生物文库技术 噬菌体展示与SELEX技术PDF电子书下载

上篇 噬菌体表面展示技术原理及其操作指南第1章 概述 3

一、噬菌体表面展示随机肽库 3

二、噬菌体抗体库 7

三、噬菌体表面展示技术筛选原理和基本方法 11

四、噬菌体表面展示技术的应用 12

第2章 噬菌体表面展示肽库技术操作指南 17

一、试剂 17

二、实验步骤 18

三、影响筛选的因素 21

四、结果判断和分析 24

第3章 噬菌体肽库构建及筛选实例 26

实例1 基于昆虫防御素A蛋白分子的噬菌体展示构象肽库的构建 26

实例2 重组hTNF-α结合肽的筛选 31

实例3 马抗SARS-CoV多抗抗原表位的筛选 36

第4章 噬菌体抗体库技术操作指南 47

一、试剂 47

二、实验步骤 48

三、影响筛选的因素 53

第5章 噬菌体抗体库构建及筛选实例 55

一、引物 56

二、淋巴细胞总RNA的提取及VH和VL基因的扩增 57

三、初级噬菌体抗体库的构建 57

四、通过Cre-loxP位点特异性重组构建大容量噬菌体抗体库 58

五、噬菌体抗体库的筛选 59

六、噬菌体抗体的鉴定及序列分析 60

下篇 SELEX技术原理及其操作指南 63

第1章 概述 63

一、SELEX技术的基本技术路线 63

二、SELEX筛选的特点 66

三、SELEX的应用 67

四、适配子的改造 71

第2章 SELEX技术操作指南 75

一、试剂与设备 75

二、文库／文库模板和引物的设计与合成 76

三、RNA文库的获得（PCR、体外转录与RNA回收） 79

四、文库与靶分子孵育 82

五、结合寡核苷酸分子的分离 83

六、反转录 86

七、PCR 87

八、下一轮筛选用文库的制备 88

九、重复筛选 90

十、筛选后获得的特异aptamer的分析 90

第3章 SELEX技术筛选实例 93

实例1 牛凝血酶特异的RNA aptamer的筛选 93

实例2 CE-SELEX筛选技术 103

实例3 亲和层析SELEX筛选促红细胞生成素适配体及基于分子信标检测方法的建立 111

实例4 亲和层析SELEX筛选相思子毒素适配体及其在分析检测中的应用 117

实例5 以完整细胞为靶的消减SELEX筛选 123

实例6 肿瘤组织切片-SELEX技术筛选临床标本分子探针 132

实例7 组合aptamer用于金黄色葡萄球菌检测的研究 140