月季耐逆分子育种研究PDF电子书下载

1 导言 1

1.1 月季分子育种现状 2

1.1.1 花色改良 3

1.1.2 花型 4

1.1.3 花香 4

1.1.4 开花期 5

1.1.5 抗逆性 5

1.2 月季耐逆分子育种研究的意义 6

1.2.1 耐逆分子育种研究是国家生态植被修复的需要 7

1.2.2 月季分子育种研究是人们生活品质提高的需要 7

1.2.3 月季耐逆分子育种研究是城市建设发展的需要 7

2 植物耐逆育种的分子机理 9

2.1 植物耐逆相关目的基因 9

2.1.1 植物干旱响应基因 9

2.1.2 植物寒冷响应基因 10

2.2 植物耐逆的转录因子调控 11

2.2.1 转录因子的结构特征 11

2.2.2 转录因子的分类 12

2.2.3 与植物胁迫相关的转录因子的研究进展 12

2.2.4 转录因子在逆境抗性基因工程中的应用 17

2.3 植物DREB转录因子的研究进展 18

2.3.1 5DREB转录因子的特征及作用 19

2.3.2 DREB转录因子及植物抗逆基因工程 21

2.4 植物XET基因的研究进展 24

2.4.1 XET在植物生长机制中的核心地位 24

2.4.2 XET与根系向水性 25

2.5 DREB1和XET在植物耐逆与生长机制中的交叉调控 26

3 植物耐逆分子育种基本技术 28

3.1 分子育种的基本内涵 28

3.1.1 目的基因的分离与鉴定 28

3.1.2 植物表达载体构建 29

3.1.3 受体细胞培养 29

3.1.4 转基因技术 29

3.1.5 外源基因整合表达检测 30

3.2 耐逆相关基因克隆技术 30

3.2.1 耐逆相关基因的电子克隆 31

3.2.2 耐逆相关基因的实验室克隆及序列分析 37

3.2.3 目的基因的序列分析及功能预测 51

3.3 目的基因功能鉴定技术 58

3.3.1 DREB转录因子功能鉴定 58

3.3.2 DREB基因的耐逆功能鉴定 65

3.3.3 MtXET基因功能鉴定 73

4 基因重组技术 74

4.1 基于长引物PCR的分子重组 74

4.1.1 长引物PCR基因剪接 75

4.1.2 长引物PCR基因剪接的策略 79

4.1.3 长引物PCR的分子机制 80

4.2 长引物PCR的应用 83

4.2.1 基因内的片段剪除 84

4.2.2 RNAi发夹结构的构建 84

4.2.3 同向串联基因序列的构建 89

5 月季基因转化受体系统的优化 103

5.1 月季离体培养与植株再生 103

5.1.1 2,4-D、TDZ对月季愈伤形成和体胚发生的影响 103

5.1.2 4-D和TDZ对胚性愈伤形成的影响 104

5.1.3 胚性愈伤的保持与体胚发生 105

5.1.4 光照对月季再生的影响 106

5.1.5 ABA对月季再生的影响 108

5.1.6 月季不同类型体胚的植株再生 110

5.1.7 月季体胚再生的进程 111

5.2 月季转基因体系的优化 113

5.2.1 材料与方法 113

5.2.2 结果 115

5.2.3 讨论 117

6 月季耐逆分子改良研究 119

6.1 月季DREB1C基因转化 119

6.1.1 材料与方法 119

6.1.2 结果 121

6.2 月季DREB1C/XET双基因聚合转化及检测 123

6.2.1 月季双基因聚合转化 123

6.2.2 转化植株分子检测 124

6.2.3 转化植株耐逆性和表型分析 127

6.3 多基因转化应用前景 131

7 结语 132

课题支撑 138

参考文献 139

成果清单 154

附录1 论文中所涉及的分子生物学基本方法 156

附录2 图版 161