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第一部分 生物化学实验基本知识 3

第一章 生物化学实验的安全与要求 3

第一节 生物化学实验室规则 3

第二节 生物化学实验室安全与防护常识 4

一、实验室安全要求 4

二、实验室可能出现的危险情况 5

第二章 实验记录与实验报告 8

第一节 实验记录 8

第二节 实验报告 8

一、实验报告的格式 9

二、实验报告的内容 9

三、实验结果的讨论 9

第三章 生物化学实验基本实验操作 10

第一节 玻璃仪器的洗涤与干燥 10

一、玻璃仪器的清洗 10

二、一些常用的洗涤剂 11

三、玻璃仪器的干燥 11

四、溶液的混匀 12

五、过滤 12

第二节 计量仪器的选择与使用 13

一、液体的量取 13

二、液体的盛放和储存 17

第三节 灭菌及消毒方法 18

一、物理方法灭菌 18

二、化学方法灭菌 19

三、过滤除菌 19

四、紫外杀菌 19

第四章 生物化学实验室的基本设施与装备 20

第一节 基本设施 20

一、温度与环境设施 20

二、生物培养设施 20

三、暗室 20

第二节 主要装备 21

一、消毒设备 21

二、实验室纯水设备 21

三、计量仪器与设备 21

四、电泳装置 21

五、离心设备 21

六、层析设备 22

七、PCR仪 22

八、其他设备 22

第五章 生物大分子制备技术 23

第一节 生物大分子制备的前处理 23

一、材料的选择 23

二、细胞的破碎 23

第二节 生物大分子的分离纯化 24

一、生物大分子的提取 24

二、生物大分子分离纯化的方法 25

第二部分 生物化学实验原理与技术 29

第六章 分光光度技术 29

一、基本原理 29

二、分光光度计的分类和构造 30

第七章 电泳技术 32

一、基本原理 32

二、几种常用电泳 35

第八章 层析技术 40

一、层析的分类 40

二、层析中的常用术语 41

三、纸层析 44

四、薄层层析 45

五、离子交换层析 46

六、凝胶层析 48

七、亲和层析 50

第九章 离心技术 51

一、基本原理 51

二、离心机和转子的种类 51

三、制备型超速离心的分离方法 54

四、离心操作的注意事项 56

第十章 透析技术 57

一、透析原理及影响因素 57

二、透析技术的应用 58

三、透析操作及注意事项 58

第三部分 生物化学基础实验 63

第十一章 糖与脂类 63

实验一 糖定量测定（蒽酮法） 63

实验二 脂肪皂化值的测定 65

实验三 脂肪碘值的测定 67

第十二章 蛋白质 69

实验四 氨基酸的分离与鉴定 69

实验五DNS-C1法测定蛋白质N-末端的氨基酸 72

实验六 蛋白质的沉淀作用 74

实验七 蛋白质的两性反应与等电点的测定 77

实验八 氨基酸和蛋白质的颜色反应 79

实验九 牛乳中蛋白质的提取与鉴定 82

实验十 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质 83

实验十一 蛋白质总氮量的测定——凯氏定氮法 87

实验十二 凝胶层析法测定蛋白质相对分子质量 90

实验十三 细胞色素c的制备及其测定 92

实验十四 醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白质 95

实验十五 血红蛋白的凝胶过滤 98

实验十六SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）测定蛋白质相对分子质量 99

实验十七DEAE-离子交换剂纯化血清IgG 108

第十三章酶 111

实验十八 酶的性质研究 111

实验十九 细胞色素氧化酶的作用 116

实验二十胰蛋白酶抑制剂的制备与抑制活性的测定 117

实验二十一 亲和层析法从鸡蛋清中分离溶菌酶 120

实验二十二 聚丙烯酰胺凝胶分离过氧化物同工酶 123

实验二十三 水果或蔬菜中抗坏血酸的测定（2，6-二氯酚靛酚法） 127

实验二十四 超氧化物歧化酶（SOD）活力测定 129

实验二十五 酯酶和乳酸脱氢同工酶分析 133

实验二十六 胡萝卜素的柱层析分离 136

第十四章糖、脂肪、蛋白质代谢 139

实验二十七 胰岛素对血糖水平的影响 139

实验二十八 肝糖原的提取与鉴定 141

实验二十九 脂肪酸β-氧化作用 143

实验三十 植物体内的转氨基作用 145

实验三十一 纸层析分析动物组织的转氨基作用 146

实验三十二 转氨酶活性的测定 148

第十五章 核酸 151

实验三十三 肝脏DNA的提取 151

实验三十四 动物肝脏RNA的制备 154

实验三十五 碱性SDS法提取大肠杆菌质粒 156

实验三十六 酵母核糖核酸的分离及组分鉴定 159

实验三十七 浓盐法提取酵母RNA 161

实验三十八 紫外吸收法测定核酸含量 163

实验三十九 二苯胺显色法测定DNA含量 164

实验四十 定磷法测定RNA含量 166

实验四十一 植物DNA的提取与测定 168

实验四十二 植物总RNA的提取与分析 171

实验四十三PCR扩增技术 173

实验四十四DNA琼脂糖凝胶电泳 176

实验四十五总RNA的提取及RT - PCR扩增目的基因 178

第四部分 综合性实验 185

第十六章古DNA研究简介 185

第十七章古DNA的提取与PCR扩增 188

实验四十六古DNA的提取 188

实验四十七古DNA多重PCR扩增 190

实验四十八PCR产物的电泳及纯化 193

第十八章古DNA片段的分子克隆 195

实验四十九 大肠杆菌感受态细胞的制备 195

实验五十 重组DNA分子连接及转化 197

实验五十一 转化菌落PCR检测 200

附录 204

一、常用酸碱和固态化合物的部分数据 204

二、溶液的配制 205

三、标准缓冲溶液的配制方法 205

四、常用缓冲液的配制 206

五、常用试剂和电泳缓冲液的配制 209

六、电泳染色方法 210

七、硫酸铵饱和度的常用表 213

八、常用核酸与蛋白质的换算数据 214

九、常用层析介质数据 215

十、离心力与离心机转速测算表 217

十一、与DNA凝胶电泳有关的数据 218

十二、常用培养基的配制 219

十三、常用蛋白质相对分子质量标准参照物 220

十四、十进位数量词头及符号 220

参考文献 221