生物化学实验技术PDF电子书下载

第一部分 实验室基本知识 1

一、实验室规则 1

二、实验室基本操作 2

三、实验记录与实验报告 3

四、实验误差与数据处理 5

五、植物样品的采取、处理与保存 10

六、缓冲溶液 12

第二部分 实验 16

第一章 糖 16

实验一 植物组织中糖含量的测定 16

实验二 还原糖含量的测定（3,5-二硝基水杨酸比色法） 19

实验三 糖的定量测定（蒽酮法） 21

第二章 氨基酸和蛋白质 23

实验四 氨基酸的纸层析 23

实验五 脯氨酸含量的测定 25

实验六 蛋白质及氨基酸的呈色反应 27

实验七 蛋白质的沉淀反应 29

实验八 蛋白质的两性反应和等电点的测定 32

实验九 蛋白质含量的测定 34

Ⅰ 双缩脲法测定蛋白质含量 34

Ⅱ 考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量 35

Ⅲ 紫外分光光度法测定蛋白质含量 37

Ⅳ Folin-酚试剂法（Lowry法）测定蛋白质含量 39

实验十 细胞色素C的制备和测定 41

实验十一 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法（SDS-PAGE）测定蛋白质相对分子质量 45

实验十二 凝胶层析法测定蛋白质相对分子质量 50

第三章 酶和维生素 56

实验十三 酶的特异性 56

实验十四 温度、pH值对淀粉酶活性的影响 58

Ⅰ 温度对淀粉酶活性的影响 58

Ⅱ pH值对淀粉酶活性的影响 59

实验十五 过氧化氢酶活性的测定 61

实验十六 过氧化物酶活性的测定 63

实验十七 聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳测定过氧化物同工酶 65

实验十八 植物组织中硝酸还原酶活性的测定 70

实验十九 淀粉酶活性的测定 72

实验二十 酶浓度对酶促反应速度的影响——碱性磷酸酶活性的测定 75

实验二十一 底物浓度对酶促反应速度的影响——米氏常数的测定 77

实验二十二 溶菌酶的提取和系列性质测定 79

Ⅰ 溶菌酶的提取 79

Ⅱ 蛋白质浓度、酶活力测定 81

Ⅲ 酶促动力学（Km测定、脲的抑制） 82

Ⅳ 酶的最适pH值 84

Ⅴ 酶的最适温度 85

Ⅵ 分子筛层析测酶相对分子质量 86

Ⅶ SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定酶相对分子质量及其纯度鉴定 87

实验二十三 维生素C含量的测定 90

第四章 核酸 92

实验二十四 DNA的制备 92

Ⅰ DNA的制备及其含量测定（浓盐分离法） 92

Ⅱ 植物组织中核酸的提取及定量测定 94

实验二十五 DNA的含量测定 97

Ⅰ 紫外吸收法测定DNA含量 97

Ⅱ 定磷法测定DNA含量 99

Ⅲ 二苯胺显色法测定DNA含量 101

实验二十六 离子交换柱层析分离核苷酸 103

第三部分 附录 107

一、离心技术 107

二、分光光度计说明与原理 111

三、常用蛋白质相对分子质量（Mr）标准参照物 115

四、常用缓冲溶液的配制方法 115

五、实验室中常用酸碱的密度和浓度 120

六、硫酸铵饱和度的常用表 121