遗传工程 DNA克隆技术PDF电子书下载

第一章 体外DNA重组技术的酶学 1

1·1限制性核酸内切酶 1

1·2用DNA连接酶连接限制性酶切片段 2

目 录 5

引言 5

1·3通过同聚物的尾端连接DNA 9

第二章质粒运载体 13

2·1 pSC101 13

2·2 ColE1 14

2·3带有抗药性标志的ColE1衍生质粒 15

2·4质粒运载体系统的生物防护 20

2·5含有特异核苷酸顺序的质粒的筛选 22

第三章λ噬菌体运载体 25

3·1 λ噬菌体的生物学 25

3·2噬菌体运载体 28

3·3晚期基因——它们在克隆运载体中的应用 33

3·3·1噬菌体装配 33

3·3·2生物防护 35

3·3·3利用体外包装法提高重组体的回收率 36

第四章克隆DNA在大肠杆菌中的表达 40

4·1用质粒运载体克隆DNA的表达 40

4·1·1大肠杆菌营养缺陷型的互补作用 40

4·1·2新生多肽表达的检测 41

4·1·3脊椎动物基因在大肠杆菌中的表达 43

4·2λ噬菌体启动基因的表达 52

第五章 高等真核生物染色体DNA克隆片段的物理 56

鉴定法 56

5·1克隆的DNA在其染色体源出点上作图 56

5·1·1原位杂交 56

5·1·2体细胞杂交 60

5·2电泳图谱技术 60

5·2·1限制性酶切图谱 60

5·2·2凝胶转移杂交法 63

5·2·3转录体的图谱 66

5·3用电镜作克隆DNA的图谱 68

5·3·1变性图谱 69

5·3·2异源双链图谱 70

5·3·3 RNA同源区的图谱 71

第六章真核系统基因表达的研究途径 80

6·1离体变异 80

6·2表达系统 82

6·2·1酵母中的克隆 82

6·2·2用猿猴病毒40作克隆运载体 85

6·2·3哺乳动物细胞的直接转化 90

6·2·4克隆DNA进入爪蟾卵母细胞的微 91

量注射法 91