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目 录 1

第一篇 电子显微镜的原理和使用 1

第一章绪论 1

第二章电子显微镜的基本原理 4

第一节光学显微镜的分辨极限 4

第二节电子显微镜的理论基础 6

第三节电子与固体样品的相互作用 11

第三章透射电子显微镜的结构、原理和使用 13

第一节透射电镜的结构 13

第二节透射电镜的成像原理 21

第三节透射电镜的使用与调整 23

第四章扫描电子显微镜的结构、原理和使用 27

第一节扫描电镜的结构 27

第二节扫描电镜的工作原理 31

第三节扫描电镜的使用 34

第四节扫描透射电镜 36

第一节 X射线显微分析的基本原理 38

第五章X射线显微分析技术 38

第二节X射线显微分析仪 41

第三节分析方法及应用 45

第二篇 电子显微镜生物样品制备技术 48

第六章超薄切片技术 48

第一节载网和支持膜 48

第二节超薄切片的制作 52

第二节负染样品的制备 68

第一节负染的原理 68

第七章负染色技术 68

第三节负染色液 70

第四节负染的操作方法 71

第五节负染色中应注意的问题 71

第八章金属投影和复型技术 76

第一节金属投影技术 76

第二节复型技术 80

第九章扫描电子显微镜的生物样品制备技术 83

第一节扫描电镜样品制备的基本方法 83

第二节样品的制备与观察 90

第十章电子显微镜的冷冻制样技术 93

第一节冷冻固定原理及其方法 94

第二节冷冻干燥技术 97

第三节冷冻取代技术 98

第四节冷冻超薄切片技术 98

第五节冷冻断裂复型技术 102

第六节冷冻制样的安全规则 104

第一节未标记特异抗体与悬浮态抗原的直接作用 106

第十一章免疫电子显微镜技术 106

第二节标记抗体与悬浮态或组织内抗原的作用 108

第三节免疫电镜技术的应用 112

第十二章 电子显微镜细胞化学技术 113

第一节酶的细胞化学技术 113

第二节其他生化物质的细胞化学技术 120

第十三章电子显微镜放射自显影技术 123

第一节基本原理 123

第二节放射自显影样品的制备 127

第三节电子显微镜放射自显影图像分析 131

第四节放射性的防护 132

第十四章生物大分子电子显微镜技术 135

第一节蛋白质分子的电镜样品制备 135

第二节核酸分子的电镜样品制备 137

第三篇实验技术 143

第十五章基础实验 143

实验一样品支持膜的制备 143

实验二样品包埋块的制作 144

实验三修块、超薄切片和染色 145

实验四病毒样品的负染色 147

实验五金属投影技术 148

实验六复型技术 150

实验七扫描电镜样品常规制备技术 151

实验八冷冻超薄切片 155

实验九冷冻断裂复型 159

实验十抗原抗体直接免疫反应的电镜样品制备技术 161

实验十一免疫胶体金对组织细胞内抗原的标记染色定位研究 162

实验十二免疫胶体金对悬浮态样品的标记染色 163

实验十三酸性磷酸酶的细胞化学技术 164

实验十四电镜放射自显影技术 164

实验十五DNA的蛋白质单分子展层技术 166

第十六章应用实例 169

一、培养细胞超薄切片的制作 169

二、木材超薄切片的制作 169

三、纸张超薄切片制作 170

四、植物原生质体超薄切片的制作 171

五、细菌的包埋 171

六、真菌菌丝及孢子的包埋 171

七、线虫的固定 172

八、藻类固定 172

九、原生动物固定 173

十、孢子的固定 173

十一、酵母的固定 174

十二、精细胞和精子的固定 174

十四、Hela细胞的固定 175

十三、卵母细胞和卵的固定 175

十五、植物组织的一些特殊固定方法 176

十六、显示微管和微丝的固定 177

十七、感染病毒的植物组织固定 177

十八、浮游单细胞藻类的琼脂平板制备 178

十九、病毒的提纯 178

二十、兔瘟病毒的提纯 180

二十一、浓缩病毒悬液的方法 181

二十二、昆虫病毒的提纯 181

二十四、增加超薄切片反差的铅—铀—铅染色法 183

二十三、负染碳膜法制备病毒结晶状排列的样品 183

二十五、超薄切片的铀—铅—铜选择性染色法 184

二十六、金藻鳞片花纹的TEM观察 184

二十七、造纸填料、颜料和胶料的制备 184

二十八、天然橡胶与塑料共混相容性的电镜观察 185

二十九、免疫胶体金溶液的制备 186

三十、芜菁花叶病毒的免疫电镜观察 188

三十一、亚细胞钙离子定位的锑酸盐沉淀技术 188

三十三、细胞色素氧化酶的定位 189

三十二、三磷酸腺苷酶（ATPase）的定位 189

三十四、过氧化物酶的定位 190

三十五、过氧化氢酶的定位 190

三十六、葡萄糖－6－磷酸的定位 191

三十七、显示碱性蛋白的氨银反应 191

三十八、显示DNA的孚尔根——六亚甲四胺银染色法 192

三十九、染色质核小体的透射电镜样品制备 192

四十、手工分离细胞核DNA的展开法 193

四十一、电镜图像的立体对照片制作和观察 193

四十二、小麦草纤维细胞木素分布情况的能谱测定 194

四十三、原生质体的扫描电镜观察 196

四十四、薰蒸固定真菌的扫描电镜观察 196

四十五、线虫扫描电镜样品的制备 197

四十六、池塘底泥中轮虫冬卵的扫描电镜观察 197

四十七、大豆染色体的扫描电镜观察 197

四十八、花粉表面形态的扫描电镜观察 198

四十九、SPA菌体免疫电镜法检测兔瘟病毒 198

五十、病毒血凝性的扫描电镜观察 198

五十二、植物材料的冷冻割断扫描电镜样品制备 199

五十一、血细胞E花环电镜样品制备与观察 199

五十三、酵母菌苯乙烯割断扫描电镜观察 200

五十四、扫描电镜观察土壤有机—无机复合体及微团聚体的方法 200

五十五、肾结石的扫描电镜观察 201

五十六、扫描电镜观察石蜡切片的方法 201

五十七、扫描电镜连续观察长毛发的方法 201

五十八、微小血管的扫描电镜制备方法 201

五十九、鱼类耳石日轮超微结构的扫描电镜观察 202

六十、木材立方体扫描样品制备技术 202

六十一、扫描电镜样品的四氧化锇—硫卡巴肼导电染色法（OTOTO法） 203

六十二、扫描电镜样品的鞣酸—四氧化锇导电染色法（TAO法） 203

六十三、减压蒸馏法提纯戊二醛 204

六十四、免疫酶标记技术对杂交瘤细胞内免疫球蛋白分布的研究 204

六十五、免疫铁蛋白标记技术对烟草蚀纹病毒TEV及其细胞内含体的研究 205

名词对照 207

参考文献 215

图版说明 221