精编分子生物学实验技术PDF电子书下载

第一章 PCR技术 1

第一节 RT-PCR 1

第二节 实时定量PCR 13

第二章 RNA干扰技术 19

第三章 MicroRNA研究方法 29

第四章 长链非编码RNA研究方法 39

第一节 长链非编码RNA概述 39

第二节 RNA pull-down鉴定RNA-蛋白质相互结合 40

第三节 RNA免疫共沉淀技术 44

第五章 CRISPR/Cas9基因编辑技术 48

第一节 SgRNA的设计及打靶效应分析 48

第二节 受精卵注射CRISPR/Cas9系统制备基因编辑动物 53

第六章 重组DNA技术 63

第一节 大肠杆菌感受态细胞的制备 63

第二节 质粒DNA的转化 64

第三节 质粒提取 67

第四节 琼脂糖凝胶电泳检测DNA 68

第五节 凝胶回收DNA 71

第六节 重组DNA的构建 73

第七节 病毒载体介导的重组DNA技术 76

复制缺陷型腺病毒载体的包装 77

慢病毒载体的包装 85

第八节 目的蛋白的原核表达与分离纯化 89

目的蛋白的原核诱导表达 89

目的蛋白的表达检测 92

菌体的细胞破碎 96

镍离子亲和层析纯化 98

DEAE阴离子交换层析 101

凝胶过滤层析 105

第七章 Western-blot技术 110

第一节 蛋白样品制备 110

第二节 蛋白定量 112

第三节 SDS-PAGE电泳 114

第四节 电转移 118

第五节 酶免疫定位 120

第八章 蛋白相互作用筛选及验证 123

第一节 酵母双杂交系统筛选 123

第二节 免疫共沉淀 134

第三节 Pull-down实验 138

第九章 蛋白泛素化检测 142

第十章 转录调控机制研究 149

第一节 转录因子与靶基因相关性分析 150

第二节 靶基因的启动子克隆 151

第三节 报告基因活性分析 153

第四节 DNA-转录因子结合分析 158

第五节 ChIP-Seq技术 164

第十一章 核酸甲基化分析 166

第一节 基因组DNA提取 166

第二节 DNA甲基化分析 169

第三节 RNA甲基化分析 179

第十二章 基因表达谱芯片分析 185

第十三章 蛋白质谱分析 192

第十四章 细胞代谢研究方法 202

第一节 基于Seahorse生物能量分析仪测定糖酵解和线粒体有氧代谢的方法 202

第二节 线粒体呼吸链复合体功能的测定 209

第十五章 相关细胞学技术 222

第一节 细胞冻存 222

第二节 细胞复苏 224

第三节 细胞计数法测定生长曲线 226

第四节 MTT法测定细胞增殖 229

第五节 CCK-8法测定细胞增殖 232

第六节 BrdU法测定细胞增殖 236

第七节 平板克隆形成实验 239

第八节 软琼脂克隆形成实验 241

第九节 Transwell 244

第十节 划痕实验 247

第十一节 细胞周期的测定 249

第十二节 细胞凋亡检测 251

第十三节 脂质体介导的质粒转染 258

第十四节 病毒感染 261

第十六章 相关组织学技术 264

第一节 动物组织取材和固定 264

第二节 临床标本收集方法 267

第三节 免疫组织（细胞）化学 272

第四节 间接免疫荧光 276

第五节 原位杂交技术 280

第十七章 相关常用动物实验 285

第一节 裸鼠移植瘤动物模型 285

第二节 小动物活体成像技术 286

第十八章 分子生物学常用数据库 292

第一节 基因基本信息的获取 292

第二节 基因表达调控分析 298

第三节 基因功能分析 305

第十九章 计算机模拟辅助小分子药物设计 311

第一节 基于药效团模型的虚拟筛选方法 311

第二节 基于分子对接的虚拟筛选 316

第三节 骨架迁越 321

第二十章 常用实验设计和统计方法 325

第一节 完全随机设计分组 325

第二节 样本量估计软件实现 328

第三节 实验原始数据记录及预处理 333

第四节 统计分析方法的选择 337

第五节 学术论文设计方法描述 341