 171

11.2.1　实验材料的清洗和消毒 171

11.2.2　培养基 173

11.2.3　接种 178

11.2.4　种质保存 179

11.2.5　植物细胞的大规模培养技术 181

思考题 184

附　实验13　植物组织培养培养基的配制 184

实验14　植物细胞的悬浮培养及其次生代谢产物的生产 186

实验15　植物叶片的脱分化和再分化培养 187

第12章　植物的快速繁殖 189

12.1　植物快速无性繁殖 189

12.2　植物脱毒 191

12.3　植物快速繁殖和试管苗工厂化生产中的注意事项 192

思考题 192

附　实验16　月季快繁 192

第13章　体外单倍体诱导与单倍体育种 194

13.1　植物小孢子发育过程 195

13.2　花药和花粉培养 195

13.2.1　花药培养 195

13.2.2　花粉培养 196

13.2.3　小孢子母细胞培养 196

13.3　花药与花粉培养方法 197

13.3.1　材料的选择 197

13.3.2　材料的预处理 198

13.3.3　培养基 199

13.3.4　接种与再生植株的培育 201

13.4　单倍体育种在生产实践中的应用 202

思考题 203

第14章　植物胚胎培养 204

14.1　胚培养 204

14.1.1　成熟胚培养 204

14.1.2　幼胚培养 205

14.1.3　胚培养的意义 205

14.2　子房培养 206

14.3　被子植物胚乳培养 207

14.3.1　植物胚乳的发育特性 207

14.3.2　影响胚乳培养的因素 208

14.3.3　胚乳培养的意义 208

思考题 208

附　实验17　植物幼胚培养 208

实验18　玉米成熟胚的培养 209

第15章　体细胞胚胎发生和人工种子 211

15.1　愈伤组织与体细胞胚胎发生 211

15.1.1　愈伤组织的诱导 212

15.1.2　愈伤组织器官的发生 212

15.2　人工种子 213

15.2.1　人工种子的制备 213

15.2.2　人工种子的研究现状 215

思考题 216

第16章　植物原生质体融合技术 217

16.1　植物原生质体的制备 218

16.1.1　植物原生质体的分离 218

16.1.2　影响植物原生质体数量和活力的因素 218

16.1.3　植物原生质体的纯化 219

16.1.4　植物原生质体的培养方法 219

16.2　植物原生质体的融合 219

16.2.1　植物原生质体的融合技术 219

16.2.2　融合体 221

16.3　杂种细胞的筛选 221

16.3.1　遗传互补选择法 221

16.3.2　可见标记法 222

16.4　体细胞杂种的鉴定 222

16.5　体细胞融合的意义 222

思考题 223

附　实验19　植物体细胞原生质体的制备及融合 223

第17章　植物染色体工程 226

17.1　植物染色体倍性改造 226

17.1.1　染色体加倍技术 227

17.1.2　植物的多倍体育种 228

17.1.3　植物的单倍体育种 231

17.2　植物染色体非整倍体改造 233

17.2.1　染色体的削减 233

17.2.2　染色体的添加 234

思考题 235

第18章　植物转基因技术 236

18.1　植物基因转化技术 237

18.1.1　农杆菌介导转化法 237

18.1.2　基因枪介导转化法 239

18.2　转基因植物 240

18.2.1　植物抗虫基因工程 240

18.2.2　植物抗病基因工程 240

18.2.3　植物抗逆基因工程 241

18.2.4　植物品质改良的基因工程 241

18.2.5　植物叶绿体基因工程 241

18.2.6　植物生物反应器 241

思考题 241

附　实验20　土壤农杆菌的转化实验（叶盘法） 242

推荐网址 244

参考文献 245

附录 250

英文专业名词索引 255