现代实用细胞与分子生物学实验技术PDF电子书下载

上篇 细胞学与组织学技术 3

第一章 细胞培养方法 3

第一节 细胞培养的基本操作和要求 3

一、细胞培养实验室的基本设备 3

二、细胞培养的准备 4

三、细胞的原代培养 5

四、细胞的传代培养 7

五、细胞的冻存和复苏 8

第二节 各种细胞的特殊培养方法 9

一、人皮肤成纤维细胞培养 9

二、人外周血淋巴细胞短期培养 10

三、琼脂培养法 12

四、血管平滑肌细胞培养 13

五、血管内皮细胞培养 15

六、大鼠腺垂体细胞的培养 17

二、不锈钢金属网格法 19

一、表玻皿器官培养法 19

第三节 器官培养方法 19

三、Wolff培养法 20

四、扩散盒培养法 20

第四节 神经细胞及组织培养 21

一、概述 21

二、神经组织培养与其他组织培养的差异 22

三、神经组织细胞培养的简要步骤 23

第五节 干细胞的分离培养与纯化 25

一、胚胎干细胞的分离培养与纯化 25

二、神经干细胞的分离培养与纯化 31

三、造血干细胞的分离培养与鉴定 33

第二章 染色体制作技术 56

第一节 染色体的制备 56

第二节 常用染色体显带技术 58

一、Q带 58

四、R带 59

三、C带 59

二、G带 59

五、高分辨显带技术 60

第三节 染色体的特殊染色 61

一、着丝点免疫组化染色 61

二、端粒酶染色 61

第二章 附录染色体制作所需试剂的配制 63

第一节 组织制片技术 66

一、取材与固定 66

第三章 组织制片技术与细胞化学技术 66

二、石蜡包埋切片制作程序 69

三、常用染料和染色方法 71

四、树脂包埋光镜切片技术 74

五、恒冷箱切片机制片技术 75

六、整封制片技术 76

第二节 常用组织化学染色方法 78

一、糖原染色方法 78

三、酶组织化学染色方法 79

二、核酸染色技术 79

四、细胞凋亡检测技术 83

第三节 电镜细胞化学技术 86

一、基本原理 86

二、样品制备 87

三、常用的电镜酶细胞化学方法 87

第四章 免疫细胞化学技术 91

第一节 免疫细胞化学的免疫学及组织细胞学基础 92

一、抗原 92

二、抗体 93

三、补体系统 97

四、标记物 98

五、抗体的制备和配制 98

六、组织材料的处理(取材) 99

七、细胞和组织的固定 101

八、组织切片技术 104

九、免疫染色 106

十、对照设置 108

十一、免疫细胞化学结果的判断 109

第二节 免疫荧光细胞化学技术 110

一、免疫荧光细胞化学的原理 110

二、荧光抗体 112

三、荧光免疫细胞化学染色方法 115

第三节 酶免疫细胞化学技术 120

一、酶标抗体法 120

二、非标记抗体酶法 126

三、结果分析 131

四、免疫组织化学的几种特殊应用 136

第四节 亲和免疫细胞化学技术 140

一、生物素—抗生物素免疫细胞化学技术 140

二、葡萄球菌蛋白A 145

三、凝集素 147

一、免疫金技术发展史 154

第五节 免疫金银及铁标记技术 154

二、溶胶的基本概念 155

三、免疫胶体金银细胞化学染色的固定剂选择 156

四、光镜免疫金银细胞化学技术 157

第四章 附录免疫细胞化学常用试剂介绍 163

第五章 原位杂交组织化学技术 177

第一节 原位杂交组织化学技术的基本原理和方法 177

一、基本原理 177

二、基本方法 178

第二节 核酸探针的种类、制备及标记 184

一、特异性目的核酸(或基因)的制备 184

二、目的核酸的扩增 184

三、核酸探针的放射性核素标记 184

四、核酸探针的非放射性标记 186

第三节 寡核苷酸探针的制备和标记 190

第四节 cRNA探针在原位杂交组织化学(ISHH)中的应用 191

一、核素标记cRNA探针在ISHH中的应用 191

二、生物素标记cRNA探针在ISHH中的应用 193

三、地高辛标记cRNA探针的应用 194

第五节 DNA及寡核苷酸探针在原位杂交组织化学中的应用 196

一、DNA探针的应用 196

二、寡核苷酸探针的应用 200

第六节 原位杂交组织化学与免疫细胞化学结合法 201

一、核素原位杂交组化与免疫组化PAP法的联合程序 201

二、非核素原位杂交组化与免疫组化联合法 202

第七节 原位杂交细胞化学技术的一些新进展 204

一、荧光原位杂交技术 204

二、肽—核酸原位杂交细胞化学技术 209

第五章 附录一 原位杂交组织化学常用试剂及处理 210

第五章 附录二 全血细胞培养染色体技术常用试剂配制 220

第六章 电子显微镜技术 222

第一节 透射电镜 222

一、透射电镜的基本原理 222

二、超薄切片技术 223

三、观察及记录 230

第二节 扫描电镜技术 232

一、扫描电镜概况 232

二、扫描电镜的生物样品制备 233

三、几种常用的样品制备方法 236

第三节 冷冻蚀刻电镜技术 240

一、物理固定 240

二、快速冷冻方法 241

三、冷冻复型样品制备 242

四、冷冻置换法 243

五、冷冻超薄切片法 244

第四节 免疫电镜技术 245

一、电镜免疫细胞化学技术概述 245

二、免疫铁蛋白技术 249

三、免疫酶细胞化学技术 251

四、免疫电镜胶体金标记法 252

第五节 电镜原位杂交技术 256