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第一部分 常用生物化学实验技术及原理 1

一、常用生物材料的处理 1

二、比色分析法和分光光度法 4

（一）比色分析法的基本原理 5

（二）比色分析的测定方法 8

（三）比色分析条件的选择 10

（四）常用的分光光度计 11

三、电泳技术 17

（一）基本原理 17

（二）醋酸纤维膜电泳 20

（三）聚丙烯酰胺凝胶电泳 21

（四）等电聚焦电泳 29

四、层析法 32

（一）层析法中一些术语 32

（二）层析法分类 33

（三）层析法的理论概述 33

（四）凝胶过滤层析 35

（五）离子交换层析 39

（六）亲和层析 43

（七）薄层层析 47

五、放射性同位素示踪技术 49

（一）基本知识 50

（二）放射性核素衰变的规律和性质 50

（三）放射性测量的有关知识 51

（四）放射免疫测定技术 53

（五）放射自显影技术 53

第二部分 实验 54

六、蛋白质的测定 54

实验（一） 凯氏微量定氮法 54

实验（二） 酚试剂法 56

实验（三） 双缩脲法 57

实验（四） 比色法 59

七、酶促反应动力学实验 60

实验（五） 酚标准曲线的绘制 61

实验（六） pH对酶促反应速度的影响 62

实验（七） 温度对酶促反应速度的影响 63

实验（八） 底物浓度对酶促反应速度的影响 64

实验（九） 抑制剂对酶促反应速度的影响 65

八、生物氧化 66

实验（十） 乳酸脱氢酶及辅酶Ⅰ 66

实验（十一） 琥珀酸脱氢酶实验 68

实验（十二） 细胞色素氧化酶实验 69

九、糖代谢 70

实验（十三） 运动对尿中乳酸含量的影响 70

实验（十四） 血糖定量 71

实验（十五） 胰岛素及肾上腺素对血糖浓度的影响 73

实验（十六） 肝糖元实验 74

十、脂类 75

实验（十七） 肝脂质的提取及薄层层析 75

实验（十八） 血清总胆固醇定量 77

十一、蛋白质代谢 78

实验（十九） 转氨基作用 78

实验（二十） 血清蛋白的醋酸纤维膜电泳分离及测定 80

十二、核酸 82

实验（二十一） 酵母RNA的提取 82

实验（二十二） 从肝脏中提取DNA 83

实验（二十三） 核酸的定量测定 84

实验（二十四） DNA定量测定 86

实验（二十五） 组织中核酸的分离及定量 87

实验（二十六） 紫外吸收测定核酸含量 90

十三、人血清抗胰蛋白酶的分离及鉴定 91

实验（二十七） 盐析法 92

实验（二十八） 凝胶过滤法 92

实验（二十九） DEAE纤维素离子交换层析 93

实验（三十） 伴刀豆素球蛋白琼脂糖亲和层析 95

实验（三十一） SDS聚丙烯酰胺凝胶平板电泳 96

实验（三十二） 等电聚焦圆盘电泳 98

十四、血清γ-球蛋白 99

实验（三十三） 血清球蛋白的分离纯化 99

实验（三十四） 凝胶过滤法分离球蛋白的重链与轻链 101

十五、同位素实验 101

实验（三十五） 尿中激肽含量的放射免疫测定法 101

实验（三十六） 胰岛素放射免疫测定 103

附录 105

一、缓冲液 105

（一）一些常用作缓冲剂的化合物的酸解常数 105

（二）常用缓冲液的配制方法 106

1．磷酸盐缓冲液 106

2．巴比妥钠—盐酸缓冲液（18℃） 107

3．Tris—盐酸缓冲液（0.05M,25℃） 107

二、层析法常用数据表 108

（一）葡聚糖凝胶的某些技术数据 108

（二）琼脂糖凝胶的技术数据 109

（三）各种凝胶所允许的最大操作压 109

三、硫酸铵饱和度的常用表 110

1．调整硫酸铵溶液饱和度计算表（25℃） 110

2．调整硫酸铵溶液饱和度计算表（0℃） 111

四、离心机转数与相对离心力的换算 112

五、125I衰变表 113

六、FT—613自动计算放免测量仪使用方法 113