基因克隆和DNA分析 中文版PDF电子书下载

第一部分 基因克隆和DNA分析的基本原理 1

目录 1

第1章 为什么说基因克隆与DNA分析非常重要 3

1.1 遗传学的早期发展 3

1.2 基因克隆和聚合酶链反应（PCR）的出现 3

1.3 什么是基因克隆 4

1.4 什么是PCR 5

1.5 为什么基因克隆和PCR如此重要 7

1.6 如何使用这本书 10

参考文献 11

2.1 质粒 12

第2章 基因克隆的载体——质粒和噬菌体 12

2.2 噬茵体 16

参考文献 23

第3章 从活细胞中纯化DNA 24

3.1 全细胞DNA的制备 24

3.2 质粒DNA的制备 32

3.3 噬菌体DNA的制备 38

参考文献 43

第4章 DNA纯化后的利用 44

4.1 DNA操作酶的范围 44

4.2 切割DNA的酶——限制性内切酶 50

4.3 连接——将DNA分子连接到一起 62

参考文献 70

第5章 将DNA引入活细胞 71

5.1 转化——使细菌细胞获取DNA 73

5.2 重组体的鉴定 76

5.3 将噬茵体DNA引入细菌细胞 80

5.4 重组噬菌体的鉴别 83

5.5 非细菌细胞的转化 84

参考文献 86

第6章 大肠杆菌的克隆载体 87

6.1 基于大肠杆菌质粒的克隆载体 87

6.2 基于M13噬菌体的克隆载体 93

6.3 基于λ噬菌体的克隆载体 99

6.4 λ载体和其他高容量的载体使基因组文库得以建立 105

6.5 其他细菌的克隆载体 106

参考文献 106

第7章 真核生物的克隆载体 107

7.1 酵母和其他真菌的载体 107

7.2 高等植物的克隆载体 113

7.3 动物的克隆载体 121

参考文献 125

第8章 怎样获得特定基因的克隆 126

8.1 筛选的难题 126

8.2 直接筛选目的基因 128

8.3 从基因文库中鉴定克隆 130

8.4 鉴定克隆的方法 133

参考文献 143

第9章 聚合酶链反应（PCR） 145

9.1 PCR简介 145

9.2 PCR的更多细节 147

9.3 Tap聚合酶的错误率问题 155

参考文献 156

第二部分 基因克隆和DNA分析在研究中的应用 157

10.1 如何定位一个基因 159

第10章 基因的位置和结构的研究 159

10.2 DNA测序——预测基因的结构 164

参考文献 173

第11章 基因表达和功能的研究 174

11.1 克隆基因转录的研究 174

11.2 基因表达调控的研究 181

11.3 鉴定和研究克隆基因的翻译产物 188

参考文献 196

第12章 基因组研究 198

12.1 基因组学——怎样进行基因组测序 198

12.2 后基因组学——试着理解基因组的序列 208

12.3 转录物组和蛋白质组的研究 211

参考文献 215

第三部分 基因克隆和DNA分析在生物技术中的应用 217

第13章 克隆基因的表达 219

13.1 在大肠杆菌中的外源基因表达载体 221

13.2 在大肠杆菌中表达重组蛋白存在的问题 228

13.3 真核细胞中重组蛋白的表达 230

参考文献 234

第14章 基因克隆和DNA分析在医学中的应用 236

14.1 重组药物的生产 236

14.2 人类疾病相关基因的识别和鉴定 244

14.3 基因治疗 248

参考文献 250

15.1 植物基因工程中的基因添加 252

第15章 基因克隆和DNA分析在农业中的应用 252

15.2 基因消减 257

15.3 转基因植物的问题 261

参考文献 263

第16章 基因克隆和DNA分析在法医学中的应用 264

16.1 利用DNA分析鉴定犯罪嫌疑人 264

16.2 利用DNA指纹图谱分析血缘关系 267

16.3 通过DNA分析进行性别鉴定 269

参考文献 271

术语表 272

索引 283