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目 录 1

第一章糖类 1

一、还原糖的测定 1

（一）斐林试剂热滴定法 1

（二）斐林试剂比色法 3

（三）蒽酮比色法 4

（四）纳尔逊－索模吉试剂比色法 4

（五）金氏（King）定糖法 5

（六）哈丁试剂滴定法 6

（七）3,5－二硝基水杨酸目测法 7

（八）3,5－二硝基水杨酸比色法 8

二、含醛基糖的测定 9

（一）次亚碘酸滴定法 9

（二）邻甲苯胺比色法 11

三、葡萄糖的测定 12

（一）葡萄糖氧化酶测定法 12

（二）在硅胶G薄层上的分离鉴定及定量测定 13

四、果糖的测定——钼酸铵比色法 14

五、蔗糖的测定——Roe比色法 15

六、五碳糖的测定——苔黑酚比色法 16

七、氨基葡萄糖的测定 16

（一）生物材料的预处理的一般方法 17

八、生物材料中糖类物质的分析 17

（二）苹果中糖类的分离鉴定及定量测定 19

（三）小麦籽粒中可溶性糖的鉴定及定量测定 21

参考资料 22

第二章脂质类 23

第一节脂肪化学性质的测定 23

一、碘值 23

二、皂化值 25

三、不皂化值 27

四、酸值 29

第二节粗脂肪的定量测定 30

第三节血清中脂质类的测定 31

一、血清β－脂蛋白 31

二、血清胆固醇 32

（一）邻苯二甲醛法 32

（二）改良Abell氏法 34

三、血清甘油三酯 35

（一）直接法 35

（二）快速法 36

四、血清脂蛋白电泳 38

（一）醋酸纤维薄膜脂蛋白电泳 38

（二）聚丙烯酰胺脂蛋白电泳 40

参考资料 42

第三章蛋白质类 43

第一节氨基酸和蛋白质的定性测定 43

一、氨基酸的定性测定 43

（一）氨基酸的一般显色反应 43

（二）个别氨基酸的显色反应 46

二、蛋白质的定性测定 49

（一）蛋白质的一般显色反应 49

（二）复合蛋白质的显色反应 51

（一）茚三酮法 52

一、氨基酸的一般定量测定 52

第二节氨基酸的定量测定 52

（二）三硝基苯磺酸法 54

（三）铜复合物紫外吸收法 57

（四）邻苯二甲醛法 58

（五）甲醛滴定法 59

（六）非水溶液滴定法 60

（七）量气法 62

（八）酰胺氮测定法 65

二、个别氨基酸的定量测定 68

（一）赖氨酸的测定 68

（二）色氨酸的测定 70

（三）亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸的联合测定 74

（四）苯丙氨酸的测定 77

（五）酪氨酸的测定 79

（六）脯氨酸的测定 80

（七）羟脯氨酸的测定 81

（八）胱氨酸的测定 83

（九）谷氨酸的测定 84

（十）谷氨酰胺的测定 86

（十一）巯基的测定 88

（一）总氮量的测定法 89

一、克氏定氮法 89

第三节蛋白质的定量测定 89

（二）微量克氏定氮－茚三酮法 92

二、福林－酚试剂法 93

（一）Lowry基本法 93

（二）在有干扰物质存在下的改良测定法 94

（三）简易测定法 95

三、双缩脲法 95

（一）双缩脲常量法 96

（二）双缩脲半微量法 96

四、紫外吸收法 97

（一）280毫微米的光吸收法 97

（二）280毫微米和260毫微米的吸收差法 98

（三）215毫微米和225毫微米的吸收差法 99

（四）肽键测定法 99

五、考马斯亮蓝染色测定法 99

第四节蛋白质的末端测定 101

一、N－末端测定——二甲氨基萘磺酰氯法 101

二、C－末端测定——肼解法 105

参考资料 108

第四章核酸类 110

第一节核酸的分离提取 110

（一）小牛胸腺DNA的提取 111

一、DNA的提取 111

（二）微生物DNA的提取 112

二、RNA的提取 113

（一）肝脏RNA的提取 113

（二）酵母RNA的提取 114

第二节核酸及其组分的定量测定 115

一、定磷法 115

（一）酸解脱磷法 115

（二）过碘酸氧化脱磷法 117

二、定糖法 118

（一）RNA的定量测定 118

（二）DNA的定量测定 120

三、紫外吸收法 122

（一）标准值测定法 123

（二）比消光系数法 124

（三）克分子消光系数法 125

（四）克原子磷消光系数（8(P)）法 125

四、荧光法 126

（一）微量测定寡核糖核苷酸3′－末端 126

（二）微量测定双链核酸 127

（一）化学方法 128

（二）物理方法 128

五、DNA中GC克分子百分率［（G+C）％］的测定 128

第三节核酸的水解 130

一、化学水解法 130

（一）DNA的水解 130

（二）RNA的水解 130

二、酶促水解法 131

第四节核酸水解产物的分离鉴定 131

一、层析分离鉴定 131

（一）纸层析法 131

（二）薄层层析法 135

（三）离子交换树脂柱层析法 139

（一）纸电泳分离核苷酸 144

二、电泳分离鉴定 144

（二）琼脂糖凝胶电泳分离核苷酸 145

（三）琼脂糖凝胶圆盘电泳分离ECoRI酶解λDNA片段 146

第五节组织中核酸含量的测定 147

一、组织材料的预处理 147

（一）Schneider测定法（酸处理法） 148

（二）Schmidt和Thannhauser法（碱处理法） 148

二、大白鼠肝组织核酸含量的测定 148

附录常用核酸类物质的常数表 151

参考资料 153

一、维生素A比色测定法 154

第五章维生素类 154

二、维生素B1（硫胺素）荧光测定法 157

三、维生素B2（核黄素）荧光测定法 159

四、维生素B6（盐酸吡哆醇）比色测定法 161

五、维生素C（抗坏血酸）定量测定法 162

（一）2,6二氯酚靛酚滴定法 162

（二）2,4二硝基苯肼法 163

（三）碘滴定法 165

六、维生素D比色测定法 166

参考资料 168

一、甾类激素——直接紫外分光光度法 169

第六章激素类 169

二、甾酮——异菸肼反应法 172

三、甾酮——2,4－二硝基苯肼反应法 174

四、次甲基酮－碱性二硝基苯反应法 176

五、17,21－二羟基皮（甾）醇——盐酸苯肼反应法 179

六、α－醇酮基——高碘酸氧化反应法 181

七、α－醇酮基——四氮唑盐反应法 183

八、甾类酯类——碱性羟胺反应法 184

九、雌激素——铁－酚试剂反应法 185

十、尿中雌（甾）酮、雌（甾）二醇、雌（甾）三醇——Brown测定法 187

十一、尿中孕（甾）二醇——Kiopper测定法 190

参考资料 192

第七章辅酶类 193

一、辅酶Ⅰ——醇脱氢酶法 193

二、还原型辅酶Ⅰ——乳酸脱氢酶法 195

三、辅酶Ⅱ——葡糖－6－磷酸脱氢酶法 196

四、还原型辅酶Ⅱ——谷胱甘肽还原酶法 198

五、黄素腺嘌呤二核苷酸——光吸收法 199

六、硫胺素焦磷酸——纸层析法和光吸收法 200

七、磷酸吡哆醇——纸层析法和光吸收法 200

八、磷酸吡哆胺——纸层析法和光吸收法 201

九、辅酶A——乙酰化酶－磺胺法 202

参考资料 204