PCR检验技术PDF电子书下载

第一章 PCR技术概述 1

第一节 PCR技术的发明 1

第二节 PCR的基本原理 2

第三节 PCR技术的特点 4

第四节 PCR技术的新进展 5

第二章 FCR样品的制备 13

第一节 从全血细胞中快速提取DNA 13

第二节 从血清中快速提取DNA 14

第三节 从痰标本中提取DNA 15

第四节 从尿标本中提取DNA 16

第五节 从粪便标本中提取DNA 17

第六节 从体液标本中提取DNA 17

第七节 从临床拭子标本中提取DNA 18

第八节 从组织标本中提取DNA 19

第九节 从绒毛、羊水标本中提取DNA 20

第十节 从细菌培养物中提取DNA 21

第十一节 从法医学标本中提取DNA 22

第十二节 固相吸附法快速制备DNA和RNA（Boom法） 23

第十三节 从临床标本中快速提取RNA 24

第十四节 去除临床标本中血污染的方法 25

第十五节 DNA、RNA的浓度和纯度测定 26

第十六节 DNA、RNA的保存 26

第三章 PCR扩增操作方法 28

第一节 PCR扩增体系的组成 28

第二节 PCR扩增DNA操作方法 30

第三节 PCR扩增cDNA操作方法 32

第四节 PCR反应条件的选择及优化 34

第四章 PCR扩增产物的检测分析 36

第一节 琼脂糖凝胶电泳法 36

第二节 聚丙烯酰胺凝胶电泳法 39

第三节 限制性内切酶分析法 41

第四节 核酸探针杂交鉴定法 42

第五节 单链构型多态性分析法 45

第六节 酶免疫分析法 47

第七节 PCR出现问题的分析和解决办法 51

第五章 PCR检测常见传染病 53

第一节 PCR检测结核杆菌 53

第二节 PCR检测淋球菌 56

第三节 PCR检测检测霍乱弧菌 59

第四节 PCR检测脑膜炎球菌 61

第五节 PCR检测幽门螺杆菌 62

第六节 PCR检测嗜肺军团菌 65

第七节 PCR检测沙门氏杆菌 68

第八节 PCR检测白色念珠菌 70

第九节 PCR检测甲型肝炎病毒 73

第十节 PCR检测乙型肝炎病毒 75

第十一节 PCR检测丙型肝炎病毒 81

第十二节 PCR检测戊型肝炎病毒 83

第十三节 PCR检测狂犬病毒 85

第十四节 PCR检测巨细胞病毒 87

第十五节 PCR检测单纯疱疹病毒 89

第十六节 PCR检测人乳头瘤病毒 91

第十七节 PCR检测EB病毒 94

第十八节 PCR检测人类免疫缺陷病毒 96

第十九节 PCR检测腺病毒 100

第二十节 PCR检测乙脑病毒 103

第二十一节 PCR检测流行性出血热病毒 105

第二十二节 PCR检测沙眼衣原体 108

第二十三节 PCR检测肺炎支原体 110

第二十四节 PCR检测解脲脲原体 112

第二十五节 PCR检测梅毒螺旋体 113

第二十六节 PCR检测莱姆病螺旋体 116

第二十七节 PCR检测钩端螺旋体 119

第六章 PCR检测常见寄生虫病 123

第一节 PCR检测恶性疟原虫 123

第二节 PCR检测间日疟原虫 125

第三节 PCR检测弓形虫 126

第四节 PCR检测卡氏肺孢子虫 129

第五节 PCR检测克氏锥虫 131

第六节 PCR检测利什曼原虫 134

第七节 PCR检测隐孢子虫 136

第八节 PCR检测旋毛形线虫 138

第九节 PCR检测阿米巴原虫 140

第十节 PCR检测肠内贾第虫 143

第七章 PCR检测常见肿瘤的基因标志 157

第一节 PCR检测常见肿瘤时ras癌基因突变 157

第二节 PCR检测胰腺癌 161

第三节 PCR检测常见肿瘤时P53基因突变 163

第四节 PCR检测乳腺癌在腋下淋巴结中的微转移 167

第五节 PCR检测常见肿瘤时APC基因突变 170

第六节 PCR检测常见肿瘤时C-erb B2基因扩增 172

第七节 PCR检测常见肿瘤时DNA聚合酶β基因突变 174

第八节 PCR检测急性髓性白血病时AML1-ETO融合基因 176

第九节 PCR检测白血病时bcr/ab1融合基因mRNA 180

第十节 PCR检测急性早幼粒细胞白血病时RARa/MYL和MYL/RARa二种融合基因mRNA 182

第十一节 PCR检测淋巴瘤时t（14;18）染色体异位 186

第十二节 PCR检测外套细胞淋巴瘤时t（11;14）染色体异位 187

第十三节 PCR检测B淋巴细胞恶性肿瘤时免疫球蛋白重链基因重排 189

第十四节 PCR检测急性淋巴细胞白血病时T细胞受体基因重排 190

第十五节 PCR检测急性淋巴细胞白血病时E2A/PBX1融合mRNA 193

第十六节 PCR检测pre-pre-B-ALL时HRX-FEL融合转录本 195

第十七节 PCR检测t（17;19）（q22;p13）ALL时E2A/HLF融合基因 197

第十八节 PCR检测白血病患者体内的多药耐药基因表达 200

第八章 PCR检测遗传病 205

第一节 PCR检测地中海贫血 205

第二节 PCR检测血友病 209

第三节 PCR检测苯丙酮尿症 212

第四节 PCR检测杜氏／贝氏进行性肌营养不良症 215

第五节 PCR检测视网膜色素变性 218

第六节 PCR检测先天性肾上腺皮质增生症 220

第七节 PCR检测Leber's遗传性视神经病 221

第八节 PCR检测脆性-X综合症 223

第九节 PCR检测性别和性别发育异常 226

第十节 PCR检测亨廷顿氏病 229

第十一节 PCR检测G-6-PD缺陷 231

第十二节 PCR检测镰状细胞性贫血 233

第十三节 PCR-SSCP检测家族性多发性结肠息肉 235

第九章 PCR在法医学中的应用 240

第一节 PCR构建DNA指纹图谱技术 240

第二节 PCR在法庭物证鉴定中的应用 242

第三节 PCR在亲权鉴定中的应用 246

第十章 PCR在动植物检疫中的应用 250

第一节 PCR检测口蹄疫病毒 250

第二节 PCR检测非洲马瘟病毒 252

第三节 PCR检测猪瘟病毒 253

第四节 PCR检测猪繁殖和呼吸综合征病毒 254

第五节 PCR检测猪丹毒杆菌 256

第六节 PCR检测牛白血病病毒 257

第七节 PCR检测犬细小病毒 258

第八节 PCR检测蓝舌病病毒 259

第九节 PCR检测鸡传染性法氏囊病病毒 261

第十节 PCR检测牛病毒性腹泻病毒 262

第十一节 PCR检测伪狂犬病病毒 264

第十二节 PCR检测甘薯羽状斑驳病毒 265

第十三节 PCR检测番木瓜环斑病毒 266

第十四节 PCR检测黄瓜花叶病毒 268

第十五节 PCR检测甜菜黄化病毒 270

第十六节 PCR检测芜菁花叶病毒 271

第十七节 PCR检测辣椒轻微斑驳病毒 272

第十八节 单温扩增检测柑桔衰退病毒 274

第十九节 PCR/T检测菜豆黄色花叶病毒 277

附录一 分子生物学常用试剂和数据 279

一、常用DNA分子量标准参照物 279

二、几种生物的单倍体DNA含量 279

三、几种代表性限制性内切酶的细菌来源和靶顺序 279

四、常用蛋白酶抑制剂的特性 280

五、常用酶溶液的配制 281

六、用于λ噬菌体操作的溶液 282

七、常用缓冲液 282

八、同位素资料 286

九、凝胶加样缓冲液 287

十、常用的电泳缓冲液 288

十一、溴化乙锭溶液的净化处理 288

十二、PCR常用试剂的配制方法 289

十三、细菌培养基 292

十四、用于PCR的耐热DNA聚合酶特性 294

十五、常见抑制剂对TaqDNA聚合酶活性的影响 294

附录二 常见的市售酸碱的浓度 295

附录三 各种浓度的酸碱贮存液的近似pH值 295

附录四 医学检验常用试剂配制 295

附录五 国内外化学试剂的规格、等级与标志 303

附录六 常用化学药品的英文、分子式和分子量 305

附录七 原子量 313

附录八 国际制与统一公制计量单位对照 316

附录九 希腊字母表 317

附录十 离心转速与相对离心力（g）的换算 317

附录十一 几种常用指示剂变色点、变色范围及配制 318

附录十二 1ml水在不同温度时的重量对照表 318

附录十三 在标准温度20℃时标称容量的允许误差 318

附录十四 蛋白质含量测定 319

附录十五 分子生物学常用名词解释 321

附录十六 PCR常用缩写词汇注释 324

附录十七 医学检验中常用词汇英汉对照和缩写 325

附录十八 国内外常用PCR扩增仪 337

附录十九 国内检验试剂、仪器公司（厂）名录 338