组织培养技术 第二版PDF电子书下载

目录 1

第一部分 绪论和基本理论知识 1

1绪论 1

组织培养基本概念 1

对组织培养的评价 2

组织培养发展简史 3

早期组织培养 3

组织培养的建立 3

现代组织培养 4

组织培养的发展 4

我国组织培养的发展 6

对组织培养工作者的要求和工作方法 7

2组织培养细胞生物学 8

体内、外细胞的差异和分化 8

差异 8

分化 9

体外培养细胞的分型 10

贴附型 10

细胞形态结构 13

大体形态 13

悬浮型 13

超微结构 15

组织培养细胞的生长和增殖过程 16

组织培养细胞生命期 16

组织培养细胞一代生长过程 18

细胞周期 21

细胞相互关系 24

组织培养细胞遗传学特征 25

细胞生存环境和代谢 27

天然培养基 33

合成培养基 33

人工培养基 33

无血清培养基 34

附着底物 34

抑制细胞生长因素 35

细胞代谢 35

3建立细胞系或细胞株 39

体外培养细胞的种类和命名 39

建立细胞系（或株）的要求 41

已建立细胞的鉴定、管理和使用 42

无菌操作设施 43

实验室设计 43

第二部分 实验室设施条件、培养用液 43

4实验室设计和设备 43

实验室设备 46

大型装置和仪器 47

器械 51

培养器皿 51

杂用品 53

5培养用液 55

水 56

平衡盐溶液 56

水和平衡盐溶液 56

天然培养基 58

鸡血浆的制备 58

鸡胚浸出液的制备 58

小牛血清 60

水解乳蛋白 62

鼠尾胶原 63

合成培养液 64

合成培养液的种类 64

合成培养液的主要成分 74

合成培养液的配制 75

培养液的种类 82

无血清培养基 83

基础培养液 84

附加成分 84

其它常用液 88

消化液 88

pH调整液 90

抗生素液 90

6清洗与消毒 91

清洗 91

玻璃器皿 92

胶塞 93

塑料器皿 94

包装 94

消毒 94

紫外线 95

干热消毒 95

湿热消毒 95

滤过消毒 96

射线消毒 97

消毒剂的使用 98

无菌操作 100

基本要领和要求 100

第三部分 基本培养技术 100

7细胞和组织培养基本技术方法 100

取材 102

取鸡胚组织 102

取鼠胚组织 103

取皮肤 104

取血 104

取骨髓组织、羊水、胸水和腹水 104

机械分散组织法 105

切割分离组织法 105

离心分离法 105

组织分离 105

消化分离法 107

细胞计数法 112

细胞冻存 114

原理 114

要点 115

冻存方法 115

复苏方法 117

初代培养 119

双盖片悬滴培养法 119

细胞运输 119

8天然培养基组织培养法 119

换液和传代 121

柯氏瓶培养法 122

9人工合成限定培养基组织培养法 123

初代培养 124

消化培养法 124

组织块培养法 127

传代培养 128

加支持物培养法 130

要求 131

原理 131

悬浮培养 131

要点 131

10单细胞分离培养 131

提高克隆形成率的措施 132

技术方法 135

低密度细胞悬液的制备 136

接种 138

11微载体细胞培养 142

微载体及其性质 143

原理 143

微载体细胞培养方法 145

12球体细胞培养 146

原理 146

培养方法 146

球体细胞培养 146

球体细胞和单层细胞混合培养 148

13培养细胞生物学检测和建立细胞株（或系） 149

细胞培养常规检查 149

形态学方面 151

细胞生物学检测 151

细胞生长方面 153

活细胞直接观察 156

细胞遗传学方面 156

细胞转化及恶性程度检查 156

其它方面观察 160

14培养细胞同工酶的测定 160

原理 160

方法 161

要点 162

15二倍体细胞培养 162

方法 163

16建立突变细胞系 163

原理 163

突变 164

HGPRT基因 164

方法 165

细胞选择 165

诱发HGPRT－缺欠型 166

肿瘤细胞生物学特性 168

肿瘤细胞培养基本知识 168

17肿瘤细胞培养 168

肿瘤细胞培养技术要点 169

体外培养肿瘤细胞生物学检测 175

对肿瘤细胞株或细胞系的评价 175

18各别器官组织细胞的培养 176

上皮细胞培养 176

表皮细胞培养 177

乳腺组织培养 178

内皮细胞培养 180

传代培养 182

消化法培养 182

肝细胞培养 182

初代组织块培养 182

神经胶质细胞培养 183

肌组织培养 184

骨骼肌细胞培养 184

心肌细胞培养 185

巨噬细胞培养 185

培养技术要点 185

培养方法 187

空气 189

污染途径 189

19组织培养的污染、检测和排除 189

清洗消毒 190

操作 190

血清 190

组织 190

污染对细胞的影响 190

霉菌污染 191

细菌污染 191

支原体污染和检测 191

支原体种类 191

支原体生物学特性和对细胞的影响 192

支原体的检测 194

微生物污染的排除 197

抗生素 197

加温处理 197

动物体内接种 198

巨噬细胞吞噬法 198

细胞和固定 200

常用固定液 200

细胞培养 200

20细胞形态学和细胞化学观察法 200

第四部分 观察法和研究技术 200

一般染色法 201

苏木精－伊红染色 201

Giemsa染色法 202

May-Grünwald-Giemsa染色 203

火棉胶揭膜法 203

细胞化学法 204

Fuelgen反应显示DNA方法 204

甲绿－派郎宁显示DNA和RNA 206

吖啶橙荧光染色法显示DNA和RNA 207

2,2－二羟基－6,6－二萘基二硫化物（DDD）法显示硫氢基 208

过碘酸Schiff反应显示糖原和其它多糖 209

苏丹黑B显示脂类（McMaus改良法） 210

碱性磷酸酶的显示 211

酸性磷酸酶的显示 213

三磷酸腺苷酶显示法 214

葡萄糖－6－磷酸酶显示法 216

细胞色素氧化酶 217

琥珀酸脱氢酶显示法（简称SDH） 218

乳酸脱氢酶（LDH） 219

葡萄糖－6－磷酸脱氢酶 219

原理 220

电子显微镜观察法 220

原位包埋法 221

脱钙卵壳膜包埋法 223

聚苯乙烯盖片培养 225

离心分离包埋法 225

21活细胞观察法 226

培养瓶细胞直接摄影 226

活细胞相差显微摄影 227

缩时显微摄电影术 229

拍摄用培养细胞的准备 230

显微摄影装置 230

暗室设施 230

缩时间隔确定 232

拍摄程序 233

22细胞遗传学方法 234

性染色质检查法 234

原理 234

常用显示染色体方法 234

碳酸复红显示法 235

硫堇染色法 235

原理 236

染色体显示法 236

Y．染色质显示法 236

染色体显带 242

显Q带法 244

胰酶－Giemsa显G带法 244

显G带法之二 245

姐妹染色单体分化染色 245

微核试验用细胞 248

原理 248

微核试验 248

染色体脆性位点检测 248

微核试验方法 249

微核的标准 249

23细胞融合法 250

原理 250

方法 251

仙台病毒诱导细胞融合法 251

聚乙二醇（PEG）诱导细胞融合法 252

杂种细胞的选择 253

细胞行为特性的选择 256

染色体的分离 256

24非程序DNA合成 257

原理 257

UDS用细胞 258

UDS的测定 258

放射自显影法 258

细胞 259

本底 259

药物特性 259

影响UDS因素 259

液闪计数法 259

25细胞脱核法 260

原理 260

脱核程序 262

26同位素标记自显影术 263

原理 263

技术方法（脉冲式标记） 265

27细胞同步化法 266

细胞分裂相脱离法 267

秋水仙素阻抑法 268

离心分离同型细胞法 268

胸腺嘧啶核苷双阻断法 269

28细胞分离技术 269

梯度沉降法 270

原理 270

方法 271

束流荧光分离细胞法 274

细胞自发转化 276

基本概念和原理 276

细胞转化与恶变 276

29体外培养细胞的转化 276

第五部分 组织培养技术的应用 276

人工诱发细胞恶性转化 277

细胞转化基本过程 277

诱发 277

DNA的损伤与修复 277

发展和表现 278

转化实验方法 278

细胞 278

人工诱发转化实验程序 280

转化细胞的检测 283

30细胞培养在癌基因研究中的应用 284

基本原理 285

关于癌基因 285

技术方法 285

总DNA的提取 285

转染 287

共转染 289

受体细胞的选择 290

细胞选择 291

31组织培养药物测试 291

药物剂量 292

测试程序 293

观测指标 294

32在杂交瘤技术中的应用 295

原理 296

杂交瘤细胞的制备 298

克隆化培养 303

抗体的检测 305

单克隆抗体的大量制备 307

缩写名词 308

第六部分 附录 308

常用名词译名和释义 310

国内已建人和动物的一些主要细胞系（或株） 313

国际常用细胞系（或株） 317

常用人工合成培养基 319

常用液体配制技术和参考资料 320

实验常用度量衡 323

酒精稀释表 324

缓冲液 325

离心速度和离心力换算表 326

参考资料 326