切片材料的染色方法-电镜技术PDF电子书下载

目 录 1

作者前言 1

第一章引言 1

1·1切片染色的目的 2

1·2组织固定 8

1·2·1作初固定剂用的醛类 9

1·2·2几个化学问题 10

1·2·3固定程序 14

1·3组织制备 14

1·3·1获得薄组织片的简单方法 15

1·3·2组织切片机 17

1·3·3组织切片的定向 18

1·3·4特殊包埋技术 19

1·4实验室的安全 20

第二章 电镜技术中的细胞学染色方法 27

2·1光镜观察用的厚树脂切片 28

2·1·1厚切片的处理 28

2·1·2光镜用树脂切片的染色 29

2·2处理超薄切片的程序 32

2·2·1载网上切片的染色 33

2·2·2未载网超薄切片的染色 38

2·2.3除去超薄切片上的锇 39

2·2·4染色程序的选择 39

2·3铅染色剂 43

2·3·1铅染的一般程序 43

2·3·1 a 氢氧化铅水溶液染色程序 44

2·3·2碱性铅盐溶液染色 45

2·3·2 a 铅染法A（Karnovsky 1961） 45

2·3·2 b 铅染法B（Karnovsky 1961） 46

2·3·2 c 铅染法C——酒石酸铅染色法（Millonig1961） 46

2·3·2 d 铅染法D——枸橼酸铅染色法（Reynolds1963） 46

2·3·2 e 铅染法E——枸橼酸铅染色法（Venable和Coggeshall 1965） 47

2·3·2 f 铅染法F——枸橼酸铅染色法（Fahmy1967） 47

2·3·3铅染液的用途 48

2·4醋酸双氧铀 48

2·4·1醋酸双氧铀酒精溶液 49

2·4·2铀盐水溶液 49

2·4·3醋酸双氧铀块染程序 50

2·5双染法 52

2·6其它细胞学染色剂 56

2·6·1四氧化锇 57

2·6·1 a 锇－硫卡巴肼－锇法 59

2·6·2磷钨酸 60

2·6高锰酸钾 62

2·6·4证实生物胺的方法 64

2·6·5其它非特异染色法 67

2·7电镜技术中的示踪剂 67

2·7·1真溶液中的小分子 68

2·7·1 a 硝酸鑭和钌红 69

2·7·1 b葡糖酸亚铁在体内的应用 70

2·7·2 a 胶体金的制备方法 72

2·7·2胶体粒子 72

2·7·3酶和金属蛋白质 74

第三章普通细胞化学方法 92

3·1现有技术的局限性 92

3·2广谱特异性细胞化学方法 94

3·2·1证实酸性或硷性基团的程序 94

3·2·2某些羟基的染色剂——乙醇铊 95

3·3核酸染色法 97

3·3·1核酸的一般染色法 97

3·3·1 a 核酸的三氯化铟染色法 97

3·3·1 b核酸的钨酸钠染色法 99

3·3·1 c 核酸的醋酸双氧铀染色法 99

3·3·2 DNA的特异染色法 100

3·3·2 a DNA的富尔根－六亚甲四胺银染色法 101

3·3·2 b DNA的富尔根－席夫－乙醇铊染色法 101

3·3·3 R NA的选择性染色 105

3·4蛋白质的一般染色法 107

3·4·1丙烯醛在蛋白质染色中的应用 107

3·4·2蛋白质的磷钨酸染色法 108

3·4·3硫氢基的特异染色法 109

3·4·3 a 高硫蛋白质的染色法 111

3·5碳水化合物的特异染色法 114

3·5·1过碘酸氧化法的特异性 115

3·5·1 a 醛基阻断法 117

3·5·2碳水化合物的过碘酸－六亚甲四胺银染色法 117

3·5·3碳水化合物的氨基硫脲－蛋白质酸银染色法 119

3·5·4碳水化合物的过碘酸－碱性？染色法 122

3·6酸性粘液物质的染色法 123

3·6·1含铁溶液的应用 124

3·6·2用铁溶液块染酸性粘液物质的方法 125

3·6·3用铁染超薄切片酸性粘液物质的方法 126

3·6·4用胶体钍染酸性粘液物质的方法 126

3·6·5酸性粘液物质的其它染色法 128

3·7脂类染色法 130

3·7·1保存脂类用的特殊脱水和包埋方法 131

3·7·2保持脂类的氨基塑料包埋剂 131

3·7·2 a 戊二醛－卡巴肼混合物 （GACH）包埋 133

3·7·2 b 戊二醛－尿素混合物（GUR）包埋 134

3·7·2 c 戊二醛－尿素乙二醇甲基丙烯酸酯共聚体（GUGM）包埋 135

3·7·3用毛地黄皂甙保存胆固醇 136

3·7·4磷脂的保存 138

3.8无机离子沉淀法 139

3·8·1用焦锑酸盐沉淀钠 139

3·8·2钙离子的显示法 140

3·8·3磷酸盐离子的沉淀 141

3·8·4氯化物离子的沉淀 142

3·8·5显示重金属的方法 142

3·9提取方法 144

3·9·1某些固有的困难 145

3·9·2核酸的提取 147

3·9·3蛋白水解酶的应用 148

3·9·4多糖的提取 150

第四章水解酶的金属沉淀法 167

4·1酶细胞化学原理 167

4·1·1一些理论上的考虑 169

4·1·2理论上的一些推论 173

4·1·3孵育阶段的细则 174

4·2酶细胞化学的一些实际问题 178

4·2·1孵育用组织样品的制备 179

4·2·2孵育时可能产生的问题 182

4·2·3孵育后遇到的问题 184

4·2·4一个典型的孵育程序 187

4·3酸性水解酶的染色方法 189

4·3·1酸性磷酸酶的显示法 190

4·3·2酸性磷酸酶的常规染色法 191

4·3·3酸性单核苷酸酶的显示法 194

4·3·4核苷酸二磷酸酯酶，特别是硫胺焦磷酸酶的显示法 195

4·3·5硫酸酯酶技术 197

4·4水解ATP的酶类 199

4·4·1命名问题 200

4·4·2某些组织化学的复杂问题 201

4·4·3一种用铅离子显示ATP酶的可能方法 204

4·4·4用锶离子显示运载ATP酶 211

4·4·5腺苷酸环化酶的显示法 213

4·5·1碱性磷酸酶技术 215

4·5其它磷酸酶 215

4·5·1 a 钙作捕捉离子的用法 219

4·5·1 b 胞苷一磷酸作底物的用法 219

4·5·1 c 枸橼酸盐作螯合剂的用法 220

4·5·2葡萄糖－6－磷酸酶技术 221

4·5·2 a 推荐一个证实葡萄糖－6－磷酸酶的方法 223

4·6一般性酯酶技术 224

4·6·1现用技术的总特异性 224

4·6·2用于酯酶的硫赶醋酸原法 228

4·6·2 a 一个简单的硫赶醋酸方法 228

4·6·3两个改进的酯酶方法 229

4·6·3 b 铅－乙酰二硫化物法 230

4·6·3 a纯硫赶醋酸的制备 230

4·6·3 c 金－硫赶醋酸盐法 232

4·6·4酶抑制物的重要性 233

4·6·5用于酯酶的金－苯硫酚盐法 234

4·6·5 a 对硝基苯硫赶醋酸盐（PNPTA）的合成 235

4·6·5 b 推荐的PNPTA孵育程序 235

4·6·6 8－羟基喹啉在证实酯酶上的可能用法 236

4·7胆碱酯酶的特异方法 237

4·7·1现用实验方法概况 237

4·7·2铜－硫代胆碱法在组织化学上的某些局限性 238

4·7·3各种铜－硫代胆碱法的比较 240

4·7·4用于胆碱酯酶的铜－甘氨酸常规方法 243

4·7·4 aTennyson-Brzin法 243

4·7·4 b Kasa-Csillik法 244

4·7·4 c Lewis-Shute法 245

4·7·4d 一种可变通的简单孵育程序 247

4·7·4 e 抑制剂和替换底物的用法 249

4·7·5胆碱酯酶的铜－铁氰化物染色法 251

4·7·5 a 标准的铜－铁氰化物染色法 253

4·7·5 b 硒代胆碱酯的用法 254

4·7·6胆碱酯酶的金－硫代胆碱法 255

第五章其它酶细胞化学方法 273

5·1氧化酶的组织化学 274

5·1.1DAB在氧化酶组织化学中的应用 276

5·1·1 a 过氧化物酶活性的显示 279

5·1·1 b 细胞色素氧化酶和线粒体染色 281

5·1·1c 过氧化氢酶和微体的染色 283

5·1·1 d 内源性非酶促染色 285

5·1·1 e细胞色素C的检出 285

5·1·1 f相关化合物的应用 286

5·1·2 DOPA－氧化酶法 287

5·1·3其它氧化酶法 290

5·2脱氢酶组织化学的生化基础 291

5·2·1呼吸链概述 291

5·2·2氧化磷酸化作用和组织化学抑制剂 293

5·2·3组织化学的应用 296

5·3铁氰化物的用法 297

5·3·1线粒体对铁氰化物的还原作用 298

5·3·2琥珀酸脱氢酶的显示 300

5·3·3其它脱氢酶的显示 303

5·3·4α－羟酸氧化酶的检出技术 305

5·3·5增强初发亚铁氰化物沉淀反差的方法 306

5·4四唑盐的用法 307

5·4·1琥珀酸脱氢酶的染色程序 311

5·4·2递氢酶活性的染色程序 312

5·4·3乳酸脱氢酶的染色程序 313

5·4·4其它脱氢酶的染色 314

5·5偶氮染料的偶联技术 314

5·5·1偶氮染料技术的缺点 316

5·5·2有关六偶氮副蔷薇苯胺的方法 317

5·5·2 a 六偶氮副蔷薇苯胺的制备 318

5·5·2 b萘酚酯作底物的用法 319

5·5·2 c 吲？酚酯作底物的用法 320

5·5·3芳基硫酯作底物的用法 322

5·5·3 a 酯酶的染色法 323

5·5·3 b用于其它酶的可能性 324

5·5·4氨基肽酶的显示 325

5·5·5含重金属重氮盐的用法 328

5·6某些转移酶的可能染色法 329

5·6·1转氨酶的铅－草醋酸盐染色法 329

5·6·2鸟氨酸氨基甲酰转移酶的建议方法 331

5·6·3酰基转移酶的染色方法 333

5·7酶细胞化学的展望 335

附录Ⅰ贮备液 355

附录Ⅱ 常用试剂与器材的供应厂商目录 362