免疫学实验技术讲义PDF电子书下载

一、基本原理 1

第一部分 免疫电泳技术 1

二、琼脂免疫电泳 4

(一)实验方法 4

(二)结果判定 7

(三)注意事项 13

(四)附录 15

三、醋酸纤维薄膜电泳与免疫电泳 15

(一)实验方法 16

〔附〕醋酸纤维薄膜的制备法 18

(二)结果判定 18

(三)注意事项 18

四、聚丙烯酰胺凝胶电泳与免疫电泳 19

(一)实验方法 21

(二)结果判定 23

(三)注意事项 24

〔附〕实验用各种试剂配制 25

五、对流免疫电泳 26

(一)实验方法 26

(二)结果判定 27

六、单向琼脂免疫电泳(火箭电泳) 28

(一)实验方法 28

(三)注意事项 28

(二)结果判定 30

(三)标准曲线制定 30

(四)注意事项 30

七、应用举例--乙型肝炎表面抗原的检测 31

一、免疫球蛋白的提纯 40

(一)血清IgG的提纯 40

第二部分 免疫球蛋白测定 40

(二)初乳中分泌型IgA的提纯 47

二、免疫球蛋白的纯度鉴定 51

(一)琼脂单纯(区带)电泳 52

(二)琼脂双向扩散 54

(三)琼脂免疫电泳 56

(四)聚丙烯酰胺凝胶电泳(园盘电泳) 58

三、免疫球蛋白定量测定--单向琼脂扩散法 59

(一)标准曲线的制定 60

(二)待检标本的测定 67

〔附〕以未标定抗血清制定标准曲线 68

(三)痰中IgA的定量测定 69

(四)注意事项 70

第三部分 其他体液免疫检测法 73

？球凝集试验--检测脑膜炎球菌抗体 73

(一)材料 74

(二)试验方法 77

(三)结果判定标准 78

(四)注意事项 78

〔附〕培养基和试剂 80

(一)基本原理 82

二、反向血球凝集试验 82

(二)抗体致敏红细胞的制备 84

(三)试验方法和结果判定 91

(四)应用举例--检测脑膜炎球菌抗原 94

〔附〕常用溶液的配制 95

三、乳胶凝集试验--检测钩端螺旋体抗体 101

(一)聚苯乙烯胶乳的合成 102

(二)钩端螺旋体致敏原的制备 103

(三)胶乳的胰蛋白酶处理 103

(五)胶乳抗原的鉴定 104

(六)试验方法 104

(四)胶乳的致敏 104

〔附〕钩体乳凝试验应用情况简介 106

四、免疫粘附血凝试验--检测乙型肝炎抗原 107

(一)基本原理 108

(二)材料与方法 109

(三)影响因素及注意事项 113

〔附〕IAHA的试剂和方法(DTT法) 116

五、细菌玻板凝集试验 118

(一)器材和试剂 119

(二)操作方法 120

(三)玻板凝集抗原的制备原则及其滴定 122

六、微量补体结合试验 125

(一)材料 126

(二)方法 126

(三)注意事项 131

七、人血清总补体量的测定 133

(一)材料 133

(二)试验方法 134

(三)注意事项 135

八、微量滴定法 135

(一)基本器材及其使用方法 136

(二)一般操作步骤 148

(三)实验结果及应用范围 154

第四部分 细胞免疫检测法 163

一、玫瑰花瓣形成试验 163

(一)常量E-玫瑰花瓣形成试验 163

(二)微量E-玫瑰花瓣形成试验 168

(三)早期玫瑰花瓣形成试验 170

(四)EAC-玫瑰花瓣形成试验 172

(五)E和EAC玫瑰花瓣联合试验 173

二、淋巴细胞转化试验 175

(一)材料 176

(二)试验方法 177

(三)结果判定 179

(四)注意事项 181

〔附〕微量淋巴细胞转化试验 184

三、巨噬细胞移动抑制试验 185

(一)毛细管法(一步法) 186

(二)平皿法 188

四、巨噬细胞吞噬试验(皮泡法) 189

(一)材料 190

(二)试验方法 191

(三)结果判定 192

(四)注意事项 193

〔附一〕细胞毒性试验(微量法) 193

〔附二〕各种细胞免疫检测法的比较 194

〔附三〕间接嗜硷细胞脱颗粒试验 195

第五部分 免疫荧光技术 198

一、免疫荧光技术的原理 198

(一)直接法 198

(二)间接法 199

(一)免疫血清制备方法 200

二、免疫血清的制备 200

(三)补体法 200

(二)效价测定方法 204

三、荧光抗体的制备 204

(一)荧光色素 204

(二)标记方法 205

(三)荧光抗体的鉴定 209

(四)荧光抗体的保存 211

四、荧光抗体染色法 211

(一)标本制作 211

(二)荧光抗体染色法 211

(三)荧光显微镜检查法 215

五、自身抗体的免疫荧光检查法 218

(一)抗核抗体(或抗核因子) 219

(二)平滑肌自身抗体 222

(三)线粒体抗体 223

(四)甲状腺球蛋白抗体 224

(五)甲状腺微粒体抗体 225

(六)抗心肌抗体 225

六、非特异性染色的消除法 227

(一)非特异性染色的主要因素 227

(二)消除非特异性染色的方法 228

〔附〕过氧化物酶标记抗体技术 233

第六部分 放射免疫技术 242

一、放射免疫饱和分析法 242

(一)基本原理 243

(二)标记抗原的选用 246

(三)抗血清的选择和用量 251

(四)分离B、F的方法 255

(五)实验举例 259

二、放射免疫沉淀自显影法 276

(一)基本原理和类型 276

(二)实验举例 278

第七部分 有关蛋白质分离的技术 287

一、中性盐(硫酸铵)分段沉淀免疫球蛋白 287

(一)基本原理及其优缺点 287

(二)实验条件和方法 290

(三)应用举例 293

(四)去盐及浓缩 294

二、凝胶过滤(凝胶层析) 296

(一)基本原理、优点和适用范围 296

(二)几种常用层析凝胶的性质 301

(三)实验条件的选择 305

(四)应用举例 314

三、离子交换剂层析 316

(一)离子交换剂 316

(二)基本原理 320

(三)实验条件及其选择 327

(四)应用举例 343

四、免疫吸附亲和层析 346

(一)基本原理 348

(二)免疫吸附剂的几种类型 349

(三)实验举例--免疫吸附剂亲和层析提纯甲胎蛋白(AFP) 358