神经科学研究尖端技术手册 分子组织化学 第2版PDF电子书下载

第一章 组织材料的处理 盐坡贞夫 1

一、前言 1

二、小动物的非固定取材 2

三、小动物的灌流固定 5

四、冰冻切片的制作 6

五、非冰冻切片的制作 12

六、冰冻切片与石蜡切片的比较 13

七、组织材料处理必要试剂的特性和配制方法 14

八、明胶化载片及硅化载片的制作 17

九、有关原位分子杂交组织化学、免疫组织化学用的切片制作方法小结 18

第二章 原位分子杂交组织化学 21

一、前言 盐坡贞夫 21

二、原位分子杂交组织化学简介 盐坡贞夫 21

三、在原位分子杂交组织化学使用的标记探针 盐坡贞夫 22

四、使用同位素标记的合成探针的原位分子杂交法 仙波美惠子 24

（一）合成探针的制备 24

（二）组织切片的制作 28

（三）杂交前处理 28

（四）杂交反应 31

（五）反应的显示 35

五、用非放射性物质标记合成探针的原位分子杂交法 木山博资 38

（一）探针的制备 39

（二）杂交反应 43

（三）原位分子杂交的对照实验 49

（四）在消化管等内源性AP活性高的组织进行原位分子杂交 51

（五）同时证明二种mRNA的方法 51

六、使用同位素标记的cRNA探针的原位分子杂交法 和中明生 53

（一）探针的制备 53

（二）组织切片制作 62

（三）组织切片的杂交前处理 63

（四）杂交反应 65

（五）反应的显示——放射自显影 68

七、用非放射性物质标记cRNA探针的原位分子杂交法 岩田弘、盐坡贞夫 70

（一）探针的制备 71

（二）组织切片的杂交前处理 76

（三）杂交反应的操作步骤 76

（四）抗原－抗体反应及显色反应 77

八、放射自显影法 稻垣忍 79

（一）宏观放射自显影 80

（二）微观放射自显影 84

（三）电镜放射自显影 88

一、前言 92

第三章 免疫组织化学 盐坡贞夫 92

二、抗血清、抗体 93

三、可视标记物的种类 94

四、免疫染色法的种类及操作步骤 95

五、免疫组织化学的注意事项 101

第四章 免疫电镜法 高木宏 103

一、前言 103

二、免疫电镜法的原理 103

三、标记物的选择 104

四、组织的固定 105

五、包埋前染色法 106

六、包埋后染色法 111

七、冰冻超薄切片法 115

（一）冰冻超薄切片法（包埋前染色）的特点 115

（二）冰冻超薄切片的操作步骤 116

八、免疫电镜在神经科学上的应用 118

（一）双重或多重标记法 119

（二）免疫电镜法与其他方法的并用 120

第五章 Northern杂交法 加藤启子、佐藤真 125

一、总RNA、mRNA纯化 125

（一）总RNA纯化 125

（二）mRNA纯化 129

（三）RNA纯度标准 133

二、Northern杂交 133

（一）RNA的电泳 133

（二）转移吸附 136

（三）探针的制作方法 138

（四）杂交反应 140

第六章 Western印迹法 加藤启子 143

一、前言 143

（一）所用器具和溶液 144

二、抗原的提取法 144

（二）操作步骤 145

（三）蛋白质定量 146

三、凝胶电泳 147

（一）所用器具和溶液 147

（二）操作步骤 149

四、转膜吸附 150

（一）所用器具和溶液 150

（二）操作步骤 151

五、膜的封闭 152

六、抗原抗体反应 153

（一）第一抗体与抗原反应 153

（二）标记的第二抗体与第一抗体的反应 153

七、呈色反应 156

（三）膜的洗涤 156

一、前言 157

二、蛋白质的标记 157

（一）用125I进行表画标记 157

第七章 免疫沉淀法 宫本泰豪、盐坂贞夫 157

（二）用32S进行生物合成标记 158

三、可溶化 158

四、免疫沉淀 159

第八章 蛋白质标记法 今泉和则、高木勉 161

一、前言 161

二、放射性碘的蛋白质标记法 161

（一）原理 162

（二）所用试剂 162

（三）标记法步骤 163

（一）原理 166

三、非放射性物质的蛋白质标记法 166

（二）所用试剂 168

（三）标记步骤 169

第九章 神经细胞培养法 金承业 170

一、前言 170

二、大鼠脊神经节神经细胞的培养 172

（一）所需物品 173

（二）操作步骤 174

三、大鼠大脑皮质神经细胞的培养 177

（一）所需物品 178

（二）操作步骤 178

四、用免疫细胞化学方法对神经细胞的确认 181

译者后记 184