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第一部份 光学显微镜制片技术 1

引 言 1

目 录 1

第一章组织的固定 3

Ⅰ．细胞的结构 3

Ⅱ．固定的基本原则 5

一、关于取材 6

二、关于固定 6

Ⅲ．固定液的性质 7

第二章简单固定液 10

一、乙醇 10

二、甲醛 11

三、醋酸 12

四、苦味酸 13

六、重铬酸钾 14

七、氯化汞 14

五、铬酸 14

八、四氧化锇 15

第三章混合固定液 17

一、Müller液 17

二、Flemming液 17

三、Carnoy液 18

四、Altmann液 18

五、Zenker液 19

七、Bouin液 20

六、Orth液 20

八、Helly液 21

九、Stieve液 22

十、Aoyama液 23

十一、Houseby液 23

十二、Gilson液 24

十三、Danchakoff液 24

十四、Champy液 24

十六、Bensley液 25

十七、Feulgen液 25

十五、Lovdowsky液 25

十八、Locour液 26

十九、Susa液（Heidenhain） 26

二十、Susa液 26

二十一、Hermann液 27

二十二、乙醇－甲醛固定液（A.F.） 27

二十三、Gomori 1-2-3液 27

二十六、Hermann液 28

二十七、Sanfelice液 28

二十五、Dafano液 28

二十四、Bouin-Duboscq液 28

二十八、Rossman液 29

二十九、Tellyesniczky Formal-Alcohol液 29

三十、Methacarn液 29

第四章脱钙法 30

一、脱钙过程 30

二、脱钙液 31

三、脱钙兼固定方法 33

四、脱钙兼脱水方法 34

第五章组织脱水 35

一、脱水 35

二、脱水剂 35

第六章透明 38

第七章组织块的包埋过程 39

一、石蜡包埋法 39

二、石蜡快速包埋法 42

三、火棉胶包埋法 42

四、明胶包埋法 43

五、甲基丙烯酸酯包埋法 45

六、GMA和Quetol 523包埋法 46

第八章切片法 48

一、石蜡切片法 48

二、火棉胶切片法 49

三、冰冻切片法 50

第九章组织切片的染色 51

Ⅰ．染色剂 51

Ⅲ．细胞核的染色方法 54

Ⅱ．细胞质的染色方法 54

一、苏木精染液染色法 55

二、Unna碱性甲烯蓝染液染色法 64

三、Unna-Papenhein染液染色法 65

四、Thomas染液染色法 65

五、Feulgen染液染色法 66

六、Breinl三色染液染色法 68

七、Hermann藏红－结晶紫染液染色法 69

八、Mayer乙醇胭脂红染液染色法 70

九、Greracher明矾胭脂红染液染色法 71

十、Baker结晶紫染液染色法 71

十一、Glegg,Clermont和Leblond过碘酸染液染色法 72

十二、比士麦棕染液染色法 73

十三、Schneider酸性胭脂红染液染色法 73

十四、Darrow红染液染色法 73

十五、Thionin-methyl green染液染色法 74

Ⅳ．高尔基体的染色方法 75

一、Romón y Cajal硝酸铀染液染色法 75

十六、Pyronin-methyl green染液染色法 75

二、Da Fano硝酸钴－硝酸银染液染色法 76

三、Aoyama氯化镉－甲醛染液染色法 77

四、Mann-Kopsch 升汞－锇酸染色法 78

五、Baker染色法 79

六、Beam染色法 79

七、Sevringhaus染色法 80

八、Moliner改良法 82

二、Bensley染色法 83

一、Altmann复红苦味酸染色法 83

Ⅴ．线粒体的染色方法 83

三、Regaud染色法 84

四、Bensley-Cowdry酸性复红－甲绿染色法 85

五、Hetherington品蓝染色法 86

六、Champy-Kul！三色染色法 87

七、Benda染色法 88

八、苯胺复红－碘绿染色法 89

九、Short acid-Fuchsin染色法 90

二、苏丹Ⅳ染色法 91

Ⅵ．脂肪的染色方法 91

一、苏丹Ⅲ染色法 91

三、尼罗蓝染色法 92

四、Leach苏丹黑B染色法 92

五、苏丹黑染色法 93

六、苏丹黑－乙二醇染色法 94

第十章 儿种重要器官的组织的染色方法 96

Ⅰ．肝脏 96

一、Mallory苯胺蓝染色法 96

二、Heidenhain偶氮胭脂红染色法 97

三、碱性复红染色法 98

四、Hortega碳酸银染色法——肝内胆小管的染色 99

Ⅱ．胰脏 99

一、Bensley中性结晶紫染色法 100

二、Bloom胰岛细胞染色法 101

Ⅲ．消化道 102

一、Masson硝酸银染色法 102

二、Hoecke-Sebruyns胃腺细胞鉴别染色法 103

Ⅳ．甲状腺 104

Ⅴ．脑下垂体 105

一、Severinghaus染色法 106

二、Kresazan垂体细胞鉴别染色法 107

Ⅵ．神经组织 108

一、神经细胞核染色法 109

二、神经轴染色法 111

三、神经髓鞘染色法 114

四、神经胶质染色法 117

五、神经末梢 123

六、大脑髓磷脂染色法 128

七、松果体染色法 129

Ⅶ．肌肉组织 130

一、Masson三色染色法 131

二、Best胭脂红染色法 132

第十一章血液标本的制备 134

一、推制血膜方法 134

二、血涂片的染色方法 135

三、网织红细胞染色方法 138

第十二章骨髓标本的制备 140

一、涂片法 140

二、切片法 140

第二部份 电子显微镜超薄切片技术 142

第十三章 电子显微镜超薄切片标本的制备 142

Ⅰ．固定 142

Ⅱ．固定液的配制 145

一、四氧化锇固定液 145

二、戊二醛固定液 149

三、多聚甲醛固定液 151

四、高锰酸钾固定液 152

五、高锰酸钠固定液 153

六、高锰酸镧固定液 154

七、丙烯醛固定液 154

八、混合固定液 154

一、胚胎的固定方法 157

Ⅲ．浸渍固定 157

二、神经组织的固定方法 158

三、精细胞的固定方法 158

四、精子的固定方法 159

五、皮肤的固定方法 160

六、肝组织的固定方法 160

七、心肌的固定方法 161

八、游离细胞的固定方法 161

九、单层培养细胞的固定方法 162

十一、绿藻的固定方法 163

十、肥大细胞的固定方法 163

十二、细菌的固定方法Ⅰ（锇酸固定法） 164

十三、细菌的固定方法Ⅱ（戊二醛－锇酸固定） 165

Ⅳ．分离细胞和细胞器的固定 165

一、分离肝细胞的固定 165

二、细胞核的固定 166

三、染色体的固定Ⅰ 167

四、染色体的固定Ⅱ 168

五、高尔基体的固定 169

六、微粒体的固定Ⅰ（从胰脏分离总微粒体） 170

七、微粒体的固定Ⅱ 171

第十四章脱水 173

第十五章包埋 176

一、浸透 176

二、包埋剂 176

三、环氧树脂包埋剂 178

四、环氧树脂的室温包埋法 188

五、环氧树脂的快速包埋法 188

六、聚脂树脂包埋剂 189

七、水溶性环氧树脂包埋剂 192

八、甲基丙烯酸酯包埋剂 194

九、水溶性甲基丙烯酸酯包埋剂 195

第十六章超薄切片 197

一、切片刀的制作 197

二、刀槽的制作 200

三、修理组织块 202

四、切片刀及组织块的装置 203

五、厚切片 205

六、超薄切片 207

第十七章染色 216

一、铅染色 217

二、铀染色 222

三、其他染液 224

第十八章厚切片的染色 233

一、溶脱环氧树脂的溶剂 233

二、不脱环氧树脂的切片染色法 235

三、脱去树脂后染色法 240

第十九章支持膜的制备 244

一、火棉胶膜的制备 244

二、Formvar膜的制备 245

三、碳膜的制备 247

四、塑料基底碳膜的制备 247

第三部份光学显微镜放射自显影技术 249

第二十章 光学显微镜放射自显影 249

Ⅰ．引言 249

一、硬组织放射自显影标本的制备 251

Ⅱ．大体放射自显影的制备 251

二、整个小动物的切片及放射自显影标本的制备 252

三、自显过程（即“曝光”） 253

四、显影和定影 253

五、大体放射自显影标本制备应注意之点 254

六、封片 254

Ⅲ．液态乳胶放射自显影的制备 254

一、组织的制备 254

三、核子乳胶的应用 257

二、核子乳胶的选择 257

四、自显过程 259

五、显影和定影 259

六、“后染” 260

Ⅳ．剥落胶片法 261

一、组织的制备 261

二、乳胶膜的应用 262

三、自显过程 263

五、染色 264

四、显影和定影 264

Ⅴ、接触法 265

一、生物材料的制备 265

二、核子乳胶板的应用 265

三、显影和定影 265

四、结果的观察 266

Ⅵ．贴附法 266

一、湿贴法 266

二、干贴法 267

三、显影和定影 267

四、染色 268

Ⅶ．涂片法 268

Ⅷ．培养细胞的放射自显影制备方法 268

一、单层培养细胞的制备 269

二、培养细胞的切片法 270

Ⅸ．组织块离体标记的放射自显影制备方法 270

第二十一章 电子显微镜放射自显影 272

Ⅰ．引言 272

第四部份电子显微镜放射自显影技术 272

Ⅱ．电子显微镜放射自显影的基本原理 274

一、核子乳胶的一般特性 274

二、核子乳胶对带电粒子的反应 275

Ⅲ．雾点的产生及其消除方法 279

第二十二章灵敏度和分辨率 281

一、灵敏度 281

二、分辨率 283

第二十三章 电子显微镜放射自显影标本的制备 292

一、放射性同位素的应用 293

二、生物材料的处理 301

第二十四章核子乳胶膜的制备 304

一、对乳胶膜的要求 304

二、单层乳胶膜的制备 305

第二十五章 自显过程和显影过程 312

一、自显过程的条件 312

二、显影过程 313

三、标本的最后处理 319

附录 323

一、缓冲液的配制 323

二、各种动物所需的生理盐水 331

三、几种生理盐水的配制 331

四、几种常用生物染料的光谱吸收 333

五、细胞核染色剂（碱性染料） 333

六、细胞质染色剂（酸性染料） 334

九、甲基绿的提纯方法 335

八、活体染色剂 335

七、脂肪染色剂 335

十、中性甲醛的配制 336

十一、封片剂 336

十二、光学显微镜切片中几种药剂的脱除方法 337

十三、电子显微镜常用的生物材料包埋剂 339

十四、载玻片的洗涤方法 341

十五、长度、重量及容量 342

参考文献 343

名词对照 349