分子诊断学实验指导PDF电子书下载

第一章 核酸的分离、纯化与鉴定技术 1

实验一 蛋白酶K-苯酚法制备基因组DNA 1

实验二 碘化钠法制备人外周血白细胞DNA 4

实验三 碱裂解法制备质粒DNA 5

实验四 聚乙二醇法纯化质粒DNA 7

实验五 异硫氰酸胍－苯酚－三氯甲烷一步法制备总RNA 8

实验六 磁珠纯化mRNA 11

实验七 分光光度法测定核酸的浓度和纯度 13

实验八 琼脂糖凝胶电泳检测DNA 14

实验九 甲醛变性凝胶电泳检测RNA 16

实验十 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测单链DNA或RNA 17

第二章 核酸分子杂交技术 20

实验十一 Southern印迹杂交 20

实验十二 Northern印迹杂交 24

实验十三 荧光原位杂交 26

实验十四 斑点及狭缝印迹杂交 28

第三章 核酸扩增技术 31

实验十五 PCR扩增大肠埃希菌fliC基因 31

实验十六 多重Gap-PCR检测α-地中海贫血基因缺失 33

实验十七 等位基因特异性扩增检测CYP2C9基因多态性 36

实验十八 PCR-RFLP检测β珠蛋白基因点突变 38

实验十九 PCR-SSCP检测凝血因子V基因突变 40

实验二十 RT-PCR检测流感病毒M基因的mRNA水平 43

实验二十一 实时荧光定量PCR（染料法）检测HER2癌基因表达 45

实验二十二 实时荧光定量PCR（探针法）检测乙型肝炎病毒DNA 47

第四章 分子克隆技术 50

实验二十三 DNA的限制性酶切反应 50

实验二十四 DNA片段的回收 51

实验二十五 DNA的重组连接 52

实验二十六 感受态细胞的制备与转化 54

实验二十七 重组质粒的筛选与鉴定 56

实验二十八 外源基因的诱导表达与检测 58

第五章 蛋白质组学研究技术 63

实验二十九 双向凝胶电泳技术分析胃癌蛋白质组 63

实验三十 免疫印迹法检测细胞中Bcl-2蛋白水平 65

第六章 生物信息学技术 68

实验三十一 生物信息学数据库及软件基本介绍和使用 68

实验三十二 DNA测序数据分析流程 76

实验三十三 RNA测序数据分析流程 80

第七章 综合性实验 85

实验三十四 地中海贫血基因检测 85

实验三十五 胃癌差异蛋白质分析 85

实验三十六 结核分枝杆菌的检测 85

实验三十七 原核基因的克隆表达与鉴定 86

第八章 自主设计性实验 87

实验三十八 人乳头瘤病毒衣壳抗原的表达 87

实验三十九 16S rRNA基因鉴定空肠弯曲菌 87

实验四十 血浆循环DNA水平诊断肝细胞癌 87

实验四十一 细胞色素P-450药物代谢基因型与表型的分析 88

实验四十二 耐药性的分析 88

附录 89

附录一核酸和蛋白质数据 89

附录二常用试剂的配制 91

参考文献 96