分子生物学实验技术PDF电子书下载

第一章 核酸的分离与纯化 1

第一节 核酸分离与纯化的技术路线与原则 1

第二节 DNA的分离制备 4

第三节 质粒的分离与纯化 5

第四节 RNA的分离制备 7

第五节 实验方法 9

实验一 真核细胞染色体DNA的制备 9

实验二 细菌的培养、保存和收集 13

实验三 质粒DNA的提取 16

实验四 组织和细胞总RNA提取（TRIzol法） 19

实验五 核酸的定量 21

第二章 蛋白质的分离与纯化 25

第一节 生物材料的前处理 25

第二节 蛋白质分离与纯化的方法 26

第三节 蛋白质的鉴定 29

第四节 实验方法 30

实验一 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量 30

实验二 Western印迹法检测表达蛋白 34

实验三 免疫荧光法检测重组蛋白 39

第三章 电泳技术 42

第一节 概述 42

第二节 电泳基本原理 43

第三节 影响电泳迁移率的因素 44

第四节 核酸电泳的指示剂与染色剂 46

第五节 不同波长紫外线对EB-DNA复合物的影响 47

第六节 实验方法 48

实验一 琼脂糖凝胶电泳法检测DNA 48

实验二 DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳 50

第四章 DNA重组技术 54

第一节 DNA限制性内切酶酶切技术 54

第二节 DNA重组方法 56

第三节 质粒的转化与细胞转染的方法 58

第四节 DNA重组体的筛选与鉴定 59

第五节 克隆化基因的表达 61

第六节 实验方法 62

实验一 DNA限制性内切酶消化法 62

实验二 DNA分子的体外连接 65

实验三 感受态细胞的制备 69

实验四 细菌的转化 71

实验五 重组质粒的α互补筛选 74

第五章 核酸分子杂交 77

第一节 核酸分子杂交基本原理及分类 77

第二节 核酸分子杂交的基本方法 79

第三节 探针的种类及标记 81

第四节 核酸分子杂交 84

第五节 杂交信号的检测 85

第六节 实验方法 87

实验一 地高辛标记DNA探针 87

实验二 放射性核素32P随机引物延伸标记法 88

实验三 Southern印迹杂交检测HBV-DNA 91

实验四 Northern印迹杂交检测HCV-RNA 95

第六章 聚合酶链反应（PCR）技术 101

第一节 PCR的反应体系 101

第二节 PCR的基本步骤 103

第三节 PCR的衍生技术 104

第四节 PCR技术在医学上的应用 106

第五节 实验方法 109

实验一 PCR检测病原体（试剂盒法） 109

实验二 PCR检测遗传疾病的相关基因 112

实验三 RT-PCR检测基因的表达 116

第七章 蛋白质组学研究技术 120

第一节 蛋白质组学概论 120

第二节 细胞及亚细胞样品制备方法 120

第三节 双向电泳技术 123

第四节 蛋白质鉴定技术 127

第五节 实验方法 127

实验一 大肠埃希菌双向凝胶电泳图谱的建立 127

实验二 真核酵母细胞双向图谱的建立 132

第八章 生物芯片技术与应用 137

第一节 生物芯片技术原理 137

第二节 芯片的构建及操作流程 138

第三节 芯片技术的应用 140

第九章 细胞凋亡与检测技术 142

第一节 细胞凋亡概述 142

第二节 凋亡细胞的形态和生化特征及检测方法 142

第三节 流式细胞术在细胞凋亡研究中的应用 148

附录一 分子生物学实验室常用仪器的使用方法与保养 154

附录二 实验用玻璃器皿的准备 161

附录三 常用缓冲液的配制 162

附录四 常用单位的换算 163

附录五 常用DNA分子量标准参照物 164

附录六 与DNA凝胶电泳有关的数据 165