生物化学实验原理和方法PDF电子书下载

第一部分 生物化学实验原理 1

第一章 液相层析法的一般原理和操作 1

第一节 引言 1

第二节 层析法的一般原理 2

第三节 洗脱峰不对称性及其原因 7

第四节 多组分的分离 8

第五节 柱层析系统基本操作方法 10

第二章 吸附层析法 16

第一节 原理 16

第二节 吸附剂的类型及选择 16

第三节 溶剂与洗脱剂 17

第三章 薄层层析法 19

第一节 引言 19

第二节 薄层层析原理 19

第三节 固定相支持介质的选择 20

第四节 薄层层析操作技术 22

第五节 薄层层析的定性分析 26

第六节 薄层层析的定量分析 27

第四章 纸层析法 28

第一节 纸层析基本原理 28

第二节 影响Rf值的主要因素 28

第三节 实验操作技术 30

第五章 离子交换层析法 36

第一节 基本原理 36

第二节 离子交换树脂的结构和常用的离子交换剂 38

第三节 离子交换剂的选择 40

第四节 树脂的处理、转型、再生与保存 42

第五节 离子交换层析法的应用 43

第六节 离子交换纤维素 43

第六章 凝胶层析法 47

第一节 引言 47

第二节 基本原理 47

第三节 凝胶的条件和类型 49

第四节 凝胶层析的实验技术 53

第五节 影响凝胶层析的主要因素 55

第七章 亲和层析法 57

第一节 基本原理 57

第二节 配基和载体的选择 57

第三节 亲和吸附剂的制备方法 59

第四节 亲和层析技术 63

第五节 亲和层析应用举例 65

第六节 金属螯合亲和层析 66

第八章 电泳 69

第一节 电泳基本原理 69

第二节 电泳的分类 74

第三节 醋酸纤维薄膜电泳原理 75

第四节 以琼脂（糖为支持物的电泳 75

第五节 以聚丙烯酰胺凝胶为支持物的电泳 82

第六节 染色方法 100

第九章 分光光度法 107

第一节 原理 107

第二节 光吸收的测定 109

第十章 生物大分子的分离纯化与鉴定 117

第一节 引言 117

第二节 生物大分子制备的前处理 118

第三节 分离纯化 120

第四节 生物大分子的浓缩、干燥和保存 121

第五节 生物大分子含量的测定和纯度鉴定 123

第二部分 生物化学实验 125

实验1 糖的呈色反应和还原糖的检验 125

实验2 糖的定量测定 131

实验3 粘多糖-肝素钠效价的测定 133

实验4 油脂皂化与皂化值的测定 136

实验5 脂肪碘值的测定 139

实验6 血清胆固醇的测定磷硫铁法 142

实验7 脂类组成对脂类单分子层通透性的影响 145

实验8 去污剂及膜活性试剂对红血球细胞膜的作用 147

实验9 蛋白质和氨基酸的呈色反应 150

实验10 蛋白质的沉淀、变性反应 156

实验11 蛋白质浓度测定（1）——总氮量的测定 160

实验12 蛋白质浓度测定（2）——双缩脲法 165

实验13 蛋白质浓度测定（3）——Folin-酚测定法 168

实验14 蛋白质浓度测定（4）——紫外线（UV）吸收法 171

实验15 蛋白质浓度测定（5）——考马斯亮蓝染色法 174

实验16 氨基酸的分离与鉴定——滤纸层析法 177

实验17 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳 182

实验18 聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离血清蛋白 189

实验19 聚丙烯酰胺等电聚焦电泳 197

实验20 蛋白质分子量测定（1）——葡聚糖凝胶薄层层析法 204

实验21 蛋白质分子量测定（2）——凝胶过滤层析法 207

实验22 蛋白质分子量测定（3）——SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 216

实验23 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（银染色法） 224

实验24 脂蛋白的分离——琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶电泳 227

实验25 蛋白质多肽链N-末端氨基酸测定——DNS-Cl法 232

实验26 细胞色素C的制备和测定 240

实验27 酵母RNA提取与地衣酚显色测定法 257

实验28 猪脾脏DNA提取与二苯胺测定法 260

实验29 植物DNA的提取 264

实验30 RNA水解及其产物核苷酸聚酰胺薄膜层析 266

实验31 核酸浓度测定（1）——定磷法 270

实验32 核酸浓度测定（2）——紫外线（UV）吸收法 275

实验33 质粒DNA的微量制备（碱裂解法、煮沸法） 278

实验34 DNA的琼脂糖凝胶电泳 284

实验35 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 290

实验36 维生素A,B1和B2的定性鉴定 295

实验37 维生素B1的荧光测定法 298

实验38 维生素B2（核黄素）的荧光测定法 300

实验39 维生素C的定量测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法） 302

实验40 肾上腺素的提取与鉴定 306

实验41 酶的特性——底物专一性 308

实验42 脂肪酶活性测定 311

实验43 血清谷丙转氨酶（SGPT）测定（King氏法） 313

实验44 超氧化物歧化酶的分离纯化 318

实验45 超氧化物歧化酶活性染色鉴定法 324

实验46 影响酶促反应速度的因素（1）——底物浓度、米氏常数（Km）的测定 327

实验47 影响酶促反应速度的因素（2）——激活剂与抑制剂 333

实验48 影响酶促反应速度的因素（3）——pH、最适pH 335

实验49 影响酶促反应速度的因素（4）——温度、最适温度 338

实验50 酯酶的分离、纯化与活性测定 341

实验51 亲和层析法分离乳酸脱氢酶 346

实验52 乳酸脱氢酶活力测定 351

实验53 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶（活性染色鉴定法） 354

实验54 尿激酶的纯化及活性测定 358

实验55 辅酶I（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，NAD+）含量测定 363

实验56 辅酶A含量测定 366

实验57 胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响 369

实验58 肌糖元的酵解作用 374

实验59 用正交法测定几种因素对酵母发酵作用的影响 377

实验60 免疫扩散和免疫电泳 381

实验61 酶联免疫吸附测定法 390

第三部分 附录 397

一、实验室安全及防护知识 397

二、试剂及试剂配制与保存 400

三、一些常用单位 410

四、单位与浓度的表示及溶液浓度的调整 411

五、实验误差与提高实验准确度的方法 415

六、实验记录与实验报告 419

七、常用数据表 423

八、层析、电泳材料 434

九、其他附表 444

十、常用仪器的使用方法 447