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第一部分 酚氧化酶研究概述 3

第一章 酚氧化酶及昆虫酚氧化酶概况 3

第一节 酚氧化酶概况 3

1.1.1酚氧化酶的起源 3

1.1.2酚氧化酶的组织定位 4

1.1.3酚氧化酶的分子生物学研究 5

1.1.4酚氧化酶活性中心结构 8

1.1.5酚氧化酶的催化氧化 10

第二节 昆虫酚氧化酶 12

1.2.1酚氧化酶在昆虫体内的存在及激活 12

1.2.2酚氧化酶在昆虫体内的生理功能 13

1.2.3酚氧化酶抑制剂的研究 15

1.2.4酚氧化酶抑制剂在害虫控制领域的前景 16

参考文献 17

第二章 昆虫酚氧化酶分离纯化及活性测定技术 20

第一节 昆虫酚氧化酶分离纯化基本技术 20

2.1.1绪言 20

2.1.2酶源材料的制备与分离纯化一般步骤 20

2.1.3凝胶层析法 21

2.1.4离子交换层析法 24

2.1.5亲和层析法 25

第二节 昆虫酚氧化酶的分离纯化、纯度鉴定及活性测定 26

2.2.1绪言 26

2.2.2菜青虫幼虫的酚氧化酶分离纯化步骤 27

2.2.3麻蝇蛹酚氧化酶的分离纯化步骤 27

2.2.4聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定昆虫酚氧化酶纯度 28

2.2.5昆虫酚氧化酶活力测定方法 30

参考文献 32

第三章 昆虫酚氧化酶抑制动力学研究方法与技术 33

第一节 酶促反应的基础动力学 33

3.1.1米氏方程推导 33

3.1.2米氏方程的意义 34

3.1.3 Km和Vm的求取 35

第二节 环境因素对酶活力的影响 36

3.2.1温度与酶活力 36

3.2.2 p H与酶活力 37

3.2.3底物浓度对酶活力的影响 38

3.2.4金属离子对酶活力的影响 38

3.2.5有机溶剂对酶活力的影响 39

第三节 酶抑制动力学 39

3.3.1可逆与不可逆抑制作用的区分 40

3.3.2竞争性抑制作用 41

3.3.3非竞争性抑制作用 43

3.3.4反竞争性抑制作用 44

参考文献 45

第四章 昆虫酚氧化酶抑制剂结构与活性的关系 46

第一节 构效关系研究概述 46

4.1.1二维定量构效关系方法 46

4.1.2三维定量构效关系方法 49

4.1.3 2D-QSAR、 3D-QSAR与数据库相结合 55

第二节 材料与方法 56

4.2.1供试化合物 56

4.2.2 2D-QSAR法 56

4.2.3 3D-QSAR法 59

第三节 酚氧化酶抑制剂2D-QSAR 60

4.3.1取代基效应对苯甲醛、苯甲酸或苯甲醛缩氨基硫脲及它们的衍生物对酚氧化酶的抑制活性的影响 60

4.3.2取代基效应对苯甲酸及其衍生物和苯甲醛缩氨基硫脲及其衍生物对菜青虫酚氧化酶抑制活性的影响 64

4.3.3取代基效应对苯甲醛及其衍生物和苯甲醛缩氨基硫脲及其衍生物对菜青虫酚氧化酶的抑制活性的影响 65

第四节 酚氧化酶抑制剂3D-QSAR 67

4.4.1 3D-QSAR模型的建立 67

4.4.2 CoMFA模型 71

4.4.3 CoMSIA模型 72

参考文献 73

第二部分 研究论文 77

专题一 昆虫酚氧化酶基本特性研究 77

菜青虫不同虫态及虫龄的多酚氧化酶性质比较 77

甜菜夜蛾多酚氧化酶特性及曲酸等抑制剂抑制作用研究 86

槐尺蠖多酚氧化酶的部分纯化及酶学特征 94

Enzymatic Properties of Phenoloxidase from Pieris rapae （Lipidoptera）Larvae 103

专题二 昆虫酚氧化酶抑制剂活性与抑制动力学研究 113

芹菜素等三种生物源化合物对甜菜夜蛾酚氧化酶的抑制作用 113

几种苯甲酸类化合物对甜菜夜蛾多酚氧化酶活性的影响 120

Inhibitory Effects of Kojic Acid on Phenoloxidase of Diamondback Moth Plutella xylostella 128

Inhibitory Effects of 4-Dodecylresorcinol on the Phenoloxidase of the Diamondback Moth Plutella xylostella （L.）（Lepidoptera Plutel-lidae） 139

Inhibitory Effects of Apigenin on Phenoloxidase of Diamondback Moth，Plutella xylostella （Lepidoptera Plutellidae） 150

栎皮酮对甜菜夜蛾酚氧化酶抑制作用研究 162

铜铁试剂对菜青虫多酚氧化酶的抑制作用 171

5，7，4′-三羟基黄酮等生物源化合物对菜青虫幼虫生长发育的影响 180

Inhibition Kinetics of Cabbage Butterfly （Pieris rapae L.）Larvae Phe-noloxidase Activity by 3-Hydroxy-4-Methoxybenzaldehyde Thiosemic-arbazone 188

Inhibitory Effects of Schiff Analogs of Salicylidene Aniline on Pheno-loxidase from Pieris rapae L.（Lepidoptera： Pieridae） 205

2-羟基-4-甲氧基苯甲醛缩苯胺对菜青虫酚氧化酶的抑制作用 218

Inhibitory Effects of 2-Hydroxybenzaldehyde on the Activity of Phenolo-xidase from Pieris rapae （Lipidoptera） Larvae 230

专题三 昆虫酚氧化酶抑制剂结构与活性关系研究 246

3D-QSAR and Molecular Docking Studies of Benzaldehyde Thiosemica-rbazone， Benzaldehyde， Benzoic Acid， and Their Derivatives as Pheno-loxidase Inhibitors 246

Quantitative Structure-Activity Relationship Studies of Mushroom Tyr-osinase Inhibitors 264

2D-QSAR Studies of Benzaldehyde， Benzoic acid， Benzaldehyde Thiosemica-rbazone， and their Derivatives as Insect Phenoloxidase Inhibitors 281

专题四 昆虫酚氧化酶与害虫免疫及抗药性的关系研究 293

槲皮素对黄粉虫血淋巴酚氧化酶的生理效应 293

Does Phenoloxidase Contributed to the Resistance？ Selection with Butane-Fipronil Enhanced its Activities from Diamondback Moths 303

专题五 昆虫酚氧化酶部分抑制剂的合成研究 315

取代水杨醛席夫碱的合成及其对昆虫酚氧化酶的抑制活性 315

取代苯甲醛缩氨基硫脲的合成及其对昆虫酚氧化酶的抑制活性 321

α-巯基-β-取代苯基丙烯酸的合成及其对昆虫酚氧化酶的抑制活性 327