高产L-（+）- 乳酸植物乳杆菌工程菌的构建与应用PDF电子书下载

1 绪论 1

1.1 乳酸的理化性质 1

1.2 L-(+)-乳酸及其应用 3

1.3 L-乳酸生产的研究 10

1.4 发酵法生产L-乳酸的研究 16

1.5 植物乳杆菌的作用与应用 30

2 乳酸菌的分离和初步鉴定 41

2.1 乳酸菌的分离纯化 41

2.2 形态学鉴定 41

2.3 乳酸菌的生化鉴定 43

2.4 Lactobacillus plantarum HF1生长产酸特性的研究 49

3 产高比例L-(+)-乳酸植物乳杆菌工程菌的构建 59

3.1 乳酸脱氢酶的催化反应机理 59

3.2 乳酸脱氢酶分子生物学研究 61

3.3 基因敲除的原理和在微生物育种上的应用 66

3.4 L-(+)-乳酸高产植物乳杆菌工程菌的构建 74

3.5 工程菌表达特性的研究 91

4 工程菌产乳酸发酵条件的优化 95

4.1 L.plantarum HF1.1培养基的优化 95

4.2 发酵条件的优化 106

4.3 分批中试发酵的研究 110

4.4 补料发酵的研究 111

5 工程菌用于发酵黄瓜的研究 114

5.1 HF3和HF5生长曲线的研究 114

5.2 HF3和HF5最适生长温度的研究 115

5.3 菌种耐盐试验 116

5.4 混合菌种发酵试验 117

5.5 工程菌与野生菌对比试验 119

5.6 黄瓜中试发酵试验 121

6 工程菌构建与应用的探讨 126

6.1 发酵蔬菜中乳酸菌的分离和鉴定 126

6.2 植物乳杆菌HF1和HF1.1乳酸脱氢酶的测定 127

6.3 植物乳杆菌HF1和HF1.1乳酸旋光性的测定方法 128

6.4 基因敲除法建立植物乳杆菌工程菌的可行性探讨 128

6.5 敲除载体的构建 129

6.6 转化子的筛选和鉴定 130

6.7 工程菌表达的特点 131

6.8 工程菌发酵条件的优化 131

6.9 多菌株联合发酵生产乳酸黄瓜 134

参考文献 137

附录 164

附录Ⅰ 培养基 164

附录Ⅱ 试验菌株 169

附录Ⅲ 仪器、设备和试剂 170

附录Ⅳ 试剂配制 172