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第一章 骨骼系统的发生发育与结构 1

第一节 骨 1

一、骨组织 1

二、骨细胞 2

三、骨细胞间质 3

四、骨的组织结构 3

五、扁骨的组织结构 4

六、长骨的组织结构 4

七、骨组织的形成 6

八、骨组织的重吸收 6

九、骨细胞谱系 6

十、膜内成骨 7

十一、软骨内成骨 7

十二、骨内含钙情况 8

第二节 软骨 9

一、软骨的发生、生长和再生 9

二、透明软骨 10

三、纤维软骨 11

四、弹性软骨 11

第三节 肌腱和韧带 11

一、肌腱（韧带）细胞 11

二、肌腱（韧带）基质 12

三、生物力学对肌腱细胞的影响 12

第四节 神经系统的发育 13

一、周围神经的发育 13

二、脊髓的发育 13

第五节 血管 14

一、血管（脉管）系统的发生 14

二、血管壁的基本结构与功能 14

三、毛细血管基本结构与功能 16

第六节 骨骼肌 16

一、骨骼肌的发生与调控 16

二、骨骼肌的基本结构 17

三、骨骼肌的收缩机制与生物力学特点 19

第二章 常用实验动物解剖 21

第一节 大鼠 21

一、脊柱 21

二、肋骨、胸骨和胸廓 23

三、前肢骨 24

四、后肢骨 26

第二节 猫 28

一、脊椎骨 28

二、肋骨 32

三、胸骨 33

四、前肢骨 33

五、后肢骨 36

第三章 怎样取材、固定、脱钙、脱水 41

第一节 动物致死法的选择 41

第二节 组织取材的重要性 41

一、取材 41

二、怎样选择合适的组织固定液 42

第三节 骨组织的脱钙及脱钙液 44

一、骨组织的脱钙前处理 44

二、选用优质脱钙剂的标准 44

三、确定脱钙终点标准 44

四、脱钙后的冲洗 44

五、常用脱钙液 44

六、螯合剂脱钙 45

七、电离子脱钙 45

八、微波脱钙 46

第四节 骨组织的脱水和包埋 46

一、脱水程序及时间 46

二、包埋 46

三、组织制作切片所需程序 46

第五节 骨组织的切片 46

第六节 骨组织的特殊染色方法 48

一、Lillie—Mallory改良的银染法 48

二、Kashiwa乙二醛双染色法（1970） 48

三、Dahl—McGec-Russell茜素红S法 49

四、Vonhossa钙（塑料切片法） 50

五、Massor-Golgner Frichrome染色（不脱钙塑料切片） 50

六、作者本人改良丽春红三色法（1986） 51

第七节 软骨组织染色 54

第八节 不脱钙塑料包埋法 58

第九节 骨组织磨片及染色 61

第四章 结缔组织、肌肉组织染色 68

第一节 胶原、弹力纤维及网织染色 68

第二节 横纹肌染色 70

第五章 周围神经组织染色 76

第一节 神经轴突染色 76

第二节 髓鞘染色 78

第三节 溃变神经纤维染色法 80

第六章 骨科常用实验动物模型的建立 83

第一节 骨肉瘤动物模型的建立 83

一、概述 83

二、骨肉瘤动物模型的建立方法 83

三、建立骨肉瘤动物模型过程中需要注意的一些问题 84

第二节 乳腺癌骨转移模型的建立 84

一、概述 84

二、乳腺癌骨转移动物模型的建立 85

第三节 神经损伤动物模型的建立 88

一、概述 88

二、坐骨神经全切模型 88

第四节 脊髓损伤动物模型的建立 90

一、脊髓损伤动物模型 90

二、脊髓损伤动物的术后护理 92

第五节 激素性骨坏死动物模型的建立 92

一、激素性骨坏死动物模型的建模原理 92

二、激素性骨坏死动物模型的建立方法 93

三、体会与注意事项 95

第六节 骨质疏松动物模型的建立 97

一、常见的骨质疏松动物模型 97

二、骨质疏松动物模型的制备 99

三、骨质疏松动物模型造模成功的判断指标 101

第七节 动物椎间盘退变模型的建立 103

一、椎间盘退变动物模型的要求 103

二、实验动物选择 103

三、退变椎间盘模型制作方法 104

四、椎间盘退变模型的观察 109

第八节 电离辐射致骨及神经系统损伤动物模型的建立 118

一、放射性骨损伤 118

二、放射性脊髓损伤 119

三、周围神经放射性损伤 119

四、急性放射病动物模型的建立 120

第九节 软骨损伤动物模型的建立 121

一、软骨损伤动物模型概述 121

二、软骨损伤动物模型的分类 121

三、常见的软骨损伤动物模型 123

四、动物模型中治疗方法的回顾 124

五、软骨损伤动物模型中一些重要问题 125

六、应力环境对于软骨细胞的意义 126

第十节 慢性骨髓炎动物模型的建立 127

一、慢性骨髓炎动物模型的制备 127

二、慢性骨髓炎动物模型制备经验 128

第十一节 免疫性骨结核动物模型的建立 129

一、骨结核模型建立的现状 129

二、免疫性骨结核动物模型的制备 130

三、免疫性骨结核动物模型的特点 130

第十二节 骨骺损伤动物模型的建立 131

一、骨骺的形成和基本结构 131

二、大鼠胫骨近端骨骺损伤动物模型的建立 132

三、骨骺损伤动物模型建立后的组织病理学变化 132

第七章 细胞培养 140

第一节 成骨细胞的培养 140

一、成骨细胞的生物学特征 140

二、成骨细胞的体外培养 142

第二节 软骨细胞的培养 145

一、软骨细胞的生物学特征 145

二、软骨细胞体外培养方法 148

第三节 骨髓基质细胞的培养 149

一、骨髓基质细胞概述 149

二、骨髓基质细胞的成骨和成软骨潜能 149

三、骨髓基质细胞培养方法 150

四、骨髓基质细胞的观察和鉴定 151

第四节 脂肪源性干细胞的培养 151

一、概述 151

二、脂肪源性干细胞的分离及原代培养 152

三、脂肪源性干细胞培养的心得体会 152

四、脂肪源性干细胞的免疫表型 152

五、脂肪成体干细胞的分化潜能 153

六、脂肪源性干细胞的基因治疗 154

七、脂肪源性干细胞目前所面临的问题 154

第五节 破骨细胞的培养 154

一、破骨细胞的培养方法 155

二、破骨细胞的鉴定 157

三、破骨细胞研究的相关背景 159

第六节 成纤维细胞的培养 164

一、成纤维细胞概述 164

二、成纤维细胞培养方法 164

三、成纤维细胞的鉴定 165

第七节 骨肿瘤细胞的培养 165

一、骨肿瘤细胞概论 165

二、骨肿瘤细胞的体外培养技术 166

三、骨肿瘤细胞的生物学鉴定 170

四、细胞培养中的注意事项 171

第八节 椎间盘细胞的培养 172

一、椎间盘细胞培养的现状 172

二、椎间盘细胞的培养方法 173

三、影响椎间盘细胞培养的因素 175

第九节 嗅鞘细胞的培养 178

一、嗅鞘细胞的培养方法 178

二、嗅鞘细胞的免疫化学特征 181

三、嗅鞘细胞免疫学鉴定 181

第十节 韧带细胞的培养（以前交叉韧带细胞为例） 182

一、概述 182

二、前交叉韧带细胞的体外培养 185

三、不同培养方法的培养效果 185

第八章 显微CT实验技术 189

第一节 显微CT基础 189

一、什么是显微CT 189

二、显微CT与普通CT的性能差异 191

三、显微CT与双能X线骨密度仪的性能差异 193

四、显微CT的分类 194

五、国际上比较有影响的部分显微CT 196

六、显微CT的结构与原理 198

第二节 GE Healthcare Locus SP显微CT 204

一、GE Healthcare Locus SP显微CT性能 204

二、GE Healthcare Locus SP显微CT结构功能 205

三、GE Healthcare Locus SP显微CT硬件性能、参数、指标 207

第三节 显微CT实验步骤 208

一、显微CT实验方案的讨论、设定 208

二、显微CT实验的标本准备 210

三、显微CT预热 212

四、显微CT扫描——Scan Control 213

五、显微CT重建——Reconstruction Utility 216

六、显微CT观察处理——Micro View（处理分析软件主控页面截图） 222

七、显微CT测量与分析 232

第四节 GE Healthcare Locus SP显微CT在骨科领域的应用 239

一、不同类型骨标本的显微CT观察与分析 240

二、生物材料体内降解与成骨的显微CT观察 244

三、含金属植入物骨标本的显微CT观察 246

四、微血管生长状况的灌注标本显微CT观察 249

五、口腔牙体、牙槽骨显微CT观察分析 249

第五节 显微CT应用技术探讨 250

一、显微CT与传统骨切片骨形态计量评价与分析 250

二、显微CT的伪影影响 252

三、显微CT重建与有限元骨生物力学测试探讨 258

四、显微CT的成本控制 259

五、显微CT应用的适用性 259

附：显微CT常用名词解释 260

第九章 电子显微镜技术在骨科研究中的应用 277

第一节 电子显微镜的基本介绍 277

第二节 透射电镜 278

一、透射电镜的基本结构和工作原理 278

二、透射电镜标本的制作 279

第三节 扫描电镜 281

一、扫描电镜基本结构和工作原理 281

二、扫描电镜标本的制作 282

三、扫描电镜的基本应用 283

第四节 其他电镜技术 285

一、冷冻超薄切片技术 285

二、冷冻蚀刻技术 286

三、负染色技术 287

四、电镜酶细胞化学技术 287

五、电镜免疫细胞化学技术 288

六、电镜放射自显影技术 289

七、电镜X射线微区分析制样技术 290

第十章 腺病毒载体在骨科实验研究中的应用 292

第一节 概述 292

第二节 腺病毒的制备过程 292

第三节 经验和体会 297

第四节 腺病毒载体的进一步改良 299

第十一章 现代骨库技术 302

第一节 骨库与同种异体骨移植的发展 302

第二节 骨的采集技术 303

第三节 骨的加工制备技术 304

第四节 骨及关节软骨的贮存技术 305

第五节 骨的灭菌技术 307

第六节 BMP、DBM及生物源性松质骨载体的制备方法 308

一、牛骨形态发生蛋白（bBMP）的提取方法 309

二、牛松质骨载体制备方法 310

三、生物骨脱钙骨基质（DBM）的制备方法 311

第七节 Ⅰ型胶原的提取方法 312