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目录 3

上篇 禽传染病实验室诊断技术 3

第一章　实验室工作基本技术 3

第一节 实验室工作注意事项及防护处理 3

一、实验室工作注意事项 3

二、意外事件的预防和处理 4

第二节　常用药械的准备及使用方法 5

一、常用器材和药品 5

二、物品订购、贮藏及财产登记 8

三、常用仪器设备的使用方法 9

第三节 菌（毒）种保存法及保存培养基 21

一、菌（毒）种保存法 21

二、菌（毒）种保存培养基 23

一、冻干菌（毒）种的启封 24

第四节　其他技术 24

二、棉塞的制作 25

三、移液管的包装 25

四、使用吸管的技术 25

参考文献 26

第二章　培养基的制造与应用 27

第一节　培养基的分类 27

一、以成分区分 27

二、以形态区分 27

三、以用途区分 28

第二节　制造培养基前的准备 29

一、常用玻璃器皿的准备 29

二、原材料的准备 30

三、投料、配制 36

二、培养基的制造记录 36

一、材料用量的计算 36

第三节　培养基制造程序 36

四、培养基pH的调节 37

五、过滤和分装 43

六、培养基的灭菌和贮存 44

七、培养基的质量检验 47

参考文献 48

第三章　细菌的分离培养及鉴定 49

第一节　病料的采集和运送 49

一、采集病料的注意事项 49

二、采集病料的方法 49

三、病料的运送 50

第二节　细菌的分离培养 51

一、待检材料的处理 51

二、分离培养注意事项 52

三、细菌的分离和接种 53

四、细菌的培养方法 55

五、获取纯菌的方法 57

六、细菌计数法 58

第三节　细菌的鉴定 60

一、形态学检查 60

二、培养特性检查 67

三、生化特性检查 71

四、细菌血清型鉴定及血清学试验 96

第四节　细菌毒力测定 97

参考文献 98

第四章 细菌DNA G+C含量的测定 100

一、细菌DNA的提取 100

二、细菌DNA G+C含量的测定——热变性温度法 101

参考文献 104

第五章　药物敏感试验 105

第一节　药物敏感试验的目的和原理 105

一、药物敏感试验的目的 105

二、药敏测定的原理 106

第二节　单价药物对细菌的药敏测定 106

一、试管两倍稀释法 106

二、微量稀释法 107

三、琼脂平板稀释法 108

四、药物纸片琼脂扩散法（纸片法） 108

五、Stokes纸片比较法 116

六、影响药敏试验结果的因素 116

七、敏感度的划分及临床意义 117

八、药敏试验的改进 117

一、纸片法 118

第三节　细菌对抗菌药物的联合药敏试验 118

二、棋盘法 120

三、联合药敏抗菌药物组合的选择 121

第四节 药敏试验结果的评价与剂量计算方法 122

一、药敏试验结果的评价 122

二、剂量计算方法 122

第五节 影印培养法测定最低杀菌浓度（MBC） 122

参考文献 123

第六章　病毒的分离培养及鉴定 124

第一节　病毒的分离 124

一、样品的采集与保存 124

二、样品的处理 125

三、样品的接种 125

一、器材准备 134

第二节　细胞培养技术 134

二、细胞培养用溶液的配制 136

三、常用细胞培养物的制备 141

四、细胞培养常见问题及解决方法 143

五、细胞的保存、复苏及运送 145

六、细胞培养中污染的消除 146

第三节　病毒的鉴定 147

一、核酸类型鉴定 148

二、脂溶剂敏感试验 150

三、病毒粒子大小测定 150

四、核衣壳的对称 152

五、病毒感染力的测定 153

六、其他方法 155

参考文献 156

一、试验病毒株的选择 158

二、灭活水平的确定 158

第七章　杀病毒试验 158

第一节　杀病毒试验的条件 158

三、对杀病毒试验的评估 159

第二节　杀病毒试验的方法 159

一、载体试验 159

二、悬浮试验 161

参考文献 163

第八章　血清学试验 164

第一节　凝集试验 164

一、试剂准备 164

二、几种常用的凝集试验 165

第二节　血凝和血凝抑制试验 168

一、原理 170

第三节　间接血凝试验 170

二、优点 171

三、缺点 171

四、醛化红细胞的制备 172

五、间接血凝试验程序 173

第四节　沉淀试验 176

一、琼脂凝胶沉淀试验（AGpT） 176

二、对流免疫电泳（CIEP） 178

三、火箭免疫电泳（RIE） 179

第五节　中和试验 180

一、常规中和试验 180

二、微量细胞培养中和试验 183

三、空斑减少试验 185

一、免疫酶技术的分类 186

第六节　免疫酶技术 186

二、免疫酶技术的原理 187

三、免疫酶技术的条件 187

四、标记物的制备 188

五、酶底物的配制 192

六、检测方法 193

七、常见免疫酶测定法 194

第七节　免疫荧光技术 200

一、IF技术的特点 201

二、IF技术的必备条件 201

三、荧光抗体的制备 202

四、荧光抗体染色法 204

参考文献 208

第一节　免疫球蛋白的分离技术 210

一、盐析法 210

第九章　免疫球蛋白分离及单克隆抗体技术 210

二、离子交换层析法 211

三、凝胶过滤法 213

第二节　免疫血清的制备、浓缩及保存 217

一、免疫血清的制备 217

二、免疫血清的浓缩 217

三、免疫血清的保存 218

第三节　鸡蛋黄IgY的制备与提纯 218

一、蛋黄的组成及形成 219

二、IgY的性质 219

三、IgY的免疫制备 220

四、IgY的提纯 220

第四节　单克隆抗体技术 222

一、McAb的制备 222

三、试剂配制 226

二、McAb的生产 226

参考文献 227

中篇 禽病的病理学诊断技术 231

第十章　尸体剖检技术 231

一、尸检的目的 231

二、尸检的时间、地点、用具及注意事项 231

三、尸检程序和方法 232

四、尸检记录 248

参考文献 250

第十一章　眼观病理标本的制作技术 251

一、标本的选择与清理 251

二、非原色标本制作 251

三、原色标本制作 253

参考文献 254

一、取材 255

第十二章　病理组织切片制作技术 255

二、固定和固定液 256

三、水洗 259

四、脱水 259

五、透明 260

六、浸蜡 260

七、包埋 261

八、切片 261

九、附贴 262

十、染色 263

参考文献 266

第十三章　常见禽病的尸体剖检诊断 267

一、细菌性传染病 267

二、病毒性传染病 270

三、其他微生物病 272

四、寄生虫病 273

五、营养代谢病 273

六、中毒性疾病 275

参考文献 275

下篇 常见禽传染病的实验室诊断 279

第十四章　细菌病的实验室诊断 279

第一节　沙门菌病（avian Salmonellosis） 279

一、样品采集、运送和保存 280

二、形态学镜检 280

三、分离培养 280

四、生化试验 282

五、血清学诊断 282

六、类症鉴别 288

二、形态学镜检 289

一、样品采集和保存 289

第二节　大肠杆菌病（colibacillosis） 289

三、分离培养 290

四、生化特性 290

五、血清学鉴定 290

六、类症鉴别 296

第三节　禽霍乱（fowl cholera） 296

一、样品采集和保存 296

二、形态学镜检 297

三、分离培养 297

四、生化特性 298

五、血清学诊断 298

六、类症鉴别 299

第四节 鸭疫里默菌感染（riemerella anatipestifer infection） 299

四、生化特性 300

五、血清学诊断 300

一、样品采集和保存 300

三、分离培养 300

二、形态学镜检 300

六、类症鉴别 302

第五节　传染性鼻炎（infectious coryza） 302

一、样品采集和保存 302

二、形态学镜检 303

三、分离培养 303

四、生化特性 304

五、血清学诊断 304

六、类症鉴别 306

第六节　葡萄球菌病（staphylococcosis） 306

三、分离培养 307

二、形态学镜检 307

一、样品采集和保存 307

四、生化特性 308

五、血浆凝固酶试验 309

六、血清学诊断 309

七、动物试验 309

八、类症鉴别 310

第七节　链球菌病（streptococcosis） 310

一、样品采集和保存 310

二、形态学镜检 311

三、分离培养 311

四、生化特性 312

五、血清学诊断 313

二、形态学镜检 314

三、分离培养 314

第八节　铜绿假单胞菌病（infection of pseudomonas aeruginosa） 314

一、样品采集 314

六、类症鉴别 314

四、生化特性 315

五、血清学诊断 316

六、动物试验 316

七、类症鉴别 317

第九节 弯曲杆菌病（campylobacteriosis） 317

一、样品采集和保存 317

二、形态学镜检 318

三、分离培养 318

四、生化特性 319

一、坏死性肠炎（necrotic enteritis） 320

第十节 梭状芽孢杆菌病（clostridiosis） 320

六、类症鉴别 320

五、血清学诊断 320

二、溃疡性肠炎（ulcerative enteritis） 323

三、坏疽性皮炎（gangrenous dermatitis） 324

四、肉毒中毒（botulism） 325

第十一节　李氏杆菌病（Listeriosis） 329

一、样品采集和处理 330

二、形态学镜检 330

三、分离培养 330

四、生化特性 331

五、血清学诊断 332

六、类症鉴别 332

第十二节　丹毒（erysipelas） 332

三、分离培养 333

二、形态学镜检 333

一、样品采集和保存 333

四、生化特性 334

五、血清学诊断 334

六、类症鉴别 335

第十三节　结核（tuberculosis） 335

一、样品采集和处理 335

二、形态学镜检 336

三、分离培养 337

四、生化特性 337

五、血清学诊断 338

六、结核菌素试验 339

七、类症鉴别 339

第十四节　波氏杆菌病（Bordetellosis） 339

二、形态学镜检 340

三、分离培养 340

一、样品采集和保存 340

四、生化特性 341

五、血清学诊断 341

六、类症鉴别 343

参考文献 343

第十五章　病毒病的实验室诊断 345

第一节　禽流感（avian influenza） 346

一、样品采集和保存 346

二、分离培养 347

三、形态结构 348

四、理化特性 349

五、血清学诊断 351

六、类症鉴别 358

一、样品采集和处理 359

第二节　新城疫（newcastle disease） 359

二、分离培养 360

三、形态结构 360

四、理化特性 361

五、病型和毒力测定 361

六、血清学诊断 365

七、类症鉴别 367

第三节　传染性法氏囊病（infectious bursal disease） 368

一、样品采集和保存 369

二、分离培养 369

三、形态结构 370

四、理化特性 371

五、血清学诊断 371

六、类症鉴别 376

第四节 传染性支气管炎（infectious bronchitis） 377

二、分离培养 378

一、样品采集和保存 378

三、形态结构 379

四、理化特性 379

五、血清学诊断 380

六、类症鉴别 382

第五节 传染性喉气管炎（infectious laryngotracheitis） 382

一、样品采集和保存 382

二、分离培养 383

三、形态结构 383

四、电镜观察和病理组织学检查 384

五、理化特性 384

六、血清学诊断 384

二、分离培养 387

一、病料采集和保存 387

第六节 病毒性关节炎（viral arthritis） 387

七、类症鉴别 387

三、形态结构 388

四、理化特性 388

五、血清学诊断 389

六、类症鉴别 392

第七节　鸡传染性贫血（chicken infectious anemia） 392

一、样品采集和保存 393

二、分离培养 393

三、形态结构 393

四、理化特性 394

五、组织病理学诊断 394

六、血清学诊断 394

七、类症鉴别 396

二、分离培养 397

第八节　禽痘（avian pox） 397

一、病料采集和保存 397

三、形态结构 398

四、理化特性 398

五、包涵体检查 399

六、血清学诊断 399

七、类症鉴别 400

第九节 腺病毒感染（avian adenovirus infection） 400

一、蛋减综合征-1976（egg drop syndrome-1976） 401

二、包涵体肝炎（inclusion body hepat-itis） 405

三、鹌鹑支气管炎（quail bronchitis） 407

四、火鸡出血性肠炎（hemorrhagic enteritis of turkeys） 408

第十节　禽脑脊髓炎（avian encephalom-yelitis） 409

三、形态结构 410

四、理化特性 410

一、样品采集和保存 410

二、分离培养 410

五、血清学诊断 411

六、病理组织学诊断 412

七、类症鉴别 412

第十一节　禽白血病（avian leukosis） 413

一、样品采集和保存 414

二、分离培养 414

三、形态结构 415

四、理化特性 416

五、血清学诊断 416

六、类症鉴别 420

一、样品采集和保存 421

第十二节　马立克病（Marek's disease） 421

二、分离培养 422

三、形态结构 423

四、理化特性 423

五、毒株分类 424

六、血清学诊断 424

七、类症鉴别 427

第十三节 网状内皮组织增生病（reticulo-endotheliosis） 428

一、样品采集和保存 428

二、分离培养 428

三、形态结构 429

四、理化特性 429

五、血清学诊断 429

一、样品采集和保存 431

第十四节　鸭瘟（duck plague） 431

六、类症鉴别 431

二、分离培养 432

三、形态结构 432

四、理化特性 433

五、血清学诊断 433

六、类症鉴别 435

第十五节 鸭肝炎（duck hepatitis） 435

一、样品采集和保存 436

二、分离培养 436

三、形态结构 437

四、理化特性 437

五、血清学诊断 437

六、类症鉴别 439

一、样品采集和保存 440

二、分离培养 440

第十六节 小鹅瘟（gosling plague） 440

三、形态结构 441

四、理化特性 441

五、血清学诊断 441

六、类症鉴别 444

第十七节　雏番鸭细小病毒病（muscovy duck-ling parvovirusis） 444

一、样品采集和保存 445

二、分离培养 445

三、形态结构 446

四、理化特性 446

五、血清学诊断 446

六、类症鉴别 449

一、样品的采集和保存 450

二、分离培养 450

第十八节　禽轮状病毒感染（avian rotavirus infection） 450

三、形态结构 451

四、理化特性 452

五、血清学诊断 453

六、电镜技术 453

七、聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE） 453

八、类症鉴别 454

第十九节　禽肾炎（avian nephritis） 454

一、样品采集与保存 455

二、分离培养 455

三、形态结构与理化特性 455

四、血清学诊断 456

五、类症鉴别 456

参考文献 456

第一节　禽支原体病（avian mycoplasmosis） 461

第十六章　其他微生物病的实验室诊断 461

一、样品采集和保存 462

二、形态学镜检 463

三、分离培养 463

四、生化特性 465

五、血清学诊断 465

六、类症鉴别 471

第二节　禽衣原体病（avian chlanydiosis） 473

一、样品采集和保存 473

二、形态学镜检 474

三、分离培养 476

四、种株鉴别 477

五、血清学诊断 478

六、类症鉴别 482

二、形态染色 483

第三节　螺旋体病（spirochetosis） 483

一、样品采集和保存 483

三、分离培养 484

四、血清学诊断 484

五、类症鉴别 485

第四节　真菌病（mycoses） 485

一、禽曲霉菌病（avian aspergillosis）概述 485

二、样品采集 485

三、显微镜检查 486

四、分离培养 486

五、动物试验 488

六、血清学诊断 488

七、类症鉴别 488

参考文献 489