生物化学与分子生物学实验PDF电子书下载

第一章 光谱技术 1

第一节 光谱分析的基础知识 2

第二节 吸收光谱分析技术 4

第三节 其他光谱分析技术 15

实验一 血红蛋白及其衍生物的吸收光谱分析 16

实验二 血糖定量测定 19

实验三 血清总三酰甘油测定 25

实验四 血清总胆固醇含量测定 29

实验五 二乙酰-肟法测定血清尿素氮 32

实验六 维生素的测定 34

第二章 电泳技术 43

第一节 电泳技术的基本原理 43

第二节 乙酸纤维素薄膜电泳 47

第三节 琼脂糖凝胶电泳 47

第四节 聚丙烯酰胺凝胶电泳 48

第五节 其他电泳技术 52

实验七 血清蛋白乙酸纤维素薄膜电泳（常量法） 56

实验八 血清脂蛋白琼脂糖电泳 59

实验九 SDS-聚丙烯酰胺电泳法测定蛋白质相对分子质量 60

实验十 等电聚焦电泳法测定蛋白质等电点 62

实验十一 蛋白质双向凝胶电泳 64

第三章 层析技术 68

第一节 凝胶层析 70

第二节 离子交换层析 74

第三节 亲和层析技术 80

第四节 高效液相色谱 83

实验十二 葡聚糖G-25凝胶过滤去盐 85

实验十三 DEAE-纤维素离子交换色谱分离血清蛋白质 86

实验十四 DE-52分离血清γ-球蛋白 88

实验十五 血红蛋白A2（HbA2）微量柱层析测定 90

第四章 离心技术 92

第一节 离心分离的基本原理 92

一、作用在颗粒上的各种力 93

第二节 离心机的类型 96

第三节 离心分离的方法 99

第五章 蛋白质分析技术 105

第一节 蛋白质样品的分离纯化 106

第二节 蛋白质定量检测 116

第三节 蛋白质组学研究 121

实验十六 蛋白质含量测定 127

实验十七 蛋白质的印迹分析（Western印迹） 137

第六章 酶学分析技术 142

第一节 酶活力测定 142

第二节 影响酶促反应的因素 150

第三节 同工酶的测定 154

第四节 酶的分离纯化 159

实验十八 血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定（赖氏法） 174

实验十九 温度、pH值对酶促反应速率的影响 177

实验二十 底物浓度对酶活力的影响——碱性磷酸酶米氏常数的测定 180

实验二十一 血清乳酸脱氢酶（LDH）同工酶的测定 183

实验二十二 血清肌酸激酶同工酶测定（琼脂糖凝胶电泳法） 188

第七章 核酸的提取与分离 192

第一节 概述 192

第二节 真核基因组DNA提取与分离的基本实验原理及方法 195

第三节 质粒DNA的提取与纯化的方法及原理 197

第四节 RNA提取的实验原理与方法 200

实验二十三 动物组织真核基因组DNA的提取——蛋白酶K-苯酚抽提法 203

实验二十四 外周血白细胞DNA的提取——SDS裂解法 205

实验二十五 质粒DNA的提取——碱裂解法（小量制备） 206

实验二十六 质粒DNA的提取——煮沸法（小量制备） 208

实验二十七 聚乙二醇沉淀法纯化质粒DNA 210

实验二十八 真核细胞RNA的制备——异硫氰酸胍-酚-氯仿一步法（AGPC法） 212

实验二十九 真核细胞RNA的制备——Trizol抽提法 213

实验三十 寡聚（dT）-纤维素柱层析法分离mRNA 215

实验三十一 植物组织DNA的提取——CTAB法 217

第八章 核酸的鉴定与分析 219

第一节 核酸的定量、定性分析 219

第二节 核酸凝胶电泳 220

第三节 核酸分子杂交技术 220

第四节 聚合酶链式反应（PCR）技术 222

实验三十二 紫外分光光度法分析核酸的纯度及浓度 228

实验三十三 DNA的琼脂糖凝胶电泳 229

实验三十四 RNA的甲醛变性凝胶电泳 230

实验三十五 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 232

实验三十六 低熔点琼脂糖凝胶挖块回收实验 234

实验三十七 聚丙烯酰胺凝胶中DNA片段的回收实验 235

实验三十八 DNA印迹技术及放射性核素探针杂交（Southern杂交） 237

实验三十九 甲醛变性凝胶电泳分离RNA的Northern印迹杂交 238

实验四十 聚合酶链式反应扩增目的基因片段 241

实验四十一 反转录PCR（RT-PCR）扩增目的基因片段 243

第九章 核酸测序技术 248

第一节 测序技术 248

第二节 DNA序列分析 252

第十章 基因工程 256

第一节 基因工程工具酶 257

第二节 基因工程操作步骤 266

实验四十二 DNA的限制性核酸内切酶酶切反应 272

实验四十三 DNA的重组连接 275

实验四十四 感受态细胞的制备及质粒的转化 276

实验四十五 外源基因在大肠杆菌中的表达及其检测 278

参考文献 281