中药药理研究方法学 第3版PDF电子书下载

第1篇 总论 3

第1章 绪言 3

第1节 中药药理研究方法的发展概况 3

第2节 中药药理研究方法的学术论文与著作 4

第3节 中药药理研究的主要内容 5

第4节 中药药理研究方法的特点 5

一、中药药理研究以中医药理论为指导 5

二、中药药理研究与临床研究相结合 6

三、实验方法是中药药理研究的基本方法 6

四、整体与离体实验相结合的方法 6

五、建立“病”与“证”的动物模型以研究中药的作用 7

第2章 中药新药研制和申报的基本知识 8

第1节 中药新药的概念及分类 8

一、新药的定义 8

二、中药新药的分类 8

三、新药分类的意义 9

第2节 中药新药申报资料及说明 9

一、中药新药申报资料 9

二、中药新药申报资料的具体要求及项目表 11

第3节 中药新药研制开发和申报的程序 15

一、第一阶段——新药立题和临床前的研究 15

二、第二阶段——新药临床试验的申请和审批 16

三、第三阶段——新药的临床试验 16

四、第四阶段——新药生产的申请和审批 17

五、第五阶段——新药监测期 17

第4节 中药新药研制的基本内容和要求 18

一、中药新药研究的特点 18

二、中药新药的命名 18

三、中药材品种、来源 19

四、制剂的生产工艺 19

五、中药新药质量的控制 20

六、稳定性研究 21

七、新药药理学研究的基本技术要求 21

八、中药新药毒理研究的技术要求 22

九、新药临床研究的技术要求 23

第5节 中药新药注册申请的技术评价 23

一、中药新药注册申请技术评价的目的 23

二、中药新药注册申请的技术评价 24

第3章 中药药理研究的基本知识 25

第1节中药药理研究设计的基本要求 25

一、以中医药理论为指导来阐明中药药理 25

二、实验设计要整体试验与离体试验相结合 25

三、试验中药质量的标准化 26

四、注意国家对新药（中药）研究的具体要求 26

第2节 研究设计的基本原则 26

第3节 研究设计和统计 27

一、动物选择 27

二、方法的选择 27

三、指标的选择 27

四、药物的要求 27

五、给药途径与容量 27

六、给药剂量 28

七、给药方式 28

八、对照药的选择 28

九、实验结果的表达和统计分析 28

第4节 常用的设计方法 29

第4章 中药药理研究的实验设计与统计分析方法 31

第1节 中药药理研究的实验设计方法 31

一、平行设计 31

二、交叉设计 31

三、析因设计 33

四、正交设计 33

五、均匀设计 36

第2节 中药药理指标的性质及数据处理 38

一、中药药理指标的性质及分类 38

二、有效数字及数据处理规则 39

三、缺失数据、截尾数据与离群数据的处理 39

四、数据转换 40

第3节 中药药理研究的常用统计方法 41

一、统计分析中的几个基本概念 41

二、质反应资料的统计分析 42

三、量反应资料的统计分析 48

四、统计树状结构与方法选择 62

五、常用统计表 62

第4节 量效关系分析 66

一、量效关系分析基本概念 66

二、量效关系分析方法及实例 66

第5节 重复测量数据分析 68

一、前后资料的实测值、变化值及变化率分析 68

二、多时序资料的动态分析 69

第6节 组方定量设计的多因素分析方法 71

一、权重配方模型 71

二、多元回归模型 74

第5章 常用实验动物的基本知识和方法 79

第1节 实验动物的分级标准 79

一、按遗传学分类 79

二、按微生物学分类 80

第2节常用实验动物的特点、品种、饲养管理、常见疾病 81

一、大鼠 81

二、小鼠 83

三、豚鼠 84

四、家兔 86

五、狗 88

六、家猫 91

七、金黄地鼠和黑线仓鼠 91

八、猕猴 92

九、猪、山羊、绵羊、树鼩 92

十、鹌鹑、家鸡、蟾蜍、青蛙、鱼 93

第3节 实验动物的选择应用 95

一、中枢神经研究的动物选择 95

二、传出神经研究的动物选择 96

三、心血管系统研究的动物选择 97

四、消化系统研究的动物选择 98

五、呼吸系统研究的动物选择 98

六、泌尿系统研究的动物选择 99

七、生殖系统研究的动物选择 99

八、内分泌及免疫学研究的动物选择 100

九、延缓衰老药研究的动物选择 100

十、其他研究中动物的选择 101

第4节 常用实验动物的捉持、固定、给药方法 101

一、小鼠和大鼠 101

二、家兔 102

三、豚鼠 102

四、狗和猫 103

五、青蛙和蟾蜍 103

六、鸽和鹌鹑 103

第5节 采血方法 104

一、小鼠、大鼠 104

二、豚鼠 104

三、家兔 104

四、狗、猫 105

五、鸽、鹌鹑 105

第6节 编号标记方法 105

一、皮毛标记编号 105

二、标签号牌法 106

三、鼠尾标记编号 106

第6章 中药毒性和安全试验方法 107

第1节 概述 107

一、目的和意义 107

二、研究发展 107

三、基本原则 109

第2节 中药急性毒性试验研究方法 109

一、试验目的 109

二、基本要求 110

三、试验方法 111

四、注意事项 116

五、急性毒性实例 117

实例1-6-2-5-1升麻葛根颗粒小鼠灌胃给药最大给药量的测定 117

实例1-6-2-5-2附子生物碱提取物小鼠灌胃给药最大耐受量及最小致死量的测定 118

实例1-6-2-5-3仙茅醇提取物小鼠灌胃给药LD50的测定（Bliss法） 119

第3节 长期毒性试验 121

一、试验目的 121

二、基本要求 121

三、试验方法 122

四、注意事项 126

五、长期毒性试验实例 128

实例1-6-3-5-1石榴健胃散大鼠灌胃给药长期毒性试验 128

第4节 中药一般药理学试验方法 132

一、试验目的 132

二、基本要求 132

三、试验方法 133

四、注意事项 134

五、一般药理学实例 134

实例1-6-4-5-1秦皮总香豆素的一般药理学试验 134

第5节 中药皮肤、黏膜给药毒性试验方法 139

一、皮肤用药毒性试验方法 139

二、眼用制剂毒性试验方法 145

三、鼻腔用制剂毒性试验方法 148

四、直肠、阴道用制剂毒性试验方法 149

五、中药皮肤、黏膜给药毒性试验方法实例 153

实例1-6-5-5-1云南白药巴布膏家兔皮肤刺激试验 153

实例1-6-5-5-2云南白药巴布膏豚鼠皮肤过敏试验 154

第6节 中药注射剂安全性评价试验方法 155

一、概述 155

二、中药注射剂安全性评价试验方法 156

三、中药注射剂安全性试验方法实例 160

实例1-6-6-3-1鱼腥草注射液对家兔的肌肉刺激性试验（肉眼观察和组织病理学检查） 160

实例1-6-6-3-2鱼腥草注射液对家免的血管刺激性试验（肉眼观察和组织病理学观察） 162

实例1-6-6-3-3鱼腥草注射液的溶血试验（体外试管法） 163

实例1-6-6-3-4穿珑宁注射液的豚鼠全身主动过敏试验 165

实例1-6-6-3-5虎杖昔的大鼠被动皮肤过敏性试验（PCA） 167

实例1-6-6-3-6鱼腥草注射液的Beagle犬类过敏试验 168

第7节 中药特殊毒理试验方法 171

一、遗传毒性试验方法 171

二、生殖毒性试验方法 177

三、致癌试验方法 186

四、依赖性试验方法 190

五、中药特殊毒理试验方法实例 192

实例1-6-7-5-1-1虎杖的鼠伤寒沙门菌诱变性试验（Ames试验） 192

实例1-6-7-5-1-2朱砂对小鼠外周血淋巴细胞DNA的影响（碱性单细胞凝胶电泳法） 196

实例1-6-7-5-1-3虎杖对仓鼠肺成纤维细胞的染色体畸变试验 198

实例1-6-7-5-1-4虎杖对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的影响 203

实例1-6-7-5-2-1虎杖对大鼠的致畸敏感期毒性试验 206

实例1-6-7-5-2-2菟丝子复方的小鼠一般生殖毒性试验 210

实例1-6-7-5-2-3六味地黄汤的小鼠围产期毒性试验 215

实例1-6-7-5-3-1六味地黄汤的小鼠致癌试验 216

实例1-6-7-5-4-1复方清风颗粒的大鼠催促戒断试验 218

实例1-6-7-5-4-2复方清风颗粒的大鼠自然戒断试验 220

第7章 中药药物代谢动力学研究方法 222

第1节 中药药物代谢动力学研究概述 222

一、中药药代动力学研究意义 222

二、中药药代动力学研究的主要内容 223

三、与中医药相关理论的药代动力学研究 228

四、中药药代动力学研究面临的困难 229

第2节 中药药物代谢动力学研究方法 229

一、药物浓度法 229

二、生物效应法 234

三、药物浓度法-生物效应法联合研究方法 236

四、药动学相互作用研究方法 237

第3节 中药药物代谢动力学研究方法实例 240

一、药物浓度法 240

实例1-7-3-1-1人参皂昔Rg3在Caco-2细胞上的摄取及代谢研究（LC/MS法） 240

实例1-7-3-1-2野百合碱和Isoline在大鼠肝脏中I相代谢研究（酶活性测定） 242

实例1-7-3-1-3千里光碱在人肝脏中的相代谢研究（酶活性测定） 246

实例1-7-3-1-4犬体内复方丹参滴丸药代动力学研究（LC/MS/MS法） 250

二、药理效应法 253

实例1-7-3-2-1生脉散的小鼠心肌药理效量动力学试验 253

实例1-7-3-2-2连翘的小鼠急性累计死亡率法测定表观药动学参数 255

三、药动学相互作用研究实例 256

实例1-7-3-3-1丹参酮对人肝微粒体CYP1 A2抑制作用 256

第8章 中药药性的药理研究方法 259

第1节 中药药性研究的内容与意义 259

一、四气 259

二、五味 261

三、归经 261

四、升降浮沉 262

五、十八反 十九畏 262

六、双向调节 262

第2节 中药药性药理研究方法 262

一、寒证、热证动物模型 263

二、寒、热药性研究方法 263

三、归经研究方法 263

四、十八反研究方法 264

五、中药药性物质基础的研究方法 264

第3节 中药药性的药理研究方法实例 264

实例1-8-3-1温热药造成“虚热”证大鼠模型 264

实例1-8-3-2寒凉药造成“虚寒”证大鼠模型 266

实例1-8-3-3寒凉药和温热药对热证及寒证患者自主性神经平衡数的影响 267

实例1-8-3-4温热药对大鼠尿儿茶酚胺排出量的影响（荧光分光光度法） 268

实例1-8-3-5寒凉药对大鼠脑内去甲肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺的影响（荧光分光光度法） 269

实例1-8-3-6寒凉药对大鼠尿内17-OHCS排出量的影响（紫外分光光度法） 270

实例1-8-3-7温热药对大鼠血清内促甲状腺激素的影响（荧光分光光度法） 271

实例1-8-3-8 3H-白首乌总昔在小鼠体内的分布与排泄的定量研究（放射性免疫学方法） 272

第9章 中药配伍与禁忌的药理研究方法 274

第1节 中药配伍与禁忌研究的内容与意义 274

一、中药配伍研究 274

二、中药禁忌研究 274

第2节 中药配伍与禁忌的研究方法 274

一、中药配伍研究方法 274

二、中药禁忌研究方法 277

第3节 中药配伍与禁忌药理研究方法实例 277

实例1-9-3-1人参、藜芦配伍对大鼠肝P450 CYP3A和CYP2E1酶活性的调控作用研究（配伍禁忌研究法） 277

实例1-9-3-2正柴胡饮组方配伍对小鼠流感病毒慢性肺炎的作用研究（单味分析法I、二二相伍法、撤药分析法、累加组合法） 281

实例1-9-3-3黄芪桂枝五物汤组方配伍对佐剂性关节炎大鼠的抗炎作用研究法（药对配伍） 284

实例1-9-3-4六味地黄汤组方配伍对正常大鼠的血脂、免疫球蛋白IgM的影响研究（拆方法） 286

实例1-9-3-5葛根芩连汤配伍对盲肠分流术致实验性菌痢药效比较研究（正交设计法） 287

实例1-9-3-6大黄配芒硝对小鼠泻下协同作用的研究（均匀设计法） 289

实例1-9-3-7丹参、三七配比对犬急性心肌缺血干预作用的多目标优化研究（ED-NM-MO三联法） 292

第10章 中药炮制的药理研究方法 301

第1节 中药炮制的药理研究内容与意义 301

一、炮制减毒 301

二、炮制增效 301

三、改变药性 301

第2节 中药炮制的药理研究方法 302

一、毒性试验 302

二、药效试验 302

第3节 中药炮制的药理研究方法实例 302

实例1-10-3-1生川乌和制川乌的急性毒性比较研究（LD50的Bliss法） 302

实例1-10-3-2生附子和炮附子对戊巴比妥钠致急性心衰大鼠左心室最大上升速率的影响 303

实例1-10-3-3生大黄与大黄碳对小鼠的小肠推进作用及凝血作用（墨汁法、毛细管法） 304

第2篇 中药功效的中药药理研究方法 309

第1章 解表药 309

第1节 解表药的主要药理作用 309

第2节 解表药药理研究方法 310

一、发汗方法 310

二、解热方法 310

三、镇静方法 310

四、镇痛方法 310

五、抗炎方法 310

六、免疫功能测试法 310

七、抗菌、抗病毒方法 310

八、对“表证”动物模型的影响 311

九、其他 311

第3节 解表药药理研究方法实例 311

一、发汗 311

实例2-1-3-1-1麻黄汤对正常大鼠足跖汗液分泌的影响（着色法） 311

实例2-1-3-1-2麻黄、麻黄配桂枝对大鼠足跖部汗液分泌的影响（组织形态观察法） 312

实例2-1-3-1-3麻黄汤、桂枝汤对大鼠足跖部汗液分泌的影响（定量测定法） 313

实例2-1-3-1-4麻黄汤对小鼠汗腺分泌的影响（汗腺导管内径观察法） 314

二、解热 315

实例2-1-3-2-1柴胡对内毒素致家兔发热体温的影响 315

实例2-1-3-2-2桑菊饮对内生致热原性发热家兔脑脊液中cAMP含量的影响 316

三、镇痛抗炎 317

实例2-1-3-3-1白芷对大鼠头痛模型的影响 317

四、抗病毒 318

实例2-1-3-4-1桂枝汤对流感病毒感染小鼠肺重量测定法 318

实例2-1-3-4-2正柴胡饮对流感病毒增殖的抑制作用 320

实例2-1-3-4-3正柴胡饮对流感病毒感染小鼠的死亡保护作用 321

第2章 清热药 323

第1节 清热药主要药理作用 323

第2节 清热药药理研究方法 324

一、抗病原体试验方法 324

二、抗细菌毒素实验方法 328

三、解热试验 329

四、抗炎试验 330

五、免疫学试验 331

第3节 清热药药理研究方法实例 332

一、抗菌 332

实例2-2-3-1-1黄连素体外抗菌作用（琼脂稀释法） 332

实例2-2-3-1-2黄连止泻方体外抗菌作用（微孔二倍稀释法） 333

实例2-2-3-1-3青蒿琥酯体外与舒氨西林合用对大肠埃希菌的协同抗菌作用（棋盘式微孔稀释法） 335

实例2-2-3-1-4青蒿珑酯与氨苄西林体外合用对大肠埃希菌生长的影响（动态生长曲线法） 336

实例2-2-3-1-5黄连解毒汤及其组成体外对白色念珠菌生物膜的影响（MTT法） 337

实例2-2-3-1-6青蒿素联合氨苄西林对大肠埃希菌致小鼠死亡的保护作用（体内抗菌试验法） 339

实例2-2-3-1-7金银花复方对大肠埃希菌腹膜炎家兔腹腔液、血液细菌培养及炎症部位病理形态的影响（体内抗菌、抗炎试验法） 340

二、抗病毒 342

实例2-2-3-2-1金银花在原代人胚肾细胞培养中对副流感病毒的作用（细胞培养法） 342

实例2-2-3-2-2朱砂七总蒽醌提取物在鸡胚内的抗流感病毒作用（鸡胚法） 344

实例2-2-3-2-3獐牙菜复方对鸭乙肝病毒模型的血清DHBV DNA、 DHBsAg、肝脏酶学和组织病理学的影响（体内试验法） 347

实例2-2-3-2-4黄芩、黄连等有效部位复方对轮状病毒致乳鼠腹泻和粪便染毒的影响（体内试验法） 348

实例2-2-3-2-5蒲公英滴眼剂对实验性家兔单纯疱疹病毒性角膜炎角膜病变和病毒分离率的影响（体内试验法） 350

三、抗细菌毒素 352

实例2-2-3-3-1板蓝根不同溶剂萃取物体外抗内毒素作用（鲎试剂动态浊度法） 352

实例2-2-3-3-2青蒿素对内毒素攻击脓毒症模型小鼠生存率的影响（体内抗内毒素试验） 353

实例2-2-3-3-3凉膈散对内毒素致急性肺损伤大鼠血氧分压、肺通透指数及肺组织病理学的影响（抗内毒素急性肺损伤试验） 354

实例2-2-3-3-4青蒿素联合舒氨西林对盲肠结扎穿孔术脓毒症大鼠的保护作用（大鼠盲肠结扎穿孔术法） 355

四、抗衣原体和寄生虫 357

实例2-2-3-4-1红藤清热合剂对肺炎衣原体感染大鼠炎症因子IL-1β3、IL-6、TNF-α表达的影响（ELISA法） 357

实例2-2-3-4-2复方黄柏苦参对小鼠阴道毛滴虫体存活率的影响（体内抗毛滴虫试验） 358

实例2-2-3-4-3复方青蒿苦参汤体外抗弓形虫和对弓形虫感染小鼠发病及存活时间的影响（体内、外抗弓形虫试验） 360

五、解热 361

实例2-2-3-5-1穿黄解毒方对干酵母致大鼠发热的解热作用（干酵母大鼠致热法） 361

六、抗炎 362

实例2-2-3-6-1穿心莲甲、乙、丙、丁素对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进的影响（腹腔染料渗出法） 362

实例2-2-3-6-2穿琥宁对二甲苯所致小鼠皮肤毛细血管通透性亢进的影响（皮肤染料渗出法） 363

实例2-2-3-6-3黄连止泻方对TNBS致大鼠溃疡性结肠炎一般指标和结肠COX-2、TNF-α、Galectin-3表达的影响（酶联免疫吸附法，免疫组化法） 364

实例2-2-3-6-4青蒿琥酯对热灭活大肠埃希菌致脓毒症小鼠血清TNF-α的影响（ELISA法） 366

实例2-2-3-6-5黄连解毒汤含药血清对RAW264. 7细胞Toll样受体3、4型及其下游信号转导通路的影响（定量PCR法） 367

七、对免疫功能的影响 371

实例2-2-3-7-1大青叶、蒲公英和鱼腥草对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响（腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞法） 371

实例2-2-3-7-2清营合剂对流感病毒（APR8H1N1）感染BALBc小鼠肺组织不同时相Th1/Th2漂移的影响（SABC免疫组织化学法） 372

实例2-2-3-7-3凉血清营颗粒对2，4，6-三硝基氯苯所致小鼠耳迟发型超敏反应的影响（2，4，6-三硝基氯苯致敏法） 374

实例2-2-3-7-4凉血清营颗粒对大鼠被动皮肤过敏反应（PCA）的影响（天花粉蛋白致敏法） 375

实例2-2-3-7-5几种中药抗炎有效成分对人多形核白细胞白三烯B4生物合成的影响（HPLC法） 376

第3章 泻下药 379

第1节 泻下药主要药理作用 379

第2节 泻下药药理研究方法 379

一、泻下实验法 380

二、逐水实验法 381

三、对急腹症防治作用实验研究 381

第3节 泻下药药理研究方法实例 382

一、泻下 382

实例2-3-3-1-1复方大黄首乌汤对便秘小鼠排便时间和数量的影响（地芬诺酯肠燥便秘模型） 382

实例2-3-3-1-2生大黄、制大黄以及大黄、芒硝配伍对小鼠小肠运动的影响（小肠墨汁推进距离） 383

实例2-3-3-1-3大承气汤对大鼠肠动力的影响（大鼠大肠墨汁推进距离） 384

实例2-3-3-1-4大黄对便秘模型大鼠胃动素、乙酰胆碱酯酶的影响（放射性核素、试剂盒法） 385

实例2-3-3-1-5大黄对小鼠不同肠段水分吸收的影响（称重法） 387

实例2-3-3-1-6调胃承气汤对家兔在体回肠活动的影响（悬吊法） 387

实例2-3-3-1-7芫花、芒硝、郁李仁对家兔肠道作用机制的分析 388

二、逐水 389

实例2-3-3-2-1大陷胸汤对家兔急性肾衰竭的治疗作用（升汞中毒法） 389

实例2-3-3-2-2复方大黄茯苓对慢性肾衰竭模型大鼠的防治作用（腺嘌呤法） 391

三、防治急腹症 392

实例2-3-3-3-1大承气汤对小鼠套叠性肠梗阻的还纳作用的影响 392

实例2-3-3-3-2大承气汤对大鼠缺血性肠梗阻的治疗作用 393

实例2-3-3-3-3大承气汤对大鼠细菌性肠粘连的抑制作用 393

实例2-3-3-3-4大承气汤对肠梗阻大鼠离体结肠平滑肌45 Ca内流的影响 394

实例2-3-3-3-5大承气汤对肠梗阻家兔血管活性肠肽的影响 396

实例2-3-3-3-6大黄对大鼠急性胰腺炎的治疗作用（化学刺激法） 398

实例2-3-3-3-7大承气汤对大鼠不完全性梗阻小肠黏膜二胺氧化酶（DAO ）活性的测定（分光光度法） 400

第4章 祛风湿药 403

第1节 祛风湿药主要药理作用 403

第2节 祛风湿药药理研究方法 403

一、抗炎 404

二、镇痛 408

第3节 祛风湿药药理研究方法实例 409

一、抗炎 409

实例2-4-3-1-1臭冷杉精油对组胺致大鼠皮肤毛细血管通透性的影响（伊文思蓝法） 409

实例2-4-3-1-2青藤碱对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的影响（后肢足跖容积法测量法） 410

实例2-4-3-1-3臭冷杉精油对大鼠胸腔注入角叉菜胶胸腔渗出液量及白细胞游走的影响（白细胞计数法） 411

实例2-4-3-1-4豨莶草和豨桐丸对大鼠棉球肉芽肿的影响（肉芽肿干重法） 412

实例2-4-3-1-5雷公藤多昔片对佐剂性关节炎大鼠继发症状及关节病理变化影响（量筒容积和病理切片法） 412

实例2-4-3-1-6雷公藤甲素对Ⅱ型胶原诱导DBA/1小鼠关节炎发病率、肿胀程度及血清抗Ⅱ型胶原抗体的影响（关节肿胀5级评分法、酶标仪检测法） 414

实例2-4-3-1-7痛风饮对急性痛风性关节炎大鼠白细胞、中性粒细胞、尿酸水平的影响（白细胞计数、瑞士染色、尿酸测定试剂盒法） 415

实例2-4-3-1-8青藤碱防止补体激活引起的大鼠白细胞聚集（血小板聚集仪比浊测定法） 417

实例2-4-3-1-9杉木干馏液对角叉菜胶致大鼠足肿胀炎性组织中前列腺素E2的影响（角叉菜胶致炎、分光光度测定法） 419

实例2-4-3-1-10白藜芦醇对体外培养的大鼠腹腔巨噬细胞环氧酶活性的抑制作用（放免试剂盒法） 419

实例2-4-3-1-11京尼平昔酸对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞增殖、凋亡及Bcl-2/Bax基因表达的影响（荧光显微镜、流式细胞仪，PCR仪法） 421

实例2-4-3-1-12木瓜昔对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞Gs、Gi mRNA基因表达的影响（RT-PCR法） 424

二、镇痛 426

实例2-4-3-2-1钻山风对小鼠的镇痛作用（热板法） 426

实例2-4-3-2-2钻山风对小鼠的镇痛作用（扭体法） 427

实例2-4-3-2-3青藤碱对小鼠的镇痛作用（电刺激法） 428

实例2-4-3-2-4两面针结晶-8的镇痛作用（大鼠辐射热刺激法） 429

实例2-4-3-2-5两面针结晶-8的镇痛作用（K+皮下透入致痛法） 430

实例2-4-3-2-6复方秦艽汤对大鼠三叉神经痛样反应的抑制作用（三叉神经脊束核注射青霉素G钾致痛模型） 431

第5章 利水渗湿药 433

第1节 利水渗湿药的主要药理作用 433

第2节 利水渗湿药药理研究方法 433

一、利尿作用实验 433

二、排石作用实验法 435

三、肾脏疾病模型 436

四、其他疾病模型 437

第3节 利水渗湿药药理研究方法实例 438

一、利尿作用 438

实例2-5-3-1-1五苓散对集尿装置小鼠尿量的影响（滤纸称重法） 438

实例2-5-3-1-2五苓散对大鼠的尿量的影响（代谢笼法） 439

实例2-5-3-1-3金钱草对家兔尿量的影响（导尿管法） 440

实例2-5-3-1-4通草对大鼠尿量及尿中钠、钾离子浓度的影响（火焰光度法） 441

二、排石作用 442

实例2-5-3-2-1复方金钱草对大鼠肾脏草酸钙结石的影响 442

实例2-5-3-2-2茵陈蒿汤对盐酸林可霉素致豚鼠实验性胆结石及血清胆红素的影响（血清胆红素化分析试剂盒法） 443

实例2-5-3-2-3八正散对家兔输尿管动作电位的影响（生物电记录法） 444

三、肾脏疾病模型 445

实例2-5-3-3-1复方黄芪车前子对Masugi肾炎模型大鼠尿量及清蛋白的影响（生化指标检测） 445

实例2-5-3-3-2黄芪茯苓汤对阳离子牛血清蛋白致血清病肾炎模型家兔肾小球肿胀及细胞增生的影响（肾脏病理分析） 446

实例2-5-3-3-3复方茅根汤对葡萄球菌肠毒素诱发的IgA肾病大鼠的尿蛋白及肾功能的影响（全自动生化仪测定法） 447

实例2-5-3-3-4石韦大黄汤对5/6肾脏切除法致慢性肾衰竭大鼠肾脏组织的影响 448

四、其他疾病模型 449

实例2-5-3-4-1茵陈术附汤对灌胃大黄+ANIT致阴黄证模型大鼠肝细胞凋亡及Bel-2和Bax表达的影响（免疫组化法） 449

实例2-5-3-4-2菊苣提取物对酵母浸膏粉食饵鹌鹑血尿酸、黄嘌呤氧化酶活性及粪尿水分的影响（全自动生化检测） 450

实例2-5-3-4-3泽泻汤对实验性内淋巴积水豚鼠耳蜗内电位的影响（电位测定法） 451

第6章 温里药 454

第1节 温里药主要药理作用 454

第2节 温里药药理研究方法 454

一、“虚寒证”动物模型 455

二、能量代谢研究方法 455

三、心血管系统实验方法 455

四、消化系统实验方法 458

五、交感神经系统实验方法 458

六、其他 458

第3节 温里药药理研究方法实例 458

一、能量代谢 458

实例2-6-3-1-1附子干姜对大鼠尾部和耳部温度的影响（红外热像法） 458

实例2-6-3-1-2高良姜对大鼠肝脏和骨骼肌珑珀酸脱氢酶活性的作用（试剂盒法） 460

实例2-6-3-1-3四逆汤对心衰大鼠心肌线粒体Na+， K+-ATP酶活性的影响（试剂盒比色法） 461

二、心脏、血管 463

实例2-6-3-2-1四逆汤对失血性休克大鼠左心室收缩压的影响（插管法） 463

实例2-6-3-2-2附子对离体心衰蛙心收缩振幅的影响（斯氏法） 464

实例2-6-3-2-3四逆汤对高钾和去氧肾上腺素收缩主动脉环效应的影响（离体动脉环法） 466

实例2-6-3-2-4桂皮醛对人体表微循环变化的影响（激光多普勒法） 468

实例2-6-3-2-5干姜对体外缺糖缺氧培养大鼠心肌细胞乳酸脱氢酶的影响（离体心肌细胞培养法） 469

三、血流动力学 470

实例2-6-3-3-1附子对清醒犬心脏血流动力学的影响（植入芯片法） 470

四、受体 472

实例2-6-3-4-1去甲乌药碱对大鼠大脑皮层及输精管α受体的影响（放射性核素法） 472

实例2-6-3-4-2四逆汤调节大鼠缺血心肌β受体表达的研究（RT-PCR法） 475

第7章 理气药 478

第1节 理气药主要药理作用 478

第2节 理气药药理研究方法 479

一、胃肠功能实验方法 479

二、胃病模型 480

三、胆汁、胰液分泌与排出实验方法 481

四、气管平滑肌实验及平喘实验方法 482

五、子宫活动及相关实验方法 482

六、神经精神活动实验方法 482

七、血压及心脏研究方法 482

第3节 理气药药理研究方法实例 482

一、胃肠功能 482

实例2-7-3-1-1枳实对大鼠离体小肠平滑肌纵行肌条运动的影响（离体肌条实验法） 482

实例2-7-3-1-2白术羟内酯对豚鼠动脉灌注离体肠段流体推进频率及幅度的影响（离体肠道液体推进实验法） 485

实例2-7-3-1-3木香、枳壳对家兔在体肠运动的影响（水囊法） 486

实例2-7-3-1-4乌药对家兔体表胃电的影响（体表胃电图描记法） 487

实例2-7-3-1-5舒肝丸对小鼠胃排空和小肠推进运动的影响（半固体排空法） 488

实例2-7-3-1-6陈皮复方对大鼠胃液分泌的影响（幽门结扎法） 489

实例2-7-3-1-7娑罗子对胃瘘大鼠胃液分泌的影响（胃瘘法） 492

实例2-7-3-1-8娑罗子对组胺、胃泌素致大鼠胃酸分泌增加的影响（胃内灌注法） 493

实例2-7-3-1-9蜘蛛香对慢性应激大鼠腹部回缩反应阈值（AWR）的影响（球囊扩张法） 494

二、胃病模型 495

实例2-7-3-2-1橘皮复方对应激型胃溃疡大鼠溃疡指数的影响（应激造模法） 495

实例2-7-3-2-2香砂和胃丸对幽门结扎型胃溃疡大鼠溃疡发生率和溃疡程度的影响（幽门结扎造模法） 497

实例2-7-3-2-3越鞠保和丸对利血平溃疡模型小鼠溃疡指数的影响（药物造模法） 498

实例2-7-3-2-4橘皮复方水煎液对醋酸型胃溃疡大鼠溃疡指数的影响（醋酸造模法） 499

实例2-7-3-2-5香附复方对慢性胃炎大鼠胃窦黏膜形态的影响（去氧胆酸-乙醇造模法） 499

实例2-7-3-2-6香附复方对幽门弹簧扩张复合高热高盐饮食所致萎缩性胃炎模型大鼠癌前病变早期细胞凋亡的影响（复合造模法） 501

实例2-7-3-2-7柴胡半夏复方对反流性食管炎模型大鼠胃肠激素的影响（幽门半结扎合并贲门肌切开术法） 501

三、胆汁分泌及病理模型 503

实例2-7-3-3-1青皮、香附对大鼠胆汁分泌的影响（胆汁引流法） 503

实例2-7-3-3-2青皮复方对豚鼠胆汁成分的影响 503

实例2-7-3-3-3青皮复方对家兔胆总管生物电的影响（生物电法） 506

实例2-7-3-3-4枳壳复方对犬胆囊运动及胆道括约肌紧张性的影响（直接测压法） 507

实例2-7-3-3-5木香、枳壳复方对家兔胆囊结石的溶解作用 510

四、子宫活动及病理模型 511

实例2-7-3-4-1女金丸对大鼠离体子宫活动的影响 511

实例2-7-3-4-2香附对大鼠在体子宫活动的影响 512

实例2-7-3-4-3柴胡复方对大鼠子宫内膜异位病灶体积的影响 513

第8章 止血药 516

第1节 止血药主要药理作用 516

第2节 止血药药理研究方法 516

一、出血时间测定方法 517

二、凝血时间测定方法 517

三、凝血因子活力或含量测定方法 517

四、血管收缩作用的测定方法 518

五、血小板黏附性测定方法 518

六、血小板聚集性测定方法 518

第3节 止血药药理研究方法实例 518

一、出血时间 518

实例2-8-3-1-1荫风轮总昔对小鼠出血时间的影响（断尾法） 518

实例2-8-3-1-2依地红、云南白药对犬股动脉创伤止血时间比较（动脉切口止血法） 519

实例2-8-3-1-3云南白药对兔肝创面出血的影响（肝脏切口止血法） 519

二、凝血时间 520

实例2-8-3-2-1三七对家兔凝血时间的影响（试管法） 520

实例2-8-3-2-2大蓟对小鼠凝血时间的影响（玻片法） 521

实例2-8-3-2-3白芨对小鼠凝血时间的影响（毛细玻管法） 522

三、凝血因子 522

实例2-8-3-3-1三七对家兔血浆复钙时间的影响 522

实例2-8-3-3-2三七对家兔凝血酶原时间的影响 523

实例2-8-3-3-3血余炭对大鼠白陶土部分凝血活酶时间的影响 524

实例2-8-3-3-4卷柏炭对大鼠部分凝血因子（PT、APTT）的影响（血凝仪法） 525

四、血管收缩 527

实例2-8-3-4-1断血流总昔对离体兔耳血管灌流量的影响 527

实例2-8-3-4-2断血流总昔对离体家兔动脉条的作用 528

第9章 活血化瘀药 530

第1节 活血化瘀药主要药理作用 530

第2节 活血化瘀药药理研究方法 531

一、器官血流和血流动力学 531

二、微循环 534

三、血液流变性 537

四、血栓形成 538

五、血小板功能 539

六、血管壁及内皮细胞 542

七、纤溶 544

八、调血脂及抗动脉粥样硬化 544

九、骨质及结缔组织 547

第3节 活血化瘀药药理研究方法实例 548

一、心肌缺血、脑缺血模型及器官血流和血流动力学 548

实例2-9-3-1-1三七茎叶总皂昔对冠脉结扎所致犬急性心肌缺血模型心肌血流量的影响（超声多普勒血流仪测定） 548

实例2-9-3-1-2双参宁心胶囊对心导管介入冠状动脉栓塞小型猪心肌缺血范围的影响（N-BT染色法） 549

实例2-9-3-1-3丹参复方对冠脉结扎致犬急性心肌缺血模型心外膜心电图的影响（心外膜心电图） 550

实例2-9-3-1-4双参通冠方对急性心肌缺血再灌注大鼠模型核因子-κB信号途径的影响（免疫组化法） 552

实例2-9-3-1-5阿魏酸钠对大鼠离体心脏缺血再灌注所致心律失常的影响（心电图描记） 553

实例2-9-3-1-6延胡索对脑神经垂体素致豚鼠急性心肌缺血心电图的影响（心电图） 556

实例2-9-3-1-7丹参、川芎和复方丹参对离体豚鼠心脏冠脉流量的影响（Langendorff法） 557

实例2-9-3-1-8赤芍总昔注射液对线拴法致局灶性脑缺血大鼠脑血流量的影响（激光多普勒方法） 558

实例2-9-3-1-9桃仁复方口服液对栓塞法致脑梗死家兔的脑血流图变化（脑阻抗血流图仪分析） 560

实例2-9-3-1-10八角茴香提取物对线栓法所致大鼠局灶性脑缺血再灌注模型梗死面积的影响（红四氮唑染色法） 561

实例2-9-3-1-11丹酚酸B对大鼠线栓法局灶性脑缺血再灌注线粒体呼吸功能的影响（氧代谢测定法） 562

实例2-9-3-1-12复方水蛭对开颅线吊法阻断大脑中动脉局灶性脑缺血再灌损伤大鼠脑含水量和缺血面积的影响（图像定量分析系统） 564

实例2-9-3-1-13肾通注射液对药物引起急性肾衰竭家兔肾血流量的影响（彩色多普勒血液显像仪） 566

实例2-9-3-1-14川芎嗪对离体主动脉平滑肌的影响（机械偶联记录法） 567

二、微循环及微循环障碍 569

实例2-9-3-2-1丹参注射液对家兔眼球结膜微循环的影响（显微镜观察法） 569

实例2-9-3-2-2血府逐瘀汤对小鼠耳郭微循环的影响（显微镜观察法） 570

实例2-9-3-2-3久强脑立清对金黄地鼠颊囊微循环的影响（微循环测量仪） 572

实例2-9-3-2-4血府逐瘀汤对大鼠肠系膜微循环的影响（显微电视录像装置观察） 573

实例2-9-3-2-5丹参、川芎嗪注射液对高分子右旋糖酐致小鼠脑微循环障碍的影响（激光多普勒仪法） 574

实例2-9-3-2-6川芎嗪对麻醉牛蛙肺微循环的影响（实体显微装置录像系统） 575

三、血液流变性 576

实例2-9-3-3-1桃核承气汤对去甲肾上腺素、牛血清蛋白诱发血瘀证大鼠模型血液流变性的影响（全自动血液流变检测仪） 576

实例2-9-3-3-2丹参及二参水煎液对老年大鼠红细胞变形能力的影响（负压式核孔滤膜RBC变形能力测定仪） 577

四、血栓形成 578

实例2-9-3-4-1当归抗大鼠实验性动-静脉旁路血栓形成的作用（丝线称重法） 578

实例2-9-3-4-2丹参素对大鼠在体血栓形成的影响（颈动脉温度测定法） 579

实例2-9-3-4-3水蛭素对化学损伤性致冠脉血栓大鼠心肌伊文思蓝含量的影响（分光光度法） 580

实例2-9-3-4-4川芎红花对兔脑粉——高分子葡聚糖造成脑梗死模型大鼠血液黏度的作用（黏度计测定法） 581

实例2-9-3-4-5抑制体外血栓形成的作用（血栓称重法） 583

五、血小板功能 584

实例2-9-3-5-1莪术对兔血小板黏附性的影响（血小板黏附性测定仪） 584

实例2-9-3-5-2水蛭提取物对家兔血小板聚集的影响（比浊法） 585

实例2-9-3-5-3阿魏酸钠对兔血小板TXB2、PGE2和PGF2α生成的影响（放射薄层和放射自显影方法） 587

实例2-9-3-5-4川芎嗪对家兔血小板钙调蛋白含量的影响（磷酸二酯酶偶联定磷法测定） 588

实例2-9-3-5-5丹参和复方丹参对家兔血小板第3因子的影响（血液凝固时间测定法） 591

六、血管壁及内皮细胞 592

实例2-9-3-6-1丹参对人脐静脉内皮细胞及酸性磷酸酶的影响（酶法测定） 592

实例2-9-3-6-2补阳还五汤对脐静脉灌流血管壁释放vW因子的影响（酶联免疫吸附试验测定） 594

实例2-9-3-6-3山楂叶提取物对人脐静脉内皮细胞缺氧复氧损伤中性粒细胞黏附的影响（酶标仪测定） 595

七、纤溶 597

实例2-9-3-7-1丹酚酸B对脑缺血再灌注小鼠内皮细胞t-PA和PAI-1的影响（酶联免疫吸附法） 597

八、调血脂及抗动脉粥样硬化 598

实例2-9-3-8-1血府逐瘀汤对高脂饲料喂养家兔动脉粥样硬化模型的影响（显微镜观测病理染色切片） 598

实例2-9-3-8-2丹皮酚对高脂诱导鹌鹑动脉粥样硬化模型血脂和主动脉斑块面积的影响（酶法测定血脂含量） 599

实例2-9-3-8-3复方丹参对高脂饲料喂养大鼠血脂的影响（全自动生化分析仪测血脂法） 600

实例2-9-3-8-4通心络胶囊对高脂饲养致载脂蛋白基因敲除小鼠冠状动脉粥样血管病变的影响（组织切片法） 601

九、骨质及结缔组织 603

实例2-9-3-9-1丹参对外伤大鼠骨折的不脱钙骨的骨切片的成骨细胞计数及骨形态计量学影响（四环素染色法） 603

实例2-9-3-9-2 丹酚酸A对大鼠肝星状细胞增殖和胶原生成的影响（3H掺入法） 605

实例2-9-3-9-3灯盏花素对四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型肝组织羟脯氨酸的影响（酶标仪测定） 607

实例2-9-3-9-4三七总皂昔对博来霉素气管内注射制备肺纤维化大鼠模型肺纤维化的影响（病理组织染色切片显微观察） 608

第10章 止咳、化痰、平喘药 610

第1节 止咳、化痰、平喘药的主要药理作用 610

第2节 止咳、化痰、平喘药药理研究方法 610

一、止咳试验方法 611

二、化痰试验方法 611

三、平喘试验方法 611

四、慢性支气管炎、肺气肿的药效学模型 612

第3节 止咳、化痰、平喘药药理研究方法实例 613

一、止咳 613

实例2-10-3-1-1清金止嗽化痰丸对小鼠的止咳作用（氨刺激引咳法） 613

实例2-10-3-1-2半夏对豚鼠的止咳作用（枸橼酸喷雾刺激引咳法） 613

实例2-10-3-1-3矮地茶（紫金牛）对猫的止咳作用（电刺激引咳法） 614

实例2-10-3-1-4浙贝母碱对豚鼠的止咳作用（机械刺激引咳法） 615

二、化痰 616

实例2-10-3-2-1桔梗对小鼠的化痰作用（气管段酚红法） 616

实例2-10-3-2-2竹沥和桔梗对大鼠排痰量的影响（毛细玻管法） 617

实例2-10-3-2-3竹沥对家兔离体气管纤毛黏液流动的影响 617

实例2-10-3-2-4祛痰灵口服液对鸽气管纤毛运动的影响 619

三、平喘 620

实例2-10-3-3-1止喘灵口服液对豚鼠离体气管平滑肌的影响（气管容积法） 620

实例2-10-3-3-2麻黄对豚鼠离体气管平滑肌的影响（气管螺旋条法） 621

实例2-10-3-3-3小青龙汤的豚鼠平喘作用（喷雾致喘法） 622

实例2-10-3-3-4小青龙汤对豚鼠支气管的作用（肺溢流法） 623

实例2-10-3-3-5小青龙合剂对支气管哮喘大鼠的平喘作用 625

实例2-10-3-3-6银杏对卵蛋白致敏豚鼠肺支气管灌流的影响 626

实例2-10-3-3-7银杏甲素对大鼠颅骨膜肥大细胞脱颗粒的影响 627

四、慢性支气管炎、肺气肿试验法 628

实例2-10-3-4-1桑桔饮对二氧化硫（SO2）致大鼠慢性气管炎模型排痰量的影响 628

实例2-10-3-4-2桂龙咳喘宁胶囊对烟薰致大鼠慢性支气管炎模型的作用 629

实例2-10-3-4-3止咳橘红口服液对脂多糖致大鼠慢性支气管炎模型的作用 631

实例2-10-3-4-4桂龙咳喘宁对烟薰加木瓜蛋白酶致大鼠肺气肿模型的作用 632

第11章 安神药和平肝息风药 634

第1节 安神药和平肝息风药的主要药理作用 634

第2节 安神药和平肝息风药药理研究方法 635

一、镇静试验方法 635

二、催眠试验方法 636

三、抗惊厥及抗癫痫试验 638

四、抗抑郁症及抗焦虑试验 643

五、降压试验 645

第3节 安神药和平肝息风药药理研究方法实例 648

一、镇静试验 648

实例2-11-3-1-1复方珍珠母胶囊对小鼠自发活动的影响（自发活动频率法） 648

实例2-11-3-1-2酸枣仁水煎液对小鼠自发活动的影响（走动时间和举双前肢法） 649

二、催眠试验 649

实例2-11-3-2-1复方酸枣仁对戊巴比妥钠阈剂量小鼠睡眠时间的影响 649

实例2-11-3-2-2天麻水煎液对戊巴比妥钠阈下催眠剂量小鼠入睡个数的影响 650

三、抗惊厥、抗癫痫 651

实例2-11-3-3-1定痫灵对小鼠戊四氮惊厥的作用（潜伏期、惊厥率、分级、持续时间） 651

实例2-11-3-3-2加锡果宁抗谷氨酸钠、硫代氨基脲致小鼠惊厥（惊厥数、死亡率） 652

实例2-11-3-3-3复方止癫胶囊抗小鼠脑室内注射谷氨酸钠惊厥（抗奔跑率） 653

实例2-11-3-3-4安痫宁抗青霉素致大鼠癫痫性发作潜伏期、惊厥百分率、发作程度的影响（Racine六级标准） 654

实例2-11-3-3-5治痫灵抗海人酸致大鼠癫痫脑电图和癫痫行为的影响（湿狗样甩动次数） 655

实例2-11-3-3-6加锡果宁抗大鼠、小鼠最大电休克作用（惊厥率） 656

实例2-11-3-3-7胡椒碱抗大鼠听源性惊厥发作（惊厥率） 658

实例2-11-3-3-8息风化痰药抗青霉素致大鼠慢性癫痫脑电及脑内谷氨酸含量的影响（脑电图、高效液相） 659

实例2-11-3-3-9天麻复方对大鼠癫痫持续时间的影响（小发作癫痫） 661

实例2-11-3-3-10加锡果宁加抗惊厥药对小鼠脑内多巴胺、5-羟色胺及其代谢物含量的影响（高效液相法） 662

实例2-11-3-3-11香草醛和洋川芎内脂A对大鼠培养脑切片上谷氨酸递质释放的影响 664

四、抗抑郁症及抗焦虑试验 666

实例2-11-3-4-1天麻对行为绝望小鼠的影响（小鼠悬尾实验及强迫游泳实验） 666

实例2-11-3-4-2调肝方药对慢性不可预知性应激小鼠糖水偏好的影响 667

实例2-11-3-4-3解虑安神汤对小鼠行为学的影响（小鼠爬梯实验） 669

实例2-11-3-4-4解虑安神汤对小鼠行为学的影响（小鼠高架十字迷宫实验） 670

五、降血压试验 671

实例2-11-3-5-1天麻钩藤对大鼠血压的影响（直接测定法） 671

实例2-11-3-5-2异钩藤碱对清醒大鼠血压的影响（直接测压法） 672

实例2-11-3-5-3复方天麻对大鼠的降压作用（尾动脉间接测压法） 674

实例2-11-3-5-4天麻钩藤对犬的条件反射及血压的影响（颈动脉皮鞘法） 676

实例2-11-3-5-5钩藤碱对高血压大鼠的降压作用（遥测法） 678

实例2-11-3-5-6钩藤碱对冠状动脉和脑基底动脉的舒张作用（血管环张力测量法） 680

实例2-11-3-5-7钩藤碱对家兔主动脉条收缩反应的影响（量效曲线法） 682

实例2-11-3-5-8钩藤水煎醇沉液对大鼠实验性高血压的影响（内分泌型） 688

实例2-11-3-5-9钩藤水煎醇沉液对大鼠急性实验性肾性高血压的影响（急性肾动脉狭窄型） 689

实例2-11-3-5-10钩藤总碱对实验性肾性高血压大鼠血压的影响（两肾一夹） 690

实例2-11-3-5-11钩藤碱麻醉犬降低血压机制的分析 691

第12章 补益药 693

第1节 补益药的主要药理作用 693

第2节 补益药药理研究方法 694

一、免疫功能研究方法 694

二、抗应激作用研究方法 700

三、内分泌腺系统研究方法 701

四、物质代谢及糖尿病研究方法 704

五、肝炎、脂肪肝、肝纤维化及抗肝损伤研究方法 711

六、胃肠疾病模型及消化系统研究方法 715

七、抗心律失常作用研究方法 717

八、学习记忆障碍模型、中枢神经系统活动及神经递质研究方法 722

第3节 补益药药理研究方法实例 725

一、免疫功能研究实例 725

实例2-12-3-1-1中药复方鹿茸方对实验性重症肌无力小鼠T细胞表面协同刺激分子表达的影响（荧光染色法） 725

实例2-12-3-1-2复方黄芪方对环孢素免疫抑制小鼠T淋巴细胞亚群的影响（荧光染色法） 727

实例2-12-3-1-3四神方对实验性结肠炎小鼠肠黏膜CD4+T细胞分化为不同亚群的影响（荧光染色法） 729

实例2-12-3-1-4灵芝多糖对小鼠淋巴细胞增殖反应的影响（3 H-TdR掺入法） 731

实例2-12-3-1-5黄芪对小鼠淋巴细胞增殖反应的影响（MTT法） 732

实例2-12-3-1-6银耳多糖对二硝基氯苯所致迟发型皮肤过敏反应的影响（伊文思蓝比色法） 733

实例2-12-3-1-7银耳多糖对绵羊红细胞致敏的小鼠脾空斑形成细胞（PFC）反应的影响（溶血空斑法） 734

实例2-12-3-1-8冬虫夏草对绵羊红细胞所致小鼠溶血素抗体生成的影响（比色法） 736

实例2-12-3-1-9复方人参对小鼠B淋巴细胞增殖反应的影响（3 H-TdR掺入法） 737

实例2-12-3-1-10女贞子对小鼠血清IgG含量的影响（琼脂单向扩散法） 738

实例2-12-3-1-11加味四君子汤对小鼠脾脏自然杀伤细胞（NK）活性的影响（比色法） 739

实例2-12-3-1-12冬虫夏草对小鼠脾脏自然杀伤细胞（NK）活性的影响（MTT法） 740

实例2-12-3-1-13加味四君子汤对小鼠脾细胞ADCC活性影响的研究（孔雀绿比色法） 741

实例2-12-3-1-14人参对小鼠单核-吞噬细胞系统惰性炭粒吞噬廓清能力的影响（炭粒廓清法） 743

实例2-12-3-1-15生脉注射对小鼠对32P标记的金黄色葡萄球菌吞噬廊清能力的影响（ 32P标记的金黄色葡萄球菌廓清法） 745

实例2-12-3-1-16黄芪仙灵脾合剂及其单味药对小鼠腹腔巨噬细胞Fc、C3b受体的影响（EA花环和YC花环法） 746

实例2-12-3-1-17 18β-甘草次酸钠对大鼠中性粒细胞活性氧生成的影响（化学发光法） 748

实例2-12-3-1-18玉屏风散对小鼠中性粒细胞葡萄球菌吞噬功能的影响（体外实验） 751

实例2-12-3-1-19 18β-甘草次酸钠对大鼠中性粒细胞内游离Ca2+浓度的影响（荧光测定法） 752

实例2-12-3-1-20山茱萸总昔对血管内皮细胞系表达ICAM-1、CD44的影响（Cell-ELISA法） 754

实例2-12-3-1-21连花定喘方对过敏性支气管哮喘豚鼠气道嗜酸性粒细胞浸润的影响（形态法） 755

实例2-12-3-1-22益气补肾方药对肾虚小鼠细胞分泌白细胞介素-12的影响（ELISA法） 757

实例2-12-3-1-23枸祀子多糖对小鼠腹腔巨噬细胞白细胞介素-1生成的影响（3H-TdR掺入法） 758

实例2-12-3-1-24八味地黄汤对正常小鼠白细胞介素-2生成的影响（3H-TdR掺入法） 760

实例2-12-3-1-25山茱萸总昔对CIA大鼠分泌肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响（生物活性法） 761

实例2-12-3-1-26复方鹿茸对实验性重症肌无力大鼠淋巴结细胞INF-γ基因表达的影响（RT-PCR法） 762

实例2-12-3-1-27女贞子对小鼠免疫器官胸腺、脾脏重量的影响（称重法） 764

二、抗应激作用研究实例 765

实例2-12-3-2-1冬虫夏草对小鼠游泳时间的影响（抗游泳疲劳实验） 765

实例2-12-3-2-2黄芪注射液对小鼠耐常压缺氧存活时间的影响 766

实例2-12-3-2-3黄芪注射液对小鼠耐减压缺氧存活百分率的影响 766

实例2-12-3-2-4黄芪对小鼠整体氧耗量测定的影响（整体耗氧量测定法） 767

实例2-12-3-2-5人参对小鼠断头后张口喘气时间的影响 769

实例2-12-3-2-6复方洋参片对小鼠的耐寒冷存活百分率的影响 769

实例2-12-3-2-7洋参片对小鼠的耐高温存活百分率的影响 770

实例2-12-3-2-8银耳多糖对应激引起的小鼠免疫功能抑制的恢复作用（溶血空斑法） 771

实例2-12-3-2-9人参黄芪对冷应激小鼠的保护作用（称重法） 772

实例2-12-3-2-10复方人参对热应激大鼠肾上腺VC含量的影响（2，4-二硝基苯肼法） 773

实例2-12-3-2-11人参茎叶皂昔对噪声应激对小鼠血清皮质酮及脑氨基酸含量的影响（纸电泳-双波长薄层扫描法） 774

实例2-12-3-2-12人参皂昔对复合应激因素致大鼠疲劳模型海马氨基酸含量变化的调节作用（茚三酮衍生法） 775

实例2-12-3-2-13人参皂昔Rb1对应激性性行为缺损的保护作用 776

实例2-12-3-2-14人参皂昔对盲肠结扎穿孔法致应激大鼠肝脏热休克蛋白70表达的影响（免疫组化检测法） 777

三、内分泌腺功能研究实例 779

实例2-12-3-3-1生脉注射液对大鼠肾上腺中维生素C含量的影响（2，4-二硝基苯肼法） 779

实例2-12-3-3-2生脉注射液对大鼠血浆皮质酮含量的影响（放射免疫法） 780

实例2-12-3-3-3人参茎叶皂昔对失血性休克大鼠糖皮质激素受体的影响（放射免疫法） 782

实例2-12-3-3-4白凤丸对幼年大鼠的性器官发育的影响（称重法） 784

实例2-12-3-3-5复方菟丝子对去卵巢加应激大鼠雌激素及子宫脏器指数的影响（放射免疫法） 785

实例2-12-3-3-6复方菟丝子对去卵巢加应激小鼠自主活动及睡眠障碍的影响 786

实例2-12-3-3-7冬虫夏草发酵液对去势雄性小鼠精囊腺和包皮腺重量的影响（称重法） 787

实例2-12-3-3-8复方菟丝子对电刺激应激雄性小鼠捕捉雌性小鼠行为的影响 789

实例2-12-3-3-9五子壮阳汤对环磷酰胺损伤生殖系统雄性大鼠血清睾酮的影响（放射免疫法） 790

实例2-12-3-3-10菟丝子黄酮对人早孕胎盘绒毛滋养层组织培养分泌促性腺激素的影响（放射免疫法） 790

实例2-12-3-3-11补中益气丸对脾虚大鼠甲状腺激素水平的影响（放射免疫法） 791

实例2-12-3-3-12花粉醇提物对尿生殖窦植入所致小鼠前列腺增生的影响（二苯胺法和麝香草酚酞法） 793

四、物质代谢系统及糖尿病研究实例 794

实例2-12-3-4-1人参对小鼠蛋白质、核糖核酸和脱氧核糖核酸合成的影响（放射性核素标记法） 794

实例2-12-3-4-2枸祀多糖对衰老模型小鼠皮肤羟脯氨酸含量的影响（显色法） 795

实例2-12-3-4-3四君子汤对正常和模拟气虚小鼠胸腺核酸含量的影响（二苯胺法和地衣酚法） 797

实例2-12-3-4-4山药粗多糖对糖尿病小鼠肝糖原的影响（蒽酮法） 799

实例2-12-3-4-5灵芝注射液对红细胞中2，3-二磷酸甘油酸水平的影响（紫外酶测定法） 800

实例2-12-3-4-6 18β-甘草次酸钠对缺氧小鼠血液pH和氧分压的影响（氧电极法） 802

实例2-12-3-4-7鹿茸多肽增强体外培养兔关节软骨细胞代谢的实验研究（3H-TdR掺入法） 803

实例2-12-3-4-8鹿茸多肽对鸡胚头盖骨成骨样细胞DNA合成的影响（3H-TdR掺入法） 805

实例2-12-3-4-9复方黄连麦冬对高脂加四氧嘧啶诱发2型糖尿病模型大鼠血糖、肝糖原、肌糖原的影响（葡萄氧化酶试剂盒测定法） 806

实例2-12-3-4-10复方黄连麦冬对四氧嘧啶加葡萄糖致高血糖模型小鼠血糖水平的影响（葡萄糖氧化酶试剂盒法） 808

实例2-12-3-4-11复方黄连麦冬对高脂加链脲佐菌素诱发糖尿病2型模型大鼠血糖及胰岛素敏感指数的影响（胰岛素放射免疫分析试剂盒法） 809

实例2-12-3-4-12金芪有效组分复方对自发性2型糖尿病KKAy小鼠胰岛素抵抗的改善作用（胰岛素耐量试验） 810

实例2-12-3-4-13金芪有效组分复方对谷氨酸钠（MSG）肥胖性胰岛素抵抗小鼠模型胰岛素敏感指数的影响（代谢综合征模型） 811

实例2-12-3-4-14复方黄芪对链脲佐菌素致糖尿病大鼠糖化血清蛋白和糖化血红蛋白含量的影响（1型糖尿病） 812

实例2-12-3-4-15金糖宁对正常小鼠蔗糖负荷后血糖升高的降低作用（双糖耐量试验） 813

实例2-12-3-4-16金芪有效组分复方对清醒状态下自发性2型糖尿病KKAy小鼠正常葡萄糖高胰岛素钳夹的影响（血糖钳夹技术） 814

五、肝炎、脂肪肝、肝纤维化及抗肝损伤作用研究实例 816

实例2-12-3-5-1复方巴戟天对鸭乙型肝炎病毒血清DHBV DNA等的影响（斑点杂交法和Southern blot检测） 816

实例2-12-3-5-2复方虫草体外对HBsAg、HBeAg抑制率的影响（放射免疫法） 817

实例2-12-3-5-3齐墩果酸对四氯化碳致肝损伤大鼠血清谷丙转氨酶（ALT）的影响（比色法） 818

实例2-12-3-5-4复方黄芪对D-氨基半乳糖致肝损伤大鼠ALT、AST的影响（比色法） 819

实例2-12-3-5-5甘草对乙酰氨基酚致肝损伤小鼠ALT、肝糖原和组织损害的影响（比色法） 820

实例2-12-3-5-6人参茎叶皂昔及其复方对硫代乙酰胺（TAA）致肝损害小鼠肝细胞色素P450含量的影响（比色法） 822

实例2-12-3-5-7复方白芍对异硫氰酸苯酯致胆汁淤滞性肝损伤大鼠黄疸模型胆红素及血清ALT的影响（比色法） 823

实例2-12-3-5-8人参茎叶皂昔及其复方对免疫性肝损害小鼠乳酸脱氢酶同工酶5（LDH-5）及免疫复合物的影响（电泳法） 824

实例2-12-3-5-9复方鳖甲对ConA诱导肝纤维化小鼠肝胶原蛋白的影响（放射免疫法） 826

实例2-12-3-5-10复方人参对高脂饲料所致脂肪肝大鼠和酒精性脂肪肝大鼠生化及病理变化的影响（比色法和HE染色） 828

实例2-12-3-5-11复方女贞子对乙硫氨酸性脂肪肝大鼠血清总胆固醇（CHO）、三酰甘油（TG）的影响（比色法） 829

实例2-12-3-5-12甘草酸对复合因素致肝纤维化大鼠肝纤维增生及血清γ-球蛋白等的影响（电泳法） 830

实例2-12-3-5-13复方黄芪对牛血清蛋白免疫性肝纤维化大鼠肝胶原蛋白的影响（Bergman法） 833

实例2-12-3-5-14复方虫草对二甲基亚硝胺致肝纤维化大鼠肝脏明胶酶B和星状细胞凋亡的影响（酶谱法和复合染色法） 834

实例2-12-3-5-15复方鳖甲对酒精性肝纤维化大鼠肝胶原蛋白及肝功能的影响（放射免疫法） 835

实例2-12-3-5-16复方当归对肝纤维化病证结合大鼠模型一般证候及病理变化的影响（HE染色和苦味酸-天狼红染色） 837

六、胃肠疾病模型及消化系统研究 839

实例2-12-3-6-1香砂六君子汤水煎液对牛磺胆酸钠所致胃黏膜损伤大鼠胃黏膜屏障功能的影响（PD测定） 839

实例2-12-3-6-2沙参麦冬复方对大鼠胃壁结合黏液量的影响（阿利新蓝结合法） 840

实例2-12-3-6-3补中益气汤对大鼠胃酸、胃蛋白酶分泌的影响（2步滴定法、蛋白毛细玻管法） 842

实例2-12-3-6-4补中益气汤对小鼠胃排空运动的影响（比色法） 843

实例2-12-3-6-5党参对水浸应激模型大鼠胃电、胃运动的影响（应变片法） 844

实例2-12-3-6-6补中益气汤对小鼠小肠葡萄糖吸收的影晌（游离肠袢法） 847

实例2-12-3-6-7复方地黄口服液对大鼠小肠葡萄糖吸收的影响（小肠循环灌流法） 848

实例2-12-3-6-8补中益气汤对大鼠胰液分泌的影晌（胰瘘法） 850

实例2-12-3-6-9香砂六君子汤对大鼠实验性反流性胃炎的保护作用（胃空肠吻合术法） 852

实例2-12-3-6-10芪佛复方对慢性萎缩性胃炎模型大鼠胃黏膜病变的保护作用（氨水复合热糊和自身免疫损伤法） 853

实例2-12-3-6-11复方黄芪胶囊对醋酸性结肠炎大鼠肠黏膜损伤指数及髓过氧化物酶（MPO）活性的影响（醋酸造模法） 855

实例2-12-3-6-12复方黄芪胶囊对三硝基苯磺酸结肠炎大鼠胸腺指数及脾脏指数的影响（TNBS造模法） 856

七、抗心律失常作用研究实例 858

实例2-12-3-7-1炙甘草汤对异丙肾上腺素致大鼠心律失常的影响（Ⅱ导联心电图法） 858

实例2-12-3-7-2炙甘草汤对乌头碱致大鼠心律失常的影响（Ⅱ导联心电图法） 859

实例2-12-3-7-3参附注射液对毒毛花昔G致豚鼠心律失常的影响（Ⅱ导联心电图法） 860

实例2-12-3-7-4麦冬总皂昔对氯化钡致大鼠心律失常的影响（Ⅱ导联心电图法） 860

实例2-12-3-7-5复脉汤对卵清蛋白致变态反应豚鼠心肌中组胺含量的影响（荧光光度法） 861

实例2-12-3-7-6四氢小檗碱对电刺激兔下丘脑诱发心律失常的影响（Ⅱ导联心电图法） 863

实例2-12-3-7-7炙甘草汤对结扎冠脉前降支及再灌注诱发大鼠心律失常的影响（Ⅱ导联心电图法） 864

实例2-12-3-7-8炙甘草汤对大鼠离体心脏缺血再灌性心律失常及触发活动的影响（单相动作电位技术） 865

实例2-12-3-7-9生脉散及参芎制剂对体外培养大鼠心肌细胞缺氧缺糖损伤的影响（乳酸脱氢酶法） 867

实例2-12-3-7-10炙甘草汤对肾上腺素诱发离体大鼠心室乳头肌自律性和心律失常的影响（离体实验法） 869

实例2-12-3-7-11甘草酸单铵盐对离体大鼠右心房、左心房肌功能不应期和兴奋性的影响（离体实验法） 870

实例2-12-3-7-12复脉汤对组胺致在体豚鼠心脏表面触发活动及心电图影响（单相动作电位技术） 872

实例2-12-3-7-13复脉汤对离体豚鼠心肌细胞动作电位及触发活动的影响（微电极技术） 873

实例2-12-3-7-14复方人参液对兔窦房结起搏细胞电活动的影响（微电极技术） 877

实例2-12-3-7-15鹿衔草提取物和化合物对离体豚鼠右心室缺氧再给氧所致折返激动和心律失常的影响（微电极技术） 879

实例2-12-3-7-16冬虫夏草水提液对离体豚鼠单个心室肌细胞钾通道的影响（膜片钳技术） 882

八、学习记忆障碍模型、神经系统活动及神经递质研究实例 884

实例2-12-3-8-1益智方对去卵巢大鼠学习记忆的影响（Morris水迷宫法） 884

实例2-12-3-8-2山茱萸提取物对穹隆海马伞切断致大鼠学习记忆障碍的影响（通道式水迷宫法） 886

实例2-12-3-8-3复方党参对樟柳碱所致小鼠记忆获得障碍的改善作用（跳台法） 888

实例2-12-3-8-4灵芝对东莨菪碱所致小鼠记忆障碍的改善作用（避暗法） 889

实例2-12-3-8-5人参茎叶皂昔对东莨菪碱致大鼠记忆障碍模型主动回避性条件反射的影响（穿梭箱法） 890

实例2-12-3-8-6党参对东莨菪碱所致大鼠记忆障碍模型操作式条件反射的影响 891

实例2-12-3-8-7淫羊藿黄酮对APP转基因小鼠物体识别能力的影响（物体识别法） 892

实例2-12-3-8-8党参总碱对小鼠脑内乙酰胆碱和胆碱乙酰基转移酶的影响（放射免疫法） 893

实例2-12-3-8-9人参茎叶皂昔对大鼠纹状体单胺类神经递质代谢产物的影响（中空纤维脑灌流-高效液相电化学法） 896

实例2-12-3-8-10复方熟地对小鼠定型运动的影晌（阿朴吗啡法） 899

实例2-12-3-8-11复方熟地对小鼠刻板运动的影响（L-多巴法） 900

实例2-12-3-8-12六味地黄方对高血压大鼠脑组织脑啡肽影响（放射免疫法） 901

实例2-12-3-8-13腺昔类似物对海人藻酸所致神经毒性的抑制效应（组织化学染色法） 902

实例2-12-3-8-14生脉散对清醒家兔皮层脑电功率的影响（功率谱分析法） 904

实例2-12-3-8-15复方首乌对脑外伤大鼠脑切片细胞内Ca 2+浓度的影响（激光共聚焦显微镜法） 905

实例2-12-3-8-16益智方对正常麻醉大鼠海马长时程动作电位增强（LTP）的影响（在体实验） 906

实例2-12-3-8-17参乌胶囊对糖尿病复合脑缺血大鼠海马脑片长时程动作电位的影响（长时程动作电位法） 908

实例2-12-3-8-18山茱萸提取物对线栓法致局灶性脑缺血大鼠行为活动的影响（神经功能缺损评分法） 910

实例2-12-3-8-19淫羊藿黄酮对培养的新生大鼠海马神经干细胞增殖和分化的影响（体外实验） 912

实例2-12-3-8-20山茱萸环烯醚萜昔对局灶性脑缺血大鼠脑内神经发生的影响（体外实验） 915

第13章 延缓衰老药 919

第1节 延缓衰老药主要药理作用 919

第2节 延缓衰老药药理研究方法 920

一、寿命试验 920

二、衰老动物模型 920

三、老化代谢产物测定 921

四、老化相关酶测定 922

五、生物膜 923

六、老年痴呆 923

七、帕金森病 925

八、骨质疏松试验 926

第3节 延缓衰老药药理研究方法实例 928

一、寿命、细胞传代试验 928

实例2-13-3-1-1灵芝虫草复合剂对果蝇寿命的影响（平均寿命和最高寿命） 928

实例2-13-3-1-2六味地黄丸对家蚕寿命延长的影响（延寿时间