生物化学实验 第2版PDF电子书下载

第一部分 生物化学实验的基本要求 1

一、实验的准确性 1

二、实验记录及报告 2

三、实验样品的制备 3

四、实验室规则 3

五、实验室安全及防护知识 4

六、常用仪器使用方法 6

第二部分 生物化学基本实验技术 13

第一节 分光光度技术 13

一、基本原理 13

二、测量方法 13

三、仪器介绍 14

实验一3，5-二硝基水杨酸（DNS）法测定还原糖 19

实验二 双缩脲法测定蛋白质浓度 21

实验三Folin-酚试剂法测定蛋白质浓度 23

实验四 考马斯亮蓝染色法测定蛋白质浓度 25

实验五 紫外分光光度法测定蛋白质浓度 27

第二节 层析技术 28

一、基本原理 28

二、操作方法 31

实验一 凝胶层析测定蛋白质的相对分子质量 34

实验二 氨基酸的分离鉴定——纸层析 36

实验三 离子交换层析分离混合氨基酸 38

实验四 糖的薄层层析 40

第三节 电泳技术 42

一、基本原理 42

二、几种常见的电泳方法 44

实验一 血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳 49

实验二 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 52

实验三SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的相对分子质量 54

实验四 等电聚焦电泳测定蛋白质等电点 57

第四节 离心技术 60

一、基本原理 60

二、离心机的主要构造和类型 62

三、制备性超速离心的分离方法 63

四、离心操作的注意事项 65

实验一 离心机的使用 67

实验二 植物基因组DNA的提取 68

第三部分 生物化学实验 70

实验一 柑橘皮果胶的提取及果冻的制备 70

实验二 糖的颜色反应 72

实验三 酸价的测定 74

实验四 碘值的测定 76

实验五 皂化价的测定 78

实验六 粗脂肪含量的测定——索氏抽提法 79

实验七 蛋白质及氨基酸的呈色反应 81

实验八 蛋白质的等电点测定和沉淀反应 88

实验九总氮量的测定——凯氏（Kjeldahl）定氮法 92

实验十 从牛奶中提取酪蛋白 97

实验十一 血糖浓度的测定 99

实验十二 酵母RNA的分离及组分鉴定 102

实验十三 地衣酚显色法测定RNA含量 104

实验十四 质粒DNA的提取、酶切与鉴定 106

实验十五 二苯胺显色法测定DNA含量 110

实验十六 菜花（花椰菜）中核酸的分离 112

实验十七 核酸浓度测定——紫外线（UV）吸收法 113

实验十八 酶的特性 114

实验十九 根据底物浓度和酶反应速度之间的关系求米氏常数Km 118

实验二十 尿液淀粉酶活力测定（Winslow法） 122

实验二十一 血清谷丙转氨酶（ALT）活性测定（改良Mohun法） 123

实验二十二 过氧化物酶的作用 126

实验二十三 脯氨酸含量的测定 127

实验二十四 大蒜细胞SOD的提取与分离 129

实验二十五 维生素C含量测定 131

实验二十六 甲醛滴定法测定氨基氮 135

实验二十七 卵磷脂的提取与鉴定 137

实验二十八 脂肪酸的β-氧化 139

实验二十九 肌糖原的酵解作用 141

实验三十PCR扩增目的基因 144

第四部分 附录 149

附录一 试剂的分级、保存与配制 149

附录二 常用蛋白质等电点参考值 152

附录三 常用缓冲液的配制方法 153

附录四 硫酸铵饱和度的常用表 158

附录五 氨基酸的一些理化常数 160

附录六 常用酸碱和固态化合物的一些数据 162

主要参考文献 163