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序 1

前言 1

绪论 1

第一篇 基础方法 7

第一章 显微镜的构造及其使用 7

第一节 普通光学显微镜的构造和使用 7

第二节 相差显微镜的构造和使用 12

第三节 暗视野显微镜的构造和使用 15

第四节 透射电子显微镜的构造和使用 17

第五节 扫描电子显微镜的构造和使用 30

第六节 扫描透射电子显微镜的构造和使用 38

第七节 超高压电子显微镜 40

第二章 微生物的形态及其观察 41

第一节 细菌的三种基本形态及其简单染色 41

第二节 细菌的运动观察及其鞭毛染色 42

第三节 细菌的革兰氏染色 45

第四节 细菌的芽孢染色 47

第五节 细菌的荚膜染色 48

第六节 霉菌和假丝酵母的载片培养与观察 50

第七节 酵母菌子囊孢子的培养与观察 52

第八节 放线菌的插片、搭片培养及观察 54

第九节 放线菌的玻璃纸覆盖法和印片染色法 56

第十节 病毒粒子的电镜观察 58

第十一节 几大类微生物菌落的识别与观察 61

第三章 微生物大小的测定及计数 65

第一节 微生物细胞大小的测定 65

第二节 微生物的显微镜直接计数 67

第三节 微生物平板稀释法计数 71

第四节 最大近似值法计数（MPN）（稀释培养计数） 73

第五节 细菌生长曲线的测定 75

第四章 培养基的制备与灭菌消毒 77

第一节 培养基的制备 77

第二节 干热灭菌法 80

第三节 常压蒸汽灭菌法 82

第四节 加压蒸汽灭菌法 83

第五节 过滤除菌法 85

第六节 紫外线灭菌 88

第七节 化学药剂消毒灭菌 89

第五章 无菌操作与接种技术 93

第一节 无菌操作技术（讲解和示范） 93

第二节 微生物接种技术 96

第六章 微生物育种和菌种保藏 101

第一节 紫外线诱变育种 101

第二节 化学诱变育种 103

第三节 原生质体融合育种 105

第四节 微生物菌种常规保藏方法 113

第五节 微生物菌种的冷冻干燥保藏法 118

第六节 液氮超低温保藏法 121

第七章 杀虫微生物及其制剂 127

第一节 从感病死亡昆虫体分离杀虫苏云金杆菌 127

第二篇 生物防治微生物及制品 127

第二节 从感病死亡昆虫体分离杀虫日本金龟子芽孢杆菌（乳状菌） 128

第三节 用选择性培养基从土壤中分离苏云金杆菌 130

第四节 苏云金杆菌芽孢和伴胞晶体的区别（染色） 131

第五节 苏云金杆菌感染菜青虫 132

第六节 乳糖-丙酮沉淀法制备苏云金杆菌粉剂 135

第七节 白僵菌的分离与鉴定 136

第八节 白僵菌生产菌株的虫体复壮 138

第九节 用液体-固体培养法制备白僵菌粉 139

第十节 核多角体病毒的分离及提纯 141

第十一节 棉铃虫核多角体病毒制剂的制备 144

第十二节 昆虫病毒多角体的染色观察 145

第八章 杀菌微生物及其制剂 148

第一节 生防菌的主要微生物种类 148

第二节 生防菌生产工艺 149

第三节 生防菌制剂及应用 150

第九章 除草微生物及其制剂 154

第一节 除草剂的微生物种类 154

第二节 除草剂制剂及其应用 155

第三篇 食品微生物及其发酵产物 161

第十章 食品微生物检验及测定 161

第一节 食品中细菌总数的测定 161

第二节 食品中大肠菌群的检验 163

第三节 番茄制品中的霉菌直接镜检计数 166

第四节 食品中耐热性细菌的检验及计数 167

第五节 商业性灭菌试验 169

第六节 微生物热力致死时间的测定 173

第十一章 发酵微生物及其制品的鉴定、测定 175

第一节 糖化曲中糖化酶的测定 175

第二节 酒曲中酵母菌的分离 178

第三节 红曲的制备及红方腐乳的生产 179

第四节 泡菜制作及乳酸菌的分离与初步鉴定 182

第五节 酸奶的酿造及乳酸的快速测定（酶法） 184

第六节 食醋的酿造及醋醪中醋酸菌的分离 187

第七节 食品中乙醇的快速测定（酶法） 189

第八节 噬菌体的培养及噬菌斑的观察 191

第十二章 食用菌的制种方法和栽培技术 193

第一节 子实体形态观察 193

第二节 平菇的母种、原种、栽培种的制备 194

第三节 平菇的出菇试验 197

第四节 香菇的纯种分离与培养 198

第五节 灵芝的纯种分离与培养 200

第六节 食用菌的菌种保藏与复壮 202

第四篇 土壤和环境微生物及其物质转化 209

第十三章 土壤、环境微生物 209

第一节 土壤中好氧细菌的分离与计数 209

第二节 土壤中放线菌的分离与计数 211

第三节 土壤中真菌的分离与计数 213

第四节 土壤生物量的测定 215

第五节 外生菌根菌的分离及染色观察 217

第六节 根瘤菌固氮酶活性的测定 219

第七节 环境微生物的观察 220

第一节 纤维素的微生物降解 223

第十四章 物质转化 223

第二节 果胶物质的微生物分解 225

第三节 钾素的微生物分解 226

第四节 磷素的微生物分解 227

第五节 硫化作用及硫化细菌观察 228

第六节 氨化作用 229

第七节 硝化与反硝化作用 231

第一节 杂交瘤技术 237

第十五章 单克隆抗体技术 237

第五篇 微生物学研究的一些新技术 237

第二节 单克隆抗体技术的进展与应用 251

第十六章 PCR技术 254

第一节 PCR技术的基本原理和方法 254

第二节 PCR技术的应用 265

第十七章 质粒DNA的提取 266

第一节 碱裂解法制备质粒DNA 266

第二节 SDS裂解法制备质粒DNA 269

第三节 质粒DNA的纯化 271

第十八章 DNA的重组技术 274

第一节 黏端连接法 274

第二节 黏-平端连接法 277

第三节 重组质粒的鉴定 279

第十九章 DNA序列分析 289

第一节 循环测序——银染色测定DNA序列 289

第二节 Maxam-Gilbert化学法测定DNA序列 295

第三节 DNA序列的自动化测定 300

第二十章 核酸探针的制备 307

第一节 双链DNA缺口平移标记法 308

第二节 随机引物标记法 312

第三节 RNA探针标记法 314

第四节 沉淀法纯化标记探针 317

第五节 柱层析法纯化标记探针 318

第六节 探针标记效率的检测 321

第二十一章 基因组DNA的分离与纯化 324

参考文献 331