分子生物学基本实验技术PDF电子书下载

目录 1

第一章 细胞培养技术 1

第一节 细胞培养的基本原理与技术 1

第二节 细胞培养的方法 6

第三节 体外培养细胞的观察 9

第四节 培养细胞增殖动力学 14

第五节 细胞的冻存、复苏与运输 17

第二章 DNA分析技术 19

第一节 真核细胞基因组DNA的提取 19

第二节 DNA的限制性内切酶消化 22

第三节 DNA的凝胶电泳 30

第四节 DNA的Southern印迹杂交分析 43

第三章 RNA分析技术 49

第一节 从组织或培养的细胞中分离RNA 49

第二节 从新鲜和冰冻血液中提取RNA 53

第三节 逆转录PCR技术 54

第四节 Northern印迹杂交技术 56

第五节 RNA狭缝印迹分析 60

第六节 RNase保护测定法 61

第七节 mRNA的引物延伸分析 64

第八节 RNAi技术路线选择及应用 68

第四章 核酸探针的制备与标记 73

第一节 基本概念 73

第二节 探针的核素标记 79

第三节 非放射性探针标记 84

第四节 探针的纯化和测定 87

第五章 聚合酶链反应 91

第一节 基本PCR技术 91

第二节 PCR反应条件的优化 93

第三节 RT-PCR反应 96

第四节 应用T-载体克隆PCR产物 99

第五节 差异显示PCR 100

第六节 免疫PCR 105

第七节 PCR-ELISA 108

第六章 基因克隆技术 110

第一节 基因克隆技术基本概念 110

第二节 体外连接方法 117

第三节 重组DNA转化宿主细胞 120

第四节 重组子的筛选和鉴定 123

第一节 外源基因导入哺乳动物细胞中的技术方法 129

第七章 外源基因在哺乳动物细胞中的表达 129

第二节 病毒载体介导的基因转移 134

第三节 报告基因的表达及检测 142

第八章 DNA与蛋白质的相互关系 148

第一节 细胞核蛋白的提取 148

第二节 凝胶滞后实验 149

第三节 干扰试验 153

第四节 染色质免疫沉淀实验 156

第一节 蛋白质的提取及浓度测定 159

第九章 蛋白质分析技术 159

第二节 蛋白质检测及鉴定技术 163

第三节 蛋白质的Western印迹分析 166

第四节 新的蛋白质检测技术 171

第十章 网络资源在分子生物学中的应用 178

第一节 生物信息学的概念 178

第二节 生物信息数据库及查询 178

第三节 基因电子克隆的基本思路 186

第四节 核酸与蛋白质序列分析 187

第五节 基因表达谱分析 191

第六节 实验室常用生物学软件 193

第十一章 动物模型 201

第一节 实验动物概述 201

第二节 常用大、小鼠品系介绍 203

第三节 动物模型 204

第四节 实验动物的给药途径、方法和给药量计算方法 207

第五节 实验动物全身麻醉的常用方法及剂量 213

第六节 实验动物体液采集与脏器活检 214

第七节 实验动物的脏器活检 218

一、实验常用器材处理 223

附录 223

二、Tris饱和酚的配制 224

三、常用的缓冲液和试剂 224

四、常用酶的配制 230

五、细菌培养基和抗生素 231

六、核素资料 233

七、核酸及蛋白质数据 234

八、常用分子量标准参照物 236

九、分子生物学常用英语词汇 238

参考文献 269