生物技术综合实验PDF电子书下载

第一编 课程概述 1

教学目标与要求 1

如何养成良好的实验习惯 1

实验报告撰写要点 2

生物技术实验室安全防护常识 2

生物技术综合实验“基本实验”部分教学总体安排 5

总体实验流程设计 6

第二编 基本实验 7

实验一 斑马鱼总RNA的提取 7

实验二 核酸的检测——琼脂糖凝胶电泳 15

实验三 逆转录PCR（RT-PCR） 20

实验四 质粒的提取 28

实验五 PCR产物的T载体克隆 37

实验六 DNA的酶切、回收及连接 40

实验七 感受态细胞制备及重组质粒的转化 46

实验八 PCR法筛选重组克隆 51

实验九 重组DNA在大肠杆菌中的诱导表达 55

实验十 金属螯合亲和层析分离蛋白质 61

实验十一 蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定与分析 65

实验十二 Western印迹鉴定目标蛋白 71

第三编 备选、示范性和探索性实验 75

实验一 酿酒酵母基因组DNA的提取 75

实验二 酿酒酵母和植物总RNA的提取和纯化 78

实验三 真核生物mRNA的提取和纯化 81

实验四 cDNA文库的构建 86

实验五 菌落原位杂交鉴定重组子（探索性） 99

实验六 分子筛层析法除盐 103

实验七 培养细胞总蛋白的双向聚丙烯酰胺电泳 105

实验八 细胞色素C的提取、纯化及测定 109

实验九 重组棒杆菌的赖氨酸合成代谢控制 114

实验十 正交试验法优化工程菌发酵培养基配方 119

实验十一 工程菌的自控发酵罐发酵 123

附录 128

附录一 实验室常用试剂、缓冲液的配制方法 128

附录二 核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法 132

附录三 核酸、蛋白质杂交用相关试剂、缓冲液的配制方法 134

附录四 菌种的分离、纯化培养及保藏 136

附录五 各种抗生素的贮存溶液及其工作浓度 138

附录六 实验室常用培养基的配制方法 139

附录七 核酸和蛋白质的各种换算 142

附录八 部分实验设备等使用操作说明 143

附录九 限制性内切酶及其使用 146

附录十 常用核酸及蛋白质分子量标准 148

缩略语解析 152